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国家自然科学基金(30471555)

作品数:10 被引量:13H指数:4
相关作者:端青朱虹宋立华何君黄如统更多>>
相关机构:军事医学科学院解放军第302医院解放军第三○二医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生
  • 2篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 8篇呼肠病毒
  • 8篇病毒
  • 3篇细胞
  • 3篇基因
  • 3篇基因组
  • 2篇凋亡
  • 2篇生物学
  • 2篇生物学特性
  • 2篇细胞凋亡
  • 2篇基因组片段
  • 1篇蛋白
  • 1篇形态学
  • 1篇血凝
  • 1篇血凝试验
  • 1篇严重急性
  • 1篇严重急性呼吸
  • 1篇严重急性呼吸...
  • 1篇诱导细胞
  • 1篇诱导细胞凋亡
  • 1篇原核表达

机构

  • 9篇军事医学科学...
  • 2篇解放军第30...
  • 1篇首都儿科研究...
  • 1篇解放军第三○...

作者

  • 9篇端青
  • 7篇宋立华
  • 7篇朱虹
  • 6篇何君
  • 5篇黄如统
  • 4篇苏裕心
  • 3篇貌盼勇
  • 2篇段鸿元
  • 1篇户义
  • 1篇胡燕
  • 1篇孙颖
  • 1篇徐东平
  • 1篇沈宏辉
  • 1篇周育森
  • 1篇刘光桥
  • 1篇辛绍杰
  • 1篇张宝元

传媒

  • 3篇军事医学科学...
  • 2篇中华实验和临...
  • 1篇微生物学通报
  • 1篇中国病毒学
  • 1篇微生物学免疫...
  • 1篇Journa...
  • 1篇现代生物医学...

年份

  • 2篇2007
  • 6篇2006
  • 2篇2005
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
Molecular characterization of a novel reovirus isolated from SARS patients with distinct S1 segment被引量:1
2006年
We reported a novel mammalian reovirus, designed BYD1, isolated from throat swabs of patients with severe acute respiratory syndrome (SARS), in 2003. In the present study, we firstly compared the genome electrophoretic migration patterns of reovirus BYD1 with 3 prototype reovirus strains by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and determined the complete nucleotide sequence of the S1 gene segment of BYD1 by single primer amplification technique. The electropherogram of BYD1 was different from those of the 3 prototype strains and any other reovirus isolates reported before. The entire S1 segment sequence of BYD1 is 1437 bp long with two meaningful open reading frames (ORFs). The longest ORF encodes σ1, the cell attachment protein, and the second longest ORF supposedly encodes σ1s, an important nonstructural virulence factor. The terminal sequences of SI segment are 5'GCUA and 3'UCAUC, which are consistent with those of other mammalian reoviruses. The highest homology of deduced σ1 amino acid sequence is 64% identity with known mammalian reoviruses. Phylogenetic analysis of both S1 nucleotide sequence and σ1 amino acid sequence indicated the BYD1 isolate belonged to a new clade of serotype 2 group. The results of this study showed that the BYD1 S1 segment was markedly different from those of isolates reported before and BYD1 was a novel human reovirus isolate.
LI HUA SONGJUN HEHONG ZHUYU XIN SURU TONG HUANGHONG YUAN DUANPAN YONG MAOQING DUAN
新分离呼肠病毒的空斑试验及病毒纯化被引量:4
2005年
目的:建立新分离呼肠病毒(reovirus)的空斑技术,进行病毒纯化,为呼肠病毒生物学和分子生物学的研究奠定基础.方法: 4株新分离呼肠病毒的早代毒种经L929细胞连续传代,当产生细胞病变后进行空斑试验,加营养琼脂培养6 d后加中性红,24 h内挑取空斑,扩增一次后做PCR鉴定.取呼肠病毒PCR阳性病毒进行第2次克隆纯化.结果:4株新分离呼肠病毒经L929细胞连续传2~4代,均能观察到明显的细胞病变.用10-3和10-4接种L929单层细胞,第6~7天均能产生空斑,空斑呈圆形,直径为0.2~1.0 mm,并分别测定其空斑滴度(PFU/ml).两次纯化后进行PCR检测,呼肠病毒基因扩增阳性、脊髓灰质炎病毒基因扩增阴性.结论:4株呼肠病毒的空斑出斑规律,通过两次克隆,获得纯化的病毒.
苏裕心何君朱虹宋立华黄如统端青
关键词:呼肠病毒RT-PCR病毒纯化
呼肠病毒BYD1株诱导细胞凋亡能力及其穿膜蛋白结构分析
2007年
目的观察我国新分离呼肠病毒BYD1株诱导细胞凋亡能力,分析病毒致细胞凋亡与主要穿膜蛋白μl结构的关系。方法用流式细胞仪检测感染细胞凋亡比例,经Student t-test检验判断病毒诱导细胞凋亡的能力。通过Lasergen V6 Megalign软件分析比对BYD1株和呼肠病毒标准株T1L、T2J和T3D的μl蛋白582.675部分的一级结构;用SWISS MODEL数据库同源模建方法分析BYD1株μl蛋白的二级结构和三级结构。结果呼肠病毒BYD1株能够诱导HeLa细胞凋亡,其μl蛋白643—675氨基酸部分的α螺旋与同型标准株T2J存在差异。结论我国新分离呼肠病毒BYDl株具有诱导细胞凋亡的能力,其μl蛋白643—675氨基酸部分的α螺旋在细胞凋亡诱导中起重要作用。
段鸿元张宝元户义宋立华朱虹端青
SARS患者咽拭标本中新分离呼肠病毒部分基因组序列分析被引量:6
2006年
目的 研究SARS患者中多病原感染状况,测定并分析新分离呼肠病毒基因组序列,从病毒的分子生物学角度研究其分类学位置。方法 SARS患者咽拭子标本经处理后接种Hep-2细胞,提取分离到的病毒RNA,以随机引物逆转录PCR扩增,PCR产物经克隆、测序,将其核苷酸序列及推断的氨基酸序列与GenBank(数据库中基因进行比较分析并建立系统进化树。结果 从4份SARS患者咽拭子标本中分离到3株呼肠病毒,部分基因片段测序结果显示为同一病毒,其病毒基因与呼肠病毒1、2、3型有较高的同源性,尤其是与呼肠病毒1、3型,相应片段的核苷酸序列同源性达82%~92%,推断相应氨基酸序列同源性高达94%~99%,而与其他病毒不存在有意义的同源性;系统进化树分析显示新分离呼肠病毒属于呼肠病毒科呼肠病毒属,且可能为哺乳动物呼肠病毒中的新血清型。结论 SARS患者咽拭子标本中存在呼肠病毒,新分离呼肠病毒核苷酸和氨基酸序列与呼肠病毒1、3型同源性最高,由于尚未得到决定病毒血清型的S1片段基因序列,故该病毒的确切分型有待进一步确定,与SARS患者病情的关系有待进一步研究。
沈宏辉孙颖周育森朱虹胡燕何君徐东平辛绍杰端青貌盼勇
关键词:严重急性呼吸综合征基因组
呼肠病毒基因组片段S1编码蛋白的研究进展被引量:1
2006年
呼肠病毒共有3个血清型,不同型之间S1片段编码蛋白的同源性小于26%,其它9个片段编码蛋白的同源性都在86%以上。S1片段是双顺反子,编码σ1和σ1s,这两个蛋白决定了呼肠病毒的感染性、致病性和毒力。本文综述了σ1、σ1s的结构与功能的研究进展。
宋立华端青
关键词:呼肠病毒
新分离呼肠病毒BYD株生物学特性的研究被引量:1
2005年
何君苏裕心朱虹宋立华黄如统端青
关键词:呼肠病毒血凝试验
新分离呼肠病毒基因组片段S1全长cDNA克隆及其序列分析被引量:6
2006年
目的:克隆测序新分离呼肠病毒的S1全长基因组片段,并对其进行序列分析。方法:从接种呼肠病毒的L929细胞中提取病毒基因组,用改进的单引物扩增技术获得S1片段的全长cDNA克隆井测定其全序列。结果:新分离呼肠病毒的S1片段长1437bp,其核苷酸序列与已知的1—3型呼肠病毒标准株的同源性分另1为59%,61%和48%;推测的cr1序列与标准株的同源性分别为52%,60%和26%。结论:新分离呼肠病毒的S1片段与目前已知的分离株相比有很大差异,有可能是2型呼肠病毒的一个独立分支。
宋立华苏裕心何君朱虹黄如统端青
关键词:呼肠病毒
呼肠病毒BYD株吸附蛋白σ1的原核表达及其抗原性鉴定
2007年
将呼肠病毒BYD株S1片段编码的细胞吸附蛋白基因连接至pET-28a(+),构建表达载体pET-28a(+)-S1,转化表达宿主菌E.coli BL21(DE3),分析表达载体能否表达预期大小的重组σ1,并进一步鉴定重组σ1的抗原性。SDS-PAGE实验表明,经IPTG诱导后,表达载体能表达53kD左右蛋白质,与重组σ1的预期大小相符;免疫印迹分析表明重组σ1有较好的抗原性和特异性,可用于呼肠病毒诊断试剂的制备。
宋立华何君朱虹刘光桥黄如统貌盼勇端青
关键词:呼肠病毒原核表达
呼肠病毒感染诱导的细胞凋亡和抗肿瘤作用
2006年
呼肠病毒感染可以引起多种细胞凋亡,这种调亡是造成某些动物特定组织损伤的关键机制。呼肠病毒还可以借助活化的Ras通路选择性地杀死癌细胞,因此它在肿瘤临床治疗上具有一定意义。
段鸿元端青
关键词:呼肠病毒凋亡抗肿瘤
新分离呼吸道肠道病毒生物学特性和S4片段的序列测定被引量:5
2006年
新分离呼吸道肠道病毒(简称呼肠病毒)经过空斑分纯后进行生物学和部分基因序列的鉴定。首先通过BYD株(由端青从北京于某患者标本中分离到的第一株呼肠病毒)对4种传代细胞的敏感性试验,选出L929和LLC-MK2敏感细胞,然后用LLC-MK2细胞进行理化性质试验,血凝试验和形态学鉴定。结果显示该病毒为耐乙醚、不耐酸、不耐热的RNA病毒;对人O型红细胞能产生凝集,滴度达1:32;电镜下可查见细胞胞浆内有球形、直径为70nm~80nm、双层衣壳的病毒颗粒。提取BYD株RNA并进行S4片段序列分析,结果显示该片段的氨基酸序列与已知呼肠病毒1~3型标准株的同源性分别为95%、90%和95%。以上这些生物学以及S4片断的序列分析结果表明:新分离BYD株病毒符合呼肠病毒科的特性。
朱虹苏裕心宋立华何君黄如统貌盼勇端青
关键词:细胞敏感性理化性质形态学
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