国家自然科学基金(81070387)
- 作品数:7 被引量:7H指数:2
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- 富含骨髓间充质干细胞的脱细胞真皮基质补片修复大鼠肛门括约肌损伤的实验研究被引量:3
- 2012年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)联合脱细胞真皮基质(ADM)补片治疗大鼠肛门括约肌损伤的可行性。方法体质量300-400g的Wistar大鼠30只,按随机数字表法分成A、B、C3组.制成肛门括约肌损伤模型备用。2周后。A组直接进行端端缝合修补。B组端端缝合后加修补处覆盖ADM补片.C组端端缝合后加修补处覆盖种植有MSC的ADM补片。6周后.各组大鼠整体取出包括肛管及下端直肠在内的环形标本.行苏木精.伊红和Masson三色染色.观察组织形态学改变。结果2周后大鼠肛门括约肌损伤模型建立成功,模型鼠肛门潮湿,肛门周围有稀便。经过修补处理后6周。组织学观察见A、B组肛门括约肌损伤处被纤维结缔组织填充并伴炎性细胞浸润.在损伤修补处可见大量被染成蓝色的散乱胶原纤维沉积.未见明显血管增生。c组肛门括约肌损伤修补处蓝色胶原沉积较A、B组减少.可见被染成红色的肌纤维分布。结论富含BMSC的ADM补片移植可在一定程度上促进大鼠损伤肛门括约肌的再生并减轻瘢痕形成。
- 周井义汪名飞陈炜丁召江从庆钱群刘志苏
- 关键词:肛门括约肌损伤外科修补骨髓间充质干细胞脱细胞真皮基质
- 重组腺病毒载体pAdxsi-GFP-Galectin-1的构建及鉴定被引量:1
- 2013年
- 目的 构建及鉴定重组腺病毒载体pAdxsi-GFP-Galectin-1.方法 通过Kpn I/BamH I双酶切从原始质粒获取半乳糖凝集素-1完整基因片段并连接到pSbuttle-CMV-EGFP重组穿梭载体;通过I-Ceu I+I-Sce I双酶切获取CMV-GFP-Galectin-1完整基因片段并连接到pAdxsi载体上,得到重组腺病毒载体pAdxsi-GFP-Galectin-1.结果 通过基因测序、酶切鉴定证实目的基因克隆至重组腺病毒载体,目的基因序列与Genebank录入序列一致.结论 成功构建重组腺病毒载体pAdxsi-GFP-Galectin-1.
- 陈炜江从庆刘先桂张志远刘韦成丁召钱群刘志苏
- 关键词:重组腺病毒载体GALECTIN-1
- 富含自体骨髓间充质干细胞的聚ε-己内酯/明胶补片修复大鼠肛门括约肌损伤被引量:2
- 2012年
- 目的构建载有自体骨骼间充质干细胞(MSCs)的聚ε-己内酯(PCL)/明胶补片,观察其对大鼠肛门括约肌损伤的修复作用。方法制备Wistar大鼠肛门括约肌损伤模型,分为3组:A组不做处理,B组直接缝合,C组外科缝合+富含MSCs的PCL/明胶补片。术后30d评估肛门括约肌收缩能力,观察肛管及下端直肠组织形态学改变。结果MSC均匀分布于PCL/明胶支架,MSCs特异性抗原(81.5±7.1)%CD45+,(97.6±1.6)%CD90+,(85.3±5.1)%CD44-,(95.4±1.5)%CD34-,MSCs未发生表型改变;细胞生长较常规方法缓慢[(0.27±0.25)×10^4比(5.12±0.48)×10^4,P〈0.05)。组织学观察C组新生的括约肌区域胶原沉积较少,并有明显的新生血管形成。结论联合MSC-PCL/明胶补片修补肛门括约肌损伤,具有减少瘢痕和促进组织血管生成的作用。
- 丁召陈炜袁玉峰刘志苏Tran Nguyen江从庆
- 关键词:聚Ε-己内酯肛门外括约肌肛门失禁
- PPH术后直肠囊肿一例被引量:2
- 2015年
- 患者.女.40岁,因“PPH术后肛门不适4个月余”于2015年9月8日入院。患者2015年5月7日在当地医院行PPH术,术后1周出现肛门坠胀不适伴大便次数增多,
- 任相海曹永磊丁召钱群江从庆
- 关键词:PPH
- 富含半乳糖凝集素-1基因修饰的骨髓间充质干细胞的脱细胞真皮基质补片修复大鼠肛门外括约肌损伤被引量:1
- 2015年
- 目的 探讨富含半乳糖凝集素-1(Galectin-1)基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSC)的脱细胞真皮基质(ADM)补片移植修复大鼠肛门外括约肌损伤的可行性.方法 取Wistar大鼠制成肛门括约肌损伤模型.两周后按对损伤处置的方式分为分成A、B、C、D4组.A组直接行断端修补;B组断端修补+覆盖ADM补片;C组断端修补+覆盖富含MSC-ADM补片;D组断端缝修补+覆盖富含Galectin-1基因修饰的MSC-ADM补片.术后6周,切取标本.苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察组织形态学改变;共聚焦显微镜观察Galectin-1表达;直肠肛管测压评估肛门括约肌功能.结果 与A、B、C组比较,D组大鼠损伤肛门括约肌修复处绿色荧光蛋白表达丰富,细胞形态呈肌细胞样;胶原纤维沉积显著减少,血管新生增加及肌纤维增多;肛门外括约肌收缩压力检测,A组收缩压力最大值(5.8±1.2) mmHg(l mmHg=0.133 kPa),B组(10.7±2.1) mmHg;C组(11.3±2.6) mmHg;D组(14.1±1.9)mmHg;与其他3组比较,D组显著高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 富含Galectin-1基因修饰MSC的ADM补片对大鼠损伤的肛门外括约肌具有良好的修复作用.
- 秦前波任相海刘先桂丁召吴云华郑科炎刘韦成钱群江从庆
- 关键词:间充质干细胞脱细胞真皮基质
- 小肠腺癌组织中表皮生长因子受体的基因状态及其意义
- 2014年
- 目的 检测小肠腺癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)基因扩增以及突变.方法 应用EGFR突变型抗体(针对EGFR 19位外显子E746-A750缺失以及21位外显子L858R点突变),采用免疫组织化学方法检测53例小肠腺癌组织芯片以及24例手术切除的小肠腺癌组织中EGFR突变以及总EGFR表达,并采用基因测序的方法检测24例手术切除标本中EGFR基因突变.结果 77例小肠腺癌标本EGFR 19位外显子E746-A750缺失率为9.1%,21位外显子L858R突变率为6.5%,总的EGFR阳性表达率为45.5%.77例小肠腺癌标本中EGFR阳性表达率、EGFR 19位外显子E746-A750缺失及21位外显子L858R点突变阳性率与患者年龄、性别、肿瘤分化程度以及分级、分期无明显相关(P>0.05).结论 小肠腺癌组织内EGFR发生基因突变的概率较小,大部分的小肠腺癌不适合应用EGFR-酪氨酸激酶抑制剂进行治疗.
- 郑科炎刘韦成张秋雷张廷涛江从庆钱群刘志苏
- 关键词:小肠腺癌表皮生长因子受体基因突变
- 富含半乳糖凝集素-1基因修饰的骨髓间充质干细胞与脱细胞真皮基质补片共培养的研究被引量:1
- 2015年
- 目的 探讨半乳糖凝集素-1(Galectin-1)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)与脱细胞真皮基质(ADM)补片共培养的可行性.方法 将Ad-绿色荧光蛋白(GFP)-Galectin-1转染间充质干细胞(MSCs)后,荧光显微镜下观察荧光表达,通过实时定量反转录聚合酶联反应(RT-qPCR)法检测Galectin-1基因表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测Galectin-1蛋白表达,Western blot检测肌间线蛋白(Desmin)表达,共聚焦荧光显微镜下观察Ad-GFP-Galectin-1转染BMSCs与ADM补片共生长情况.结果 Ad-GFP-Galectin-1转染BMSCs后,荧光显微镜下可见绿色荧光,72 h达高峰;RT-qPCR检测Galectin-1 mRNA的表达,Galectin-1 mRNA在空白对照组(PBS组)中相对表达水平为1.00;在Ad-GFP-Galectin-1(Ad-GFP-Galectin-1组)和Ad-GFP(Ad-GFP组)转染BMSCs中相对表达水平分别为4.11和1.09;ELISA证实BMSCs表达Galectin-1、Galectin-1表达量在Ad-GFP-Galectin-1组、Ad-GFP组和PBS组中分别为48 h:(197.28±8.78)、(25.52±1.56)、(24.53±2.96) μg/L;72 h:(264.33±5.43)、(25.40±2.06)、(25.46±1.13) μg/L;96 h:(172.41±3.61)、(25.22±1.61)、(28.01±1.26) μg/L;120 h:(155.53±7.25)、(24.84±2.35)、(26.65±1.54) μg/L. Western blot证实大鼠Desmin表达升高;共聚焦荧光显微镜下观察Ad-GFP-Galectin-1转染的BMSCs与ADM融合生长良好.结论 Galectin-1能诱导BMSCs合成Desmin;Ad-GFP-Galectin-1转染的BMSCs与脱细胞真皮基质(ADM)补片融合生长良好.
- 刘先桂张廷涛张秋雷刘韦成丁召钱群江从庆
- 关键词:骨髓间充质干细胞脱细胞真皮基质共培养