广西研究生教育创新计划(YCBZ2012010)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
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- 猪肺血管紧张素转化酶的提取与纯化被引量：4
- 2014年
- 【目的】研究猪肺血管紧张素转化酶(ACE)的提纯方法,为其生产利用提供技术支撑。【方法】以新鲜猪肺组织为试验材料,匀浆离心后经硫酸铵分级沉淀透析,然后采用离子交换—超滤离心联合法对猪肺ACE粗提物进行纯化,测定ACE的分子量、酶活力、纯化倍数及酶活力回收率。【结果】通过离子交换—超滤离心联合法分离纯化猪肺ACE,可得到相对分子量182 kDa、酶比活力1.2476 U/mg的电泳级纯品ACE,其纯化倍数达357.31倍,酶活力回收率达12.28%。ACE催化反应动力学米氏常数(Km)为0.849mmol/L,最大反应速率(Vmax)为9.775nmol/min。【结论】采用离子交换—超滤离心联合法纯化猪肺ACE能够极大缩短分离与纯化时间,且获得较高的纯化倍数和酶活力回收率,是猪肺ACE的高效纯化方法。
- 周利琴廖丹葵孙建华伍善广兰雄雕周敬豪徐存华
- 关键词：血管紧张素转化酶猪肺阴离子交换纯化
- 猪肺血管紧张素转化酶分离纯化的工艺优化被引量：1
- 2014年
- 血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)存在于生物体组织和血液中,并在血压调控方面发挥着重要作用,高效分离纯化ACE对研究其结构和功能具有重要意义。文中将猪肺匀浆液进行酶解处理,优化浆液比、盐析初始蛋白浓度等条件,并经盐析、透析和离子交换层析等步骤,得到高活性的ACE。当猪肺以1∶3浆液比匀浆并经胰蛋白酶处理1 h后,其总酶活可增加27.06%;匀浆后初始蛋白浓度为3%时进行盐析,同时将废弃的一级盐析沉淀蛋白再回收处理,盐析过程粗酶纯化倍数为3.94倍,总酶活回收率可达73.73%,较常规处理提高了24.33%以上,经离子交换层析后,ACE酶比活为0.130 3 U/mg,总酶活回收率为59.14%。ACE酶学性质研究表明,ACE的最佳反应温度为42℃,最适p H为8.3。由酶促反应动力学方程计算得到的猪肺ACE的米氏常数Km为1.521 mmol/L,最大反应速率Vmax为17.301 nmol/min。新分离纯化工艺可使ACE收率大大提高。
- 涂振兴陈锡鸿廖丹葵兰雄雕孙丽霞和筱宇卢姗姗王燕兰
- 关键词：血管紧张素转化酶猪肺纯化
