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表没食子儿茶素没食子酸酯和牛磺酸联用对犬白内障模型晶状体上皮细胞凋亡的影响: 2012年; 为提供兽医临床用药治疗白内障的理论依据,选取健康成年犬15只(30眼),随机分为模型组、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)组、牛磺酸、EGCG联合牛磺酸组和对照组,每组6个重复。除对照组外其他组用fenton液造模。裂隙灯观察晶状体的混浊情况,并根据国际通用的晶状体混浊分类体系Ⅲ(LOCSⅢ)分类,当混浊达到II期时用药治疗。临床用药40d后,取出晶状体透射电镜观察形态结构的变化;免疫组织化学法测定晶状体上皮细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达水平;qRT-PCR测定其mRNA的表达水平。结果表明,与模型组相比联合组中Bax/Bcl-2的比值和Caspase-3的表达较模型组显著降低(P<0.05),证明联合用药可以通过上调凋亡基因Bcl-2的表达抑制细胞凋亡。; 王霞张康夏楠李婧赵海焦吴国娟张中文; 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯牛磺酸晶状体上皮细胞凋亡

磺胺母核单克隆抗体的制备及其免疫学特性研究: 【目的】制备磺胺母核（SH）单克隆抗体（Monoclonal antibody,mAb）,并对其免疫学特性进行检测。【方法】采用混合酸酐法将本实验室合成的磺胺类药物母核结构药物（SH）偶联于牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋...; 杜玉玲陆彦祝文琪王晶高磊吴国娟; 关键词：磺胺类药物单克隆抗体免疫学特性多残留检测; 文献传递

β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备: 2013年; 比较β-内酰胺酶和青霉素酶两种蛋白的纯度,选择β-内酰胺酶为免疫原。通过免疫家兔制备抗β-内酰胺酶多克隆抗体,4次免疫后,抗体的效价均在1×106以上。同时免疫Balb/C小鼠,取免疫后的脾细胞与SP2/0细胞进行化学融合,使用青霉素酶筛选阳性杂交瘤细胞株;4次亚克隆后将阳性细胞株腹腔注射BALB/C小鼠,获得阳性腹水;用PEG6000法纯化腹水,制备单克隆抗体;对该单克隆抗体进行特性分析,为制备检测β-内酰胺酶的双抗体夹心胶体金免疫层析试纸条奠定基础。; 王晶王杏祝文琪杜玉玲王惠川吴国娟; 关键词：Β-内酰胺酶青霉素酶多克隆抗体单克隆抗体

磺胺母核人工半抗原的合成与鉴定: 2013年; 合成磺胺母核人工半抗原,并对其产物进行鉴定。采用4-氨基苯甲酸甲酯(PBPA)和对乙酰氨基苯磺酰氯(ASC)为原料,经过亲和取代,酯的水解反应合成磺胺药物共有的母核结构苯甲酸对氨基苯磺酰胺(SH),应用质谱法(ESI-MS)与核磁共振氢谱法(1 H-NMR)鉴定SH。质谱结果显示[M-]=291.037 66,与理论值[M]=292相符,表明SH合成成功;核磁共振氢谱(1 H-NMR)的数据与SH化合物的结构相符。磺胺母核人工半抗原合成成功,为研制磺胺药多残留检测试剂盒和胶体金免疫层析试纸条奠定基础。; 杜玉玲陆彦祝文琪高磊岳城吴国娟; 关键词：半抗原

去乙酰化蛋白酶1在马兜铃酸肾纤维化模型中对TGF-β1/Smad7信号通路的作用被引量：2: 2012年; 检测马兜铃酸肾纤维化(AAN)模型肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad7、去乙酰化蛋白酶1(HDAC1)的mRNA和蛋白表达变化,探讨HADC1和Smad7的表达在AAN发展中的作用及两者间的联系。RT-PCR检测TGF-β1、Smad7和HDAC1的mRNA表达,ELASA检测TGF-β1的蛋白表达,免疫组化定位和检测HADC1和Smad7蛋白,HE染色观察肾病理学改变。结果显示:AAN模型肾组织中TGF-β1和HDAC1mRNA表达呈时间依赖性升高,TGF-β1mRNA表达较对照组有明显差异(P<0.05),28d开始AAN组中HDAC1mRNA增加,差异极显著(P<0.01);Smad7mRNA和蛋白表达均呈下降趋势,HDAC1蛋白免疫组化染色强度呈上调趋势,与对照组比较HDAC1阳性着色主要分布于上皮细胞和间质细胞的细胞核;肾脏病理表现为肾小管浊肿、变性和脱落等急性小管间质损伤,并随用药时间的延长呈进行性加重。本研究表明肾组织中Smad7弱表达可促进TGF-β1信号转导,HDACl mRNA和蛋白在肾组织中的高表达并参与TGF-β1/Smad7信号通路在肾纤维化发展中起重要作用,可能是潜在的新作用靶点。; 杨洋张中文姚华高磊李培锋吴国娟; 关键词：TGF-Β1 SMAD7 HDAC1

犬氧化损伤诱发白内障模型及其评价标准的研究被引量：3: 2012年; 犬白内障是常见的眼科疾病,发病率高,严重影响犬的视力。有研究表明氧化损伤是重要的发病机制之一,目前对其疾病模型与发病机理研究较少。本研究旨在建立犬老年性白内障动物模型,为其后续机理研究奠定基础。本试验选取健康成年犬10只,随机选取6只为模型组,4只为对照组,用Fenton液造模。裂隙灯观察晶状体的混浊情况,光镜和透射电镜观察形态结构的变化,测定晶状体生化指标的改变,判定造模结果。与对照组相比,模型组晶状体混浊度变化明显,光镜和电镜下能观察到凋亡现象,T-SOD、GSH-Px和MDA值差异显著(P<0.05)。本试验证明用Fenton液囊袋内注射即可成功建立犬老年性白内障疾病模型。; 王霞张禹夏楠李婧赵海焦吴国娟张中文

Smad7和组蛋白去乙酰化酶1在小鼠马兜铃酸肾病中的表达被引量：2: 2012年; 目的探讨Smad7、组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)在小鼠马兜铃酸肾病(AAN)中的表达及两者在马兜铃酸肾病发生、发展中的作用。方法将32只体重(20±2)g的SPF(无菌)雄性昆明小鼠随机分为4组,其中3组为实验组,灌胃给予不同剂量的马兜铃酸(AA)Ⅰ,分别为4 mg/(kg.d)、8 mg/(kg.d)、16mg/(kg.d)。另设对照组,PBS灌胃。应用免疫组织化学、免疫印迹法及RT-PCR技术,检测AAN小鼠和正常对照组中Smad7和HDAC1的表达情况。结果 HDAC1阳性着色主要分布于细胞核上,且在AAN中的表达强度明显高于正常对照组。免疫印迹法检测和RT-PCR提示,Smad7在AAN中的表达低于对照组,而HDAC1的表达显著高于对照组。结论在AAN中Smad7低表达以及HDAC1高表达,提示Smad7和HDAC1可能在AAN的发生、发展中起重要作用。; 彭晓兰董晓凯廖芳芳高磊张中文吴国娟; 关键词：马兜铃酸肾病 SMAD7 组蛋白去乙酰化酶1 免疫组织化学免疫印迹法小鼠

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北京市教委资助项目(KM201010020008)