国家自然科学基金(30371207)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 小鼠TSR2-3/TSP-1基因片段的克隆及其GST融合蛋白的表达和纯化被引量：1
- 2006年
- 目的:获取小鼠TSR2-3/TSP-1基因片段,并高效表达和纯化GST-TSR2-3融合蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从小鼠肺总RNA中,获得编码TSR2-3的基因片功能片段,测序后,通过酶切克隆至表达载体pGEX-5X-2,构建重组表达载体,并导入E.coli BL21宿主菌中,IPTG诱导表达重组的GST融合蛋白,亲和层析纯化表达产物,SDS-PAGE和Western blot进行分析鉴定。结果:获得小鼠TSR2-3基因片段,测序结果与GenBank的基因序列一致,重组GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子量39 kDa处,出现特异性蛋白条带,重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后,得到了高纯度的融合蛋白。结论:成功克隆小鼠TSR2-3基因片段,并在E.coli BL21中高效表达,亲和层析后获得高纯度GST-TSR2-3融合蛋白。
- 王欣刘彤陈莹陈杰
- 关键词：克隆纯化
- 纤维化与潜在转化生长因子-β活化机制的研究进展被引量：2
- 2005年
- 韩丽李天人周赟陈莹陈杰
- 关键词：纤维化
- 血小板反应素-1的Ⅰ型重复序列功能肽段对小鼠肺纤维化的抑制作用被引量：1
- 2009年
- 目的观察血小板反应素-1的Ⅰ型重复序列（typeⅠ）功能肽段对小鼠肺纤维化的抑制作用。方法将小鼠随机分为6组，麻醉后采用暴露式气管内注入法给药，分别为对照组（生理盐水），模型组（1mg／kg博莱霉素），typeⅠ功能肽段低、高剂量组（1mg／kg博莱霉素＋100／200μg CSVTCG功能肽段），对照肽段低、高剂量组（1mg／kg博莱霉素＋100／200μg GDVTEN对照肽段）。分别于不同处理后第7、14、21天处死动物，HE、VG染色进行肺组织病理形态学观察，测定肺组织中羟脯氨酸含量。结果不同处理后第14天typeⅠ功能肽段低、高剂量组羟脯氨酸含量分别为（295．43±47．02）和（282．67±33．48）μg／g，与对照肽段低、高剂量组比较，羟脯氨酸含量明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。第21天typeⅠ功能肽段低、高剂量组羟脯氨酸含量分别为（365．83±60．14）和（363．29±27．15）μg／g，与模型组、对照肽段低剂量组和高剂量组比较，羟脯氨酸含量明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论typeⅠ功能肽段对小鼠肺纤维化具有明显的抑制作用。
- 陈莹王欣翁东陶莎莎吕丽娜田璐佳陈杰
- 关键词：羟脯氨酸肺纤维化
- 血小板反应素-1功能片段对非活化形式的转化生长因子-β1活化的抑制作用
- 2009年
- 目的研究血小板反应素-1（trombospondin-1，TSP-1）功能片段对肺巨噬细胞分泌的非活化形式的转化生长因子（TGF）-β1（1atent—TGF—β1，L—TGF—β1）活化的抑制作用。方法对大鼠肺纤维化模型进行肺泡灌洗，取肺巨噬细胞，用TSP-1功能片段进行孵育。实验分为对照组、单纯博莱霉素组、TSR2—β/TSP-1GST融合蛋白组、GST蛋白组、CSVTCG功能肽段组、GDVTEN对照肽段组和CD36抗体组。采用双重免疫荧光标记法观察TGF—β1与CD36共定位；用酶联免疫吸附法（ELISA）法测定肺巨噬细胞培养上清液中总TGF—β1和活化TGF—β1的量。结果TSP-1功能片段各组及CD36抗体组的TGF—β1与CD36共定位的阳性荧光颗粒明显少于单纯博莱霉素组及各对照组。TSR2—3/TSP—IGST融合蛋白组活化TGF-β1，含量为（14．82±4．68）pg／ml、CSVTCG功能肽段组为（10．28±3．65）pg/ml，明显低于单纯博莱霉素组和相应对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。TSR2—3／TSP-1GST融合蛋白组和CSVTCG功能肽段组的活化TGF—β1占总TGF—β1的百分比均明显低于单纯博莱霉素组及各对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。各组总TGF—β1的量无明显差异。结论TSP-1功能片段通过抑制L—TGF—β1／TSP-1蛋白复合物与CD36的结合进而阻抑L—TGF—β1的活化。
- 陈莹王欣翁东陶莎莎吕丽娜陈杰
- 关键词：转化生长因子Β抗原CD36
