温州市科技计划项目(Y20080101)
- 作品数：8 被引量：36H指数：5
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- 相关机构：温州医学院附属第一医院南昌大学第一附属医院华南理工大学更多>>
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- 骨髓间充质干细胞接种微孔化脱细胞真皮基质复合自体刃厚皮移植修复裸鼠皮肤缺损的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的 :探讨以激光微孔化脱细胞真皮基质(LPADM)为载体,骨髓间充质干细胞(MSCs)接种复合自体刃厚皮移植重建皮肤功能的可行性。方法:在已制备的LPADM表皮面接种MSCs,构成含有特殊种子细胞的真皮基质材料(MSCs-LPADM)。取健康雄性裸鼠18只,随机分为三组(每组6只),麻醉后背部深筋膜层以上制作成2.0 cm×2.0 cm的全层皮肤缺损创面,分别移植三种不同真皮基质(MSCs-LPADM、LPADM、MSCs-PADM),同期复合移植自体刃厚皮片。A组(MSCs-LPADM+刃厚皮片组):予MSCs微孔化脱细胞真皮基质复合自体刃厚皮移植;B组(LPADM+刃厚皮片组):予LPADM复合自体刃厚皮移植;C组(MSCs-PADM+刃厚皮片组):予MSCs未打孔脱细胞真皮基质复合自体刃厚皮移植。观察皮片大体愈合情况,并于术后3、7、14 d切取移植区标本,行大体、组织学及电镜观察。结果:术后3 d组织学观察A、B两组在移植后真皮基质微孔径结构中均可见空腔样血管结构形成,C组真皮基质中未见血管结构形成。术后7 d,A、B两组移植皮片泛红成活,且两组真皮基质微孔径结构中血管结构更加明显,C组移植皮片出现苍白或变暗坏死。术后14 d,组织学观察示A、B两组真皮基质微孔径结构中可见丰富血管形成,复合皮血管化充分且成活良好,C组胶原结构中仅见少量细胞迁入,未见血管形成,皮片完全坏死。透射电镜显示A组新生的无髓神经样结构,在真皮基质的浅层,可见单个皮脂腺样细胞,深层见单个汗腺样细胞,B组、C组均未见神经样结构的增生及类汗腺细胞、类皮脂腺结构。结论:LPADM复合移植给提前种植的外源性MSCs提供较为理想的增殖分化微环境。对重建移植后皮肤功能提供了一种方法或思路。
- 万丽罗旭辛国华李安乐曾逃方夏卫东李校堃林才
- 关键词：骨髓间充质干细胞脱细胞真皮基质
- 激光微孔猪脱细胞真皮基质的制备及生物相容性评价被引量：8
- 2011年
- 近年来，国内外研究者寻求用异体（种）真皮或其他生物材料研发可植入式真皮替代物，其中取自猪皮的ADM因其完整的胶原三维结构且来源广泛尤受重视，但因不能早期充分血管化，影响临床效果及推广。提高植入性材料本身的快速血管化能力，是目前组织工程材料急需解决的关键技术难题之一。
- 林才罗旭王平万丽徐建军曾逃方毛葱辛国华
- 关键词：脱细胞真皮基质生物相容性猪皮组织工程材料真皮替代物
- 微孔结构对猪脱细胞真皮基质血管化影响的初步观察被引量：6
- 2012年
- 目的初步观察激光微孔结构对猪脱细胞真皮基质(ADM)血管化的影响。方法健康雄性裸鼠36只,随机分为实验组及对照组,实验组移植激光微孔猪脱细胞真皮基质(LPADM)加自体薄皮片,对照组移植无孔猪脱细胞真皮基质加自体薄皮片,手术分"二步法"完成。术后1d、3d、14d每组各取6只裸鼠处死,切取标本行组织学及电镜检查。结果实验组术后第1天,扫描电镜发现新生组织通过微孔结构长入ADM内部。组织学观察显示新生组织中有血管样管腔结构,其内有红细胞征象。术后第3天实验组LPADM中新生组织明显长入微孔结构内部。术后14d,LPADM已完成血管化,微孔周围的胶原网架中可见新生的血管形成,微孔结构中的新生组织逐渐转变为胶原纤维为主的真皮组织。对照组在整个实验过程中仅见少量成纤维细胞迁入,未见血管或血管内皮细胞等组织长入。结论微孔结构的存在,可以为创面基底的新生组织向ADM内部的生长提供一条通道,提高ADM的血管化能力。
- 曾逃方罗旭罗旭林才何勇曾元临
- 关键词：激光微孔结构脱细胞真皮基质
- 微孔结构对脱细胞真皮基质胶原网架功能重建的影响被引量：7
- 2012年
- 目的探讨微孔结构的存在是否可以为脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)胶原网架的修复提供良好的微环境。方法健康雄性裸鼠30只,随机分为实验组和对照组,手术采用两步移植法。麻醉后在其背部做一2 cm×2 cm大小的全层皮肤缺损创面,实验组移植微孔化ADM+自体薄皮片,对照组移植无孔ADM+自体薄皮片。术后第3、7、14天各组各取5只裸鼠处死,切取标本行组织学及电镜检查。结果 HE染色组织学切片显示,实验组孔径结构周围的胶原网架中迁入有较多的成纤维细胞;而对照组的胶原网架中迁入的细胞较少。术后3 d扫描电镜显示,实验组基底组织通过微孔结构向胶原中生长,从而完成ADM的血管化;对照组未见新生组织长入。术后第14天的透射电镜显示实验组的胶原网架中含有较多的成纤维细胞,且以植入的异种真皮基质为模板分泌胶原,参与真皮组织的修复和重建;而对照组以炎症细胞迁入为主。结论微孔结构的存在不仅为成纤维细胞向胶原内部的迁移提供了一条快速通道,而且为成纤维细胞真皮修复功能的发挥提供良好的微环境。
- 辛国华曾逃方罗旭林才何勇
- 关键词：微孔结构脱细胞真皮基质微环境
- 激光微孔化猪脱细胞真皮基质的设计、制备及同步移植实验被引量：6
- 2012年
- 目的构建一种新型真皮替代物——激光微孔化猪脱细胞真皮基质材料(LPADM)并验证其修复全层皮肤缺损的效果。方法取新鲜健康小白猪断层真皮,一部分经高钠-SDS法脱细胞获得脱细胞真皮基质(ADM),另一部分则先行激光打孔再经脱细胞获得LPADM;检测LPADM的物理性状。在SD大鼠(n=30)背部制作2.0 cm×2.0 cm的全层皮肤缺损创面(n=4),分别采用LPADM自体中厚皮片(L组)和无孔ADM自体中厚皮片(A组)复合移植及自体全厚皮片(F组)和中厚皮片原位移植(C组)修复。分别于术后第3、5、7、10、14天,每组随机选取6只大鼠,观察创面皮片成活情况,处死动物后采集创面组织行组织学检查。结果制备的LPADM呈瓷白色,柔软有光泽;显微镜下观察未见细胞残留。移植术后第3天,组织学检查发现L组创面组织有内皮细胞围成的空腔样结构;术后第3、5、7、10天,L组和C组创面移植皮片成活良好,L组血管样结构中已可见红细胞;A组皮片起泡甚至发黑坏死;F组皮片部分起小泡,但泡皮下基底红润。术后第14天,L组真皮微孔中可见大量血管形成,L组、C组和F组移植皮片全部或基本存活,创面愈合率分别为(99.10±0.66)%、(99.25±0.23)%、(97.07±1.32)%,差异无统计学意义(P>0.05);A组皮片全部坏死脱落,创面愈合率为(27.46±2.05)%,显著低于其他各组(P<0.01)。结论构建的新型激光微孔化猪脱细胞真皮基质,同步复合自体皮移植,移植成功率高,较快实现早期血管化,为一种较理想的真皮替代物。
- 曾逃方罗旭辛国华万丽徐建军夏卫东毛葱王平林才
- 关键词：真皮替代物脱细胞真皮基质激光微孔
- 活性猪脱细胞真皮基质复合自体刃厚皮片移植修复SD大鼠皮肤缺损被引量：5
- 2012年
- 目的构建具活性细胞成分的激光微孔化猪脱细胞真皮基质（LPADM），并通过I期复合白体刃厚皮片移植观察其在修复SD大鼠全层皮肤缺损中的效果。方法设LPADM组与无孔PADM组，将同种异体成纤维细胞（fibroblast，FB）种植于LPADM上培养，另设仅用FB培养液培养的FB为对照纰，采用双抗体夹心ABC—ELISA法测定各组FB细胞活性因子自细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-6（II-6）、p1转化生长因子（TGF—β1）、层粘连蛋白（I。N）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。制作SI）大鼠全层皮肤缺损伤口模型，将具活性的LPADM复合自体刃厚皮片I期移植，记录其生长情况，定期活检，并进行组织学观察。结果LPADM组、PADM组、对照组各组各时相点各指标吸光度值比较．差异均无统计学意义（F为0．050～1．763，P〉0．05）。移植的LPADM中可见生长良好的FB。移植术后3周，创面愈合良好，未见明显排斥反应。术后1个月，创面瘢痕轻，复合皮肤可提捏。结论用活性LPADM复合自休刃厚皮片I期移植修复SD大鼠全层皮肤缺损，可有效修复创面，并具有较高的生物安全性。
- 林才罗旭万丽夏卫东毛葱
- 关键词：脱细胞真皮基质复合皮
- 新型激光微孔化猪脱细胞真皮基质的制备及应用被引量：1
- 2012年
- 目的介绍一种新型微孔化猪脱细胞真皮基质并验证其安全性、可行性。方法取新鲜健康小白猪断层真皮,采用高渗盐-胰蛋白酶法脱细胞,经超声波充分震荡洗涤,获得猪脱细胞真皮基质,经特定激光微孔技术,在脱细胞真皮基质上贯穿打孔即获得新型激光微孔化猪脱细胞真皮基质。将24只SD大鼠均切除背部全层皮肤至深筋膜,造成大小2.0cm×2.0cm创面,随机分为实验组和对照组,每组各12只,同步I期行自体中厚皮片与真皮材料复合移植于大鼠全层皮肤缺失创面,实验组采用移植真皮材料为激光微孔化猪脱细胞真皮基质(LPADM),对照组采用移植真皮材料为普通的猪皮脱细胞真皮基质(ADM),组织学检查、电镜观察两组真皮材料的物理性状、结构完整性、细胞残留及移植后皮片活性、血管化和移植后动物安全性变化。结果制备的真皮基质材料LPADM和ADM均呈瓷白色,有光泽,柔软而有弹性;组织学检查未见上皮细胞、内皮细胞残留,结构完整性好;电镜检查胶原纤维排列整齐,保持较好的结构完整性。实验组术后7dLPADM组织学检查显示移植真皮血管化充分,术后14d复合移植皮片均存活;对照组术后7d移植皮片色暗淡,多有起泡,并逐渐失活坏死,ADM组织学检查未见新生血管形成,术后14d复合移植皮片干性坏死。两组实验动物均无异常死亡或感染,亦未见皮肤过敏反应,体重无减轻。结论以特定激光微孔化等技术制备的新型猪脱细胞真皮基质动物移植实验中血管化充分、复合皮片愈合良好,获得满意的实验效果。
- 罗旭万丽李安乐徐建军夏卫东李玉莉邓春林王平林才
- 关键词：脱细胞真皮基质激光微孔
- 微孔化猪脱细胞真皮基质与大鼠骨髓间充质细胞对裸鼠皮肤附件细胞再生的作用被引量：6
- 2013年
- 目的观察微孔化猪ADM复合含有骨髓间充质干细胞（BMSC）的大鼠骨髓间充质细胞群对裸鼠部分皮肤附件细胞再生的作用。方法将1只清洁级健康小白猪处死，切取制作面积约20cm×10Cll、0．3mm厚断层真皮片，通过激光打孔、高渗盐溶液脱细胞、交联等处理制作激光微孔化猪ADM（LPADM），无孔猪ADM仅行脱细胞、交联等处理，进行外观、组织学、扫描电镜观察。将1只SD大鼠处死，取股骨和胫骨，分离培养骨来源的骨髓间充质细胞群，取第3代贴擘细胞进行成骨、成脂肪细胞分化实验。之后将其接种于LPADM、无孔猪ADM上，构建骨髓间充质细胞一LPADM和骨髓间充质细胞一无孔猪ADM。取21只健康裸鼠随机区组分为骨髓间充质细胞一LPADM＋无孔猪ADM组（简称A组，6只）、LPADM＋刃厚皮片组（简称B组，6只）、骨髓间充质细胞一I。PADM＋刃厚皮片组（简称C组，6只）、骨髓间允质细胞一无孔猪ADM＋刃厚皮片组（简称D组，3只），麻醉后在其背部正中做一2cin×2cm的全层皮肤缺损创面，达深筋膜，同时切取相同大小刃厚皮片备用，并分别移植相应材料覆盖创面．．于移植术后5、7、14d观察裸鼠局部情况及不良反应，各组分别处死1只裸鼠切取全部移植物，HE染色观察其组织结构；移植术后7、14d透射电镜下观察相应复合物中新生皮肤附件情况。结果（1）LPADM、无孔猪ADM呈瓷白色，柔软、有弹性，组织学观察显示真皮基质末见细胞成分；扫描电镜示孔径中胶原纤维排列有序；LPADM还有微孔结构。（2）细胞传至第3代时，形态趋于一致，呈Fb样，生长较快。，（3）诱导分化实验表明，细胞可向成骨细胞、成脂肪细胞分化。（4）移植术后5d，A组无孔猪ADM局部干燥，I）组皮片局部干燥坏死，A、D组均未见感染及炎症反应；B、c组移植皮片成活。移植术后7、14d，A组表面的覆�
- 罗旭辛国华曾逃方林才曾元临李郁葱邱泽亮
- 关键词：皮肤真皮
