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适于转基因苹果种子和果肉总DNA提取的方法被引量：5: 2010年; 为探求适宜的转基因苹果种子和果肉DNA提取方法,以转豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI)‘嘎拉’(‘Gala’)苹果果实为试材,采用改良CTAB法、SDS法与高盐低pHSDS法对苹果种子和果肉进行基因组总DNA提取。结果表明,在提取种子基因组DNA时,供试3种提取方法均可获得纯度较高的DNA,但不同方法所获得的DNA产量差异较大,以改良CTAB法获得的DNA产量最高,为0.221 mg/(gFW),SDS法和高盐低pHSDS法所获得DNA产量偏低,分别为0.053mg/(gFW)和0.034 mg/(gFW);在提取果肉基因组DNA时,SDS法在纯度和产量上效果最好,DNA的A260/A280值为1.808,产量为0.012 mg/(gFW),而其他2种方法提取质量较差。考虑到质量和得率的综合因素,认为改良CTAB法适宜提取转基因苹果种子DNA,SDS法适宜提取转基因苹果果肉DNA。; 高媛杜国强师校欣; 关键词：转基因苹果种子果肉 DNA提取

植物生长调节剂对苹果组培苗延缓生长保存的效应被引量：5: 2009年; 以富士、乔纳金、金矮生、嘎拉组培苗为试材,在继代培养基中加入不同浓度的比久、矮壮素、多效唑及脱落酸,研究了植物生长延缓剂和生长抑制剂对苹果组培苗种质延缓生长保存的效应。结果表明:比久、矮壮素均有明显抑制苹果组培苗生长的作用,且茎尖存活率高,试管苗生长状况较好,转入常规继代培养基当代即可恢复生长,可用于苹果种质资源的离体保存,比久适宜的浓度为80mg/L,矮壮素为75mg/L左右;多效唑处理虽能明显抑制苹果试管苗生长,但易使有些品种试管苗玻璃化,可选择性应用;脱落酸作用过于剧烈,绝大部分处理苗死亡,不宜在苹果种质保存中使用。; 王晓蔓王晨师校欣杜国强; 关键词：苹果组培苗种质保存生长调节剂

温度和渗透压对苹果试管苗延缓生长法种质保存的效应被引量：2: 2008年; 以富士、乔纳金试管苗为试材,通过在继代培养基中加入不同浓度的蔗糖、琼脂、甘露醇提高渗透压或置于不同温度下,筛选合适的延缓生长的条件。试验结果表明:低温条件抑制试管苗生长效果明显,适宜的低温处理为接种后在25℃培养室条件下缓苗5～10d移至8℃培养,可延长保存时间至1年半以上,茎尖成活率达100%;提高培养基琼脂、蔗糖浓度或添加甘露醇都能抑制试管苗生长,且随浓度增加,抑制作用愈发明显,但琼脂、甘露醇处理中有部分茎尖死亡;综合比较,8℃低温、60g/L蔗糖处理延缓试管苗生长效果较好。同一处理下品种间有差异,富士苹果延缓生长的效果好于乔纳金。; 王晨师校欣杜国强张想英; 关键词：苹果试管苗培养温度渗透压

培养基渗透压对延缓生长的苹果组培苗生理代谢指标影响被引量：6: 2008年; 以富士、乔纳金苹果试管苗为试材,研究了不同渗透压处理下苹果组培苗延缓生长以及恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的变化,以期为筛选苹果组培苗延缓生长种质保存的适宜方法提供依据。结果表明:在延缓生长保存期间,随培养基中蔗糖、琼脂浓度提高,添加甘露醇,试管苗SOD、POD活性逐渐升高,而MDA含量呈下降趋势,依品种不同分别在蔗糖浓度达到50～60g/L、琼脂浓度达到10～14g/L、甘露醇浓度达到30～40g/L时达显著差异水平。恢复生长当代试管苗的SOD活性、POD活性以及MDA含量处理间表现相同。研究认为添加50～60g/L的蔗糖适宜苹果试管苗延缓生长法种质保存。; 王晨师校欣杜国强黄瑞虹; 关键词：渗透压苹果组培苗 POD活性 SOD活性 MDA含量

苹果茎尖组培苗继代保存多年后繁殖特性研究被引量：4: 2011年; 为解决种质离体保存的适宜年限等实用性问题,需了解多年继代保存的组培苗繁殖能力有无变化。本试验对继代保存不同年限的‘金冠’、‘乔纳金’、‘嘎拉’和‘富士’茎尖组培苗进行继代增殖能力、不定根诱导和离体叶片不定芽再生能力的研究。结果表明:外植体接种初期4年以内,即继代次数为24或40代时,‘富士’、‘金冠’、‘乔纳金’的新梢增殖能力较低,‘嘎拉’生根率较低,‘金冠’、‘富士’、‘嘎拉’离体叶片再生率较低,随着培养时间延长,继代次数增加,以上品种的继代增殖效率、生根能力及离体叶片再生能力均稳定在较高水平。长期继代保存的苹果品种茎尖组培苗(‘富士’已保存25年,‘金冠’、‘乔纳金’19年‘,嘎拉’10年)仍保持其器官再生能力。; 刘颖师校欣杜国强常腾飞; 关键词：苹果增殖不定芽再生

葡萄叶盘法基因转化中抗生素种类和浓度的筛选被引量：4: 2009年; 以优良无核葡萄品种莫利莎葡萄试管苗为试材,研究了卡那霉素(Kan)、潮霉素(Hyg)对葡萄继代苗生长和离体叶片再生的影响,以确定叶盘法基因转化的选择压和转化体的筛选浓度;同时研究了不同浓度的头孢霉素(Cef)和羧苄青霉素(Carb)对葡萄离体叶片再生的影响,以确定侵菌共培养后合适的抑菌抗生素种类和浓度。试验结果表明葡萄继代苗对Hyg的敏感性强于Kan,葡萄遗传转化更适合使用潮霉素磷酸转移酶基因作为选择标记。Hyg3.0mg/L即达到继代苗致死浓度,可作为转化后抗性苗的筛选浓度,Hyg0.8mg/L完全抑制叶片不定芽的分化,可作为叶盘法转化时抗性芽的选择压。葡萄叶盘法基因转化中抑制农杆菌生长的抗生素可选用Cef300mg/L或Carb400mg/L,但对不定芽的分化有抑制作用。; 王彦立贺柱师校欣杜国强; 关键词：葡萄基因转化农杆菌抗生素

“洛阳红”牡丹组织培养快速繁殖技术研究被引量：7: 2008年; 以"洛阳红"牡丹组培苗为试材,探讨了不同基本培养基、激素配比、培养条件、抗褐化物质对"洛阳红"牡丹继代苗增殖生长、生根及褐化的影响。结果表明:DKW基本培养基适宜"洛阳红"牡丹继代增殖;培养基中附加2.0-3.0mg/LBA与0.5mg/LIAA或0.05mg/LNAA配比有利于继代苗分化、生长,而附加玉米素ZT效果不佳;20-25℃对"洛阳红"继代苗增殖影响不大,30℃下试管苗很快老化、枯死,不宜采用;1/2MS附加0.2mg/LNAA或2.0mg/LIAA与2.0mg/LIBA配比可促进"洛阳红"牡丹试管苗不定根诱导;继代和生根培养基中附加0.5g/LPVP可有效减轻‘洛阳红’牡丹组培苗褐变,促进继代苗分化、生长,但对生根没有明显影响。; 王燕霞师校欣杜国强王晨郝哓祎王俊玲; 关键词：继代增殖褐变

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河北省自然科学基金(C2008000287)