国家自然科学基金(30960366)
- 作品数：14 被引量：63H指数：4
- 相关作者：王海英喻田徐鹏陈伟刘兴奎更多>>
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- 乳化异氟醚后处理对缺血/再灌注大鼠离体心脏超微结构的影响被引量：3
- 2013年
- 目的观察乳化异氟醚(EI)后处理对缺血/再灌注成年大鼠离体心脏超微结构和线粒体评分的影响,并探索EI后处理心肌保护作用的可能机制。方法建立SD大鼠缺血再灌注损伤模型,将建模成功的心脏随机分成8组(n=8):正常组(N)、缺血/再灌注组(I/R)、缺血后处理组(IPO)、乳化异氟醚后处理组(EI)、脂肪乳后处理组(FAT)、MPG+IPO组、MPG+EI组、MPG+FAT组,用透射电子显微镜观察各组心肌组织的超微结构,并进行线粒体评分。结果 EI组、IPO、FAT、N组超微结构损害及评分低于I/R组(P<0.01)。EI组和IPO组心肌超微结构损害及线粒体评分无统计学差异(P=0.545),但均低于FAT组(P<0.01)。应用MPG后,除M+FAT组外,各组心肌超微结构损害及线粒体评分均高于相应的非阻断组(P<0.01)。结论 EI和IPO后处理均能减轻大鼠心肌的缺血再灌注损伤,且两者效果相当;活性氧清除剂能消除EI和IPO的心肌保护效果;ROS是介导EI后处理和缺血后处理心肌保护作用的重要因子。
- 陈伟杜文娟徐鹏王海英喻田
- 关键词：乳化异氟醚缺血后处理缺血再灌注损伤
- Nrf2-ARE信号通路在乳化异氟醚后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用被引量：4
- 2014年
- 目的 评价转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）-抗氧化反应元件（ARE）信号通路在乳化异氟醚后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用.方法 原代培养16 - 20周龄SD大鼠心肌细胞,以104/cm2的细胞密度平铺于层粘连蛋白预处理过的6孔板中孵育20 h.采用随机数字表法,将其分为3组（n=12）：对照组（C组）常规培养110 min;缺氧复氧组（A/R组）心肌细胞缺氧45 min,复氧60 min;乳化异氟醚后处理组（EI组）心肌细胞缺氧45 min时以1.68 mmol/L乳化异氟醚孵育5 min,随后复氧60 min.于复氧末电镜下观察心肌细胞超微结构,并进行线粒体功能评分.采用Real-TimePCR和Western blot法检测心肌细胞Nrf2、血红素加氧酶1（HO-1）、超氧化物歧化酶1（SOD1）、醌氧化还原酶1（NQO1） mRNA及其蛋白表达水平.采用荧光共聚焦显微镜观察Nrf2的核转位情况,记录心肌细胞核内Nrf2活性.结果 与C组比较,A/R组和EI组心肌细胞线粒体损伤评分升高,心肌细胞Nrf2、HO-1、SOD1和NQO1 mRNA及其蛋白表达下调,心肌细胞核内Nrf2活性增强（P＜0.05）;与A/R组比较,EI组心肌细胞线粒体损伤程度评分降低,心肌细胞Nrf2、HO-1、SOD1和NQO1 mRNA及其蛋白表达上调,心肌细胞核内Nrf2活性增强（P＜0.05）.结论 乳化异氟醚后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的机制可能与诱导Nrf2核转位从而激活Nrf2-ARE信号通路有关.
- 李小娟王海英杜文娟喻田
- 关键词：NF-E2相关因子2异氟醚脂肪乳剂静脉注射用
- Nrf2-ARE通路在心肌缺血后处理和吡那地尔后处理中的心肌保护作用机制被引量：3
- 2015年
- 目的探讨核因子-E2相关因子2（Nrf2）-ARE通路在心肌缺血后处理和吡那地尔后处理中的心肌保护作用机制。方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，随机分为6组（n=8）：正常（N）组、缺血再灌注（Con）组、缺血后处理（IPO）组、吡那地尔后处理（50μmol／L，P50）组、N-（2-巯基丙酰）-甘氨酸（MPG，2mmo]／L）＋IPO（M＋IPO）组、MPG＋P50（M＋PS0）组。K—H液灌注平衡20min后，N组续灌100min；Con组停跳缺血40min，再灌注60min；IPO组于再灌注即刻行10s再灌注和10s缺血，循环6次，再续灌58min；P50组于再灌注即刻给予P50处理2min，续灌58min；M＋IPO组和M＋P50组，分别于再灌注即刻予含MPG的K—H液灌注3min，再IPO或P50处理2min，再续灌55min。记录各组平衡末及再灌注末的左心室发展压（LVDP）、心率（HR）、左心室舒张末压（LVEDP）和左心室内压最大上升速率（＋dp／dtmax）；电镜观察心肌细胞超微结构和线粒体Flameng评分；分别采用RT—PCR和Westemblot法检测灌注末各组心肌组织中醌氧化还原酶1（NQ01）、血红素加氧酶1（HO-1）、超氧化物歧化酶1（SOD-1）、Nrf2基因及蛋白表达。结果平衡末各组间LVDP、HR、LVEDP、＋dp／dtmax值差异均无统计学意义（P〉0．05）。再灌末HR、LVDP及＋dp／dtmax：与N组比较，其余各组均有下降；与Con组比较，IPO和P50组均显著升高（P〈0．05）；与IPO组比较，M＋IPO组较之明显下降（P〈0．05）；与P50组比较，M＋P50组显著降低（P〈0．05）。再灌末LVEDP：Con组较其余各组升高明显（P〈0．05）；M＋IPO组较IPO组显著升高（P〈0．05）；M＋P50组较P50组显著升高（P〈0．05）。电镜观察结果示N组心肌细胞超微结构形态基本正常，Con组超微结构损伤最严重；IPO组和PSO组优于Con组，M＋IPO组较IPO组损伤严重，M＋P50组较P50组损伤严重。线粒体Flameng评分，与N组相比，�
- 陈伟王海英徐鹏刘兴奎喻田
- 关键词：心肌缺血吡那地尔心肌保护
- ROS在乳化异氟醚后处理激活大鼠心肌细胞Nrf2／ARE信号通路中的作用被引量：1
- 2018年
- 目的评价活性氧（Ros）在乳化异氟醚后处理激活大鼠心肌细胞转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）／抗氧化反应元件（ARE）信号通路中的作用。方法原代培养大鼠心肌细胞，采用随机数字表法分为4组（n=20）：对照组（C组）、缺氧／复氧组（H／R组）、乳化异氟醚后处理组（EIP组）、乳化异氟醚后处理＋ROS清除剂N．2-巯基丙酰．甘氨酸（MPG）组（EIP＋MPG组）。采用混合气体培养法制备心肌细胞缺氧／复氧损伤模型。EIP组缺氧45min时加入乳化异氟醚（终浓度1．68mmol／L）。孵育5min。随后复氧60min；EIP＋MPG组于乳化异氟醚孵育5min时加入MPG（终浓度2mmol／L），孵育10min．其余步骤同EIP组。于复氧末观察心肌细胞超微结构，行线粒体损伤评分；测定细胞内游离Ca^2＋水平及Nrf2活性；采用RT．PCR法及Westernblot法分别检测Nrf2及血红素加氧酶-1（HO-1）、超氧化物歧化酶1（SODl）、醌氧化还原酶（NQ01）的mRNA及蛋白表达水平。结果与C组比较，其余3组线粒体损伤评分和细胞内游离Ca^2＋水平升高，Nrf2活性增强，Nrf2、HO-1、SODl及NQ01及其mRNA表达下调（P〈0．05）；与H／R组比较，EIP组与EIP＋MPG组线粒体损伤评分和细胞内游离Ca^2＋水平降低，Nrf2活性增强，Nff2、HO-1、SODl及NQ01及其mRNA表达上调（P〈0．05），心肌细胞病理学损伤减轻；与EIP组比较，EIP＋MPG组线粒体损伤评分和细胞内游离Ca^2＋水平升高，Nrf2活性减弱，Nrf2、HO-1、SODl及NQ01及其mRNA表达下调（P〈0．05），心肌细胞病理学损伤加重。结论乳化异氟醚后处理激活大鼠心肌细胞Nrf2／ARE信号通路的机制可能与ROS有关。
- 陈熙媛徐鹏陈伟王海英李小娟喻田
- 关键词：异氟醚脂肪乳剂静脉注射用NF-E2相关因子2反应元件
- 吡那地尔后处理对成年大鼠缺氧/复氧心肌细胞超微结构的影响被引量：3
- 2013年
- 目的建立成年大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,观察吡那地尔(Pinacidil,P)后处理对心肌细胞超微结构的影响。方法体外培养成年大鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,将细胞随机分为6组,正常组(N)、缺氧/复氧组(H/R)、缺氧后处理组(HPO)和吡那地尔不同浓度组(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L,P25、P50、P100组),采用透射显微镜观察各组心肌细胞缺氧/复氧损伤后心肌细胞超微结构的变化。结果透射显微镜显示N组超微结构正常,H/R组超微结构损伤严重,HPO、P25、P50、P100组损伤较轻,P50组较P25、P100组损伤更轻。结论缺氧/复氧能使成年大鼠心肌细胞造成损伤,吡那地尔后处理对此损伤具有一定保护作用。
- 徐鹏喻守佳陈伟王海英喻田
- 关键词：复氧损伤心肌细胞超微结构
- 缺血后处理激活大鼠心肌缺血再灌注时Nrf2-ARE信号通路的机制：与ROS的关系被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨缺血后处理激活大鼠心肌缺血再灌注时NF-E2相关因子2（Nrf2）-抗氧化反应元件（ARE）信号通路的机制与活性氧（ROS）的关系.方法 健康雄性SD大鼠,体重250～300g,16～20周龄,采用Langendorff灌注装置建立大鼠离体心脏灌注模型.取模型制备成功的心脏32个,采用随机数字表法分为4组（n=8）：对照组（C组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血后处理组（IPO组）和ROS清除剂N-（2-巯基丙酰）-甘氨酸＋缺血后处理组（M＋IPO组）.平衡灌注20 min后,C组继续灌注100 min;I/R组灌注4℃St.Thomas停跳液停跳,并在32℃下缺血40 min,再灌注60 min;IPO组于再灌注即刻行缺血后处理,再灌注10 s,缺血10 s,共6个循环,然后恢复灌注58 min;M＋IPO组于再灌注即刻灌注含N-（2-巯基丙酰）-甘氨酸2 mmol/L的K-H液3 min,然后行缺血后处理2min,再灌注55 min.分别于平衡灌注末及再灌注末记录HR、左心室发展压（LVDP）、左心室舒张末压（LVEDP）和左心室压力最大上升速度（＋dp/dtmax）.分别于再灌注5 min和再灌注末时,取左心室心肌组织,采用ELISA法测定ROS含量.于再灌注末,取左心室心肌组织,观察心肌细胞超微结构,并进行线粒体损伤评分,分别采用Western blot法和RT-PCR法检测心肌组织Nrf2、血红素加氧酶-1（HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO1）、超氧化物歧化酶1（SOD1）及其mRNA的表达水平.结果 与C组比较,再灌注末I/R组和M＋IPO组HR、＋dp/dtmax和LVDP降低,LVEDP升高,IPO组HR、LVDP降低,LVEDP升高（P＜0.05）,HR和＋dp/dtmax差异无统计学意义（P＞0.05）,I/R组、IPO组和M＋IPO组线粒体损伤评分升高,再灌注末I/R组、IPO组和M＋IPO组ROS含量升高,心肌组织Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1及其mRNA表达下调（P＜0.05）.与I/R组比较,IPO组和M＋IPO组再灌注末HR、＋dp/dtmax和LVDP升高,LVEDP和心肌组织ROS含量降低,心肌组织Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1及其mRNA表达上调,IPO组线粒
- 陈伟王海英徐鹏刘兴奎喻田
- 关键词：缺血后处理心肌再灌注损伤NF-E2相关因子2反应元件
- Nrf2-ARE通路在缺血后处理和吡那地尔后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用被引量：17
- 2012年
- 目的探讨核转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）．抗氧化反应元件（ARE）通路在缺血后处理和吡那地尔后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用。方法健康雄性sD大鼠，体重200～250g，4～5月龄，采用Langendorff灌注装置建立离体心脏灌注模型，取模型制备成功的心脏56个，采用随机数字表法，将其随机分为7组（n=8）：正常对照组（C组）、缺血再灌注组（I／R组）、缺血后处理组（tP组）和不同浓度的吡那地尔后处理组（PP1组、PR组、PP3组、PP4组）。平衡灌注20min后，C组继续灌注100min；I／R组停止灌注40min，复灌60min；IP组停止灌注40min，于再灌注开始给予6次间隔灌注10s停止灌注10S，复灌58min；PP1组、PP2组、PB组、PP4组停止灌注40min，于再灌注开始时灌注含5、10、30、50μmol／L吡那地尔的K-H液5min，继续灌注55min。于平衡灌注末及复灌结束时测定左室发展压（LVDP）和左室舒张期末压（LVEDP）；于复灌结束时取左心室心肌，分别采用RT-PCR法和Westernblot法检测心肌Nrf2、醌氧化还原酶1（NQ01）、超氧化物歧化酶1（SOD1）及血红素加氧酶1（HO-1）的mRNA及蛋白表达水平。结果与C组比较，其余各组Nrf2、NQ01、SOD1及HO-1的mRNA和蛋白表达均上调，I／R组、PP1组和PP2组复灌结束时LVDP降低，LVEDP升高（P〈0．05）。与I／R组比较，IP组、PB组和PP4组Nrf2、NQ01、SOD1及HO-1的mRNA和蛋白表达均上调，IP组、PP1组、PP2组、PB组和PP4组复灌结束时升高，降低（P〈0．05）。结论缺血后处理和吡那地尔后处理可通过激活Nrf2-ARE通路减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。
- 王海英杨义辉喻田刘兴奎
- 关键词：NF-E2相关因子2反应元件吡那地尔后处理
- 乳化异氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注时Nrf2-ARE信号通路的影响：离体实验被引量：5
- 2015年
- 目的：评价乳化异氟醚后处理对大鼠缺血再灌注时核转录因子 NF-E2相关因子2（ Nrf2）-抗氧化反应元件（ ARE）信号通路的影响。方法健康雄性SD大鼠，体重250～300 g，4～5月龄，采用Langendorff灌注装置建立大鼠离体心脏灌注模型。取模型制备成功的心脏32个，采用随机数字表法分为4组（ n＝8）：对照组（ C组）、缺血再灌注组（ I∕R组）、乳化异氟醚后处理组（ EIP组）和脂肪乳组（ F组）。平衡灌注20 min后，C组继续灌注100 min；I∕R组32℃下缺血40 min，恢复灌注60 min；EIP组32℃下缺血40 min，于再灌注前即刻灌注含乳化异氟醚1．68 mmol∕L的K-H液2 min，继续灌注37℃含氧的K-H液58 min；F组32℃下缺血40 min，于再灌注前即刻灌注含脂肪乳712 mg∕L 的K-H液2 min，继续灌注37℃含氧K-H液58 min。分别于平衡灌注末及再灌注末记录HR、左室发展压（LVDP）、左室舒张末压（LVEDP）和左心室压力最大上升速度（＋dp∕dtmax）。于再灌注末，取左心室心肌组织，观察心肌细胞超微结构，分别采用RT-PCR法和Western blot法检测心肌组织Nrf2、血红素加氧酶-l （HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO1）、超氧化物歧化酶1（SOD1）及其mRNA的表达水平。结果与C组比较，再灌注末I∕R组和F组HR、＋dp∕dtmax和LVDP 降低，LVEDP 升高，EIP组LVDP降低，LVEDP升高（ P＜0．05），HR和＋dp∕dtmax差异无统计学意义（ P＞0．05）， I∕R组、EIP组和F组心肌组织Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1及其mRNA的表达下调（ P＜0．05）；与I∕R组比较，EIP组和F组再灌注末HR、＋dp∕dtmax和LVDP 升高，LVEDP 降低，EIP 组心肌组织Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1及其mRNA的表达上调， F组心肌组织Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1的mRNA表达上调，Nrf2和HO-1的表达上调（ P＜0．05），NQO1和SOD1的表达差异无统计学意义（ P＞0．05）；与EIP组比较，F组再灌注末HR、＋dp∕dtmax和LVDP降
- 杜文娟王海英李小娟陈伟徐鹏喻田
- 关键词：异氟醚NF-E2相关因子2反应元件
- 乳化异氟醚后处理对成年大鼠缺氧/复氧心肌细胞超微结构的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察乳化异氟醚(emulsified isofurane,EI)对原代培养成年大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤后超微结构的影响。方法体外培养成年大鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,然后将心肌细胞随机分为7组,正常组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、缺氧后处理组(HPO组)和不同浓度EI后处理组(0.84mmol/L、1.68mmol/L和2.52mmol/L,EI1～EI3组)及脂肪乳组(F组),倒置显微镜观察心肌细胞生长的特性及形态的变化;采用透射电子显微镜观察缺氧/复氧损伤后心肌细胞超微结构的变化。结果心肌细胞电镜显示正常组心肌细胞超微结构正常,缺氧/复氧组超微结构损伤严重,HPO组、EI1-EI3均可减轻H/R心肌细胞的损伤,但EI2组与EI1组和EI3组比较减轻更明显;F组无明显效果。结论缺氧/复氧对原代培养的成年大鼠心肌细胞可以造成明显损伤;EI后处理对原代培养成年大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤具有一定的保护作用。
- 李小娟王海英喻田
- 关键词：心肌细胞复氧损伤超微结构
- Nrf 2-ARE通路对心肌缺血再灌注损伤的保护作用被引量：9
- 2012年
- 心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）是临床医生面临的一大难题,尤其是随着溶栓法、介入手术、冠脉搭桥、心脏移植等治疗手段的开展,MIRI问题拭待解决。据统计因为MIRI导致患者死亡或心力衰竭的发生率分别为10%、25%。缺血后再灌注期过量产生的活性氧（reactive oxygen species,ROS）导致氧化应激，
- 李小娟王海英
- 关键词：心肌缺血再灌注损伤氧化应激活性氧
