福建省自然科学基金(2009J01066)
- 作品数：5 被引量：35H指数：4
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- 建兰AP1基因的克隆、表达及其与MADS-box转录因子相互作用的分析被引量：19
- 2013年
- 为研究APl/SQUA类MADS-box基因在建兰花发育中作用,以‘四季大青’建兰花芽为材料,用RT-PCR和RACE技术获得AP1基因,命名为CeAP1。序列分析表明,CeAP1基因cDNA全长866 bp,其开放阅读框编码一个含241个氨基酸的蛋白质。通过蛋白序列比对发现CeAP1与兰科植物的AP1蛋白质同源性较高。荧光定量PCR分析表明,CeAP1基因在建兰花发育初期高水平表达,同时在营养器官中也表达。酵母双杂交试验分析显示,CeAP1能自身形成同源二聚体,同时也能与除CeAG1外的其他MADS-box发生相互作用。
- 吴菁华吴少华杨超张志忠
- 关键词：建兰花发育相互作用
- 中国水仙3个特异种质的分子细胞遗传学分析被引量：6
- 2011年
- 应用荧光原位杂交技术进行rDNA在黄花水仙和两色花水仙染色体上的定位研究,并分析了两色花水仙的基因组成。结果表明:不同材料的NOR位点表现出多态性,即黄花水仙上具3个45SrDNA位点,两色花水仙具有5个位点;5SrDNA在位点和数量上表现出一致性。基因组荧光原位杂交结果表明两色花水仙的染色体有10条来自于黄花水仙,22条来自于白花水仙。根据rDNA在这些种质资源上的分布,结合GISH技术的分析,证实两色花水仙是黄花水仙和白花水仙的天然杂交种。
- 吴菁华张志忠吕柳新
- 关键词：中国水仙基因组原位杂交荧光原位杂交
- 中国水仙STK类抗病基因同源序列的克隆与分析被引量：5
- 2011年
- 根据丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶类(serine-threonine kinase,STK)抗病基因结构中的保守结构域设计简并引物,以中国水仙的基因组DNA为模板,扩增获得4条STK类抗病基因同源序列。同源性分析表明,其均具有STK保守结构域,与已经克隆的Xa21、Pto、Lr10、Lectin等基因在氨基酸水平上的同源性为38.3%～68%。系统进化树分析表明,它们可能是抗病基因的同源序列,这为进一步克隆中国水仙中STK类抗病基因提供依据。
- 吴菁华吴少华杨超
- 关键词：中国水仙丝氨酸抗病基因同源序列
- 中国水仙NtPI基因的克隆与表达分析被引量：4
- 2012年
- 采用RACE技术从中国水仙‘金盏银台’(Narcissus tazetta var.chinensis)花芽中获得1个与花器官发育有关的MADS-box基因,命名为NtPI(GenBank登录号:JQ326272)。该基因全长804 bp,含有1个618 bp的开放阅读框,编码205个氨基酸,具有典型的MADS结构域和K结构域,与仙客来水仙(Narcissus cyclamineus)同源性最高,达98%。系统进化树显示,NtPI属于B类MADS-box基因家族的PI/GLO类基因。半定量RT-PCR分析表明,该基因在‘金盏银台’和‘玉玲珑’2种水仙花朵的各个部位均有表达,但表达的水平有所不同。在‘金盏银台’中,雄蕊和雌蕊的表达量大于花瓣和副冠,而在‘玉玲珑’花瓣和副冠中,表达丰度远远大于雄蕊和雌蕊。
- 吴菁华杨超吴少华
- 关键词：中国水仙花器官发育
- 建兰Actin基因cDNA全长的克隆及其表达分析被引量：2
- 2012年
- 根据单子叶植物的肌动蛋白基因(Actin)的保守区序列设计引物,采用RT-PCR和RACE技术从建兰(Cymbidiumensifolium)中分离出Actin基因cDNA全长。序列分析结果表明,建兰Actin基因长度为1 434 bp,编码区长度为1 134 bp,编码377个氨基酸,将其命名为CeActin,GenBank登录号为JN613147。CeActin推导的氨基酸序列与其他植物的同源性都较高,具有高度的保守性。采用半定量RT-PCR技术分析CeActin在建兰各组织及花不同发育时期的表达情况,结果表明,表达量没有明显差异,表明CeActin基因可作为内参基因。
- 吴菁华吴少华杨超
- 关键词：建兰肌动蛋白基因克隆
