浙江省重点科技计划(20020579-30116)
- 作品数：1 被引量：7H指数：1
- 相关作者：冯树梅骆靖峰丁敏李甜张铭更多>>
- 相关机构：新疆医科大学浙江大学更多>>
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- 单层法诱导小鼠胚胎干细胞的成骨分化研究被引量：7
- 2010年
- 目的以单层贴壁方法,高浓度维甲酸处理小鼠胚胎干细胞,以期建立一种高效成骨诱导的新体系。方法将差速贴壁后的小鼠胚胎干细胞以1.5×104个/cm2的密度接种,成骨培养液+10μmol/ml维甲酸诱导,4d后更换为成骨诱导液,直至28d,同时通过细胞的形态学观察、RT-PCR、茜素红染色对其成骨分化进行鉴定。结果随着分化时间的延长,胚胎干细胞逐渐分化为梭形细胞,且呈漩涡状排列,至分化15d左右产生结节样团块,21d时结节样物质较普遍。RT-PCR检测表明成骨诱导14d时,表达CD73+和I型胶原,说明细胞继续向成骨分化,且已进入了基质分泌阶段。21d时,表达Ⅰ型胶原和骨钙素,表明已产生了成熟的成骨细胞,并进入了矿化后期。同时成骨诱导28d时,茜素红染色显示细胞已产生大量钙结节。结论以高浓度维甲酸,在单层贴壁状态下对小鼠胚胎干细胞进行诱导,可获得大量成熟、具备矿质化特性的成骨细胞,为成骨细胞的体外诱导分化提供了新的途径,同时该体系也成为体外探讨成骨细胞表型决定机制的一个重要模型。
- 冯树梅吴苑骆靖峰丁敏李甜张铭
- 关键词：成骨细胞胚胎干细胞维甲酸
