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牛源金黄色葡萄球菌粘附因子Efb与ClfA的免疫生物学特性比较被引量：1: 2015年; 为评价与比较金黄色葡萄球菌的粘附因子Efb(Extracellular fibrinogen-binding protein)和Clf A(Clumping factor A)的抗原性、粘附特性及其抗血清对金黄色葡萄球菌菌体的识别能力、抗粘附能力及免疫保护力等免疫生物学特性,分别构建Efb和Clf A的重组表达载体,并用纯化的重组蛋白免疫实验动物,分别检测家兔抗血清对菌体的识别能力、抗粘附能力以及小鼠抗血清的抗体效价和免疫保护作用。结果显示,Efb和Clf A均有与纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg)结合的能力,且Efb蛋白对纤连蛋白(Fibronectin,Fn)的结合能力优于Clf A(P<0.01),Clf A免疫组抗血清对全细菌的识别能力优于Efb免疫组(P<0.01)。与对照组相比Efb和Clf A免疫组的抗血清均能显著抑制金黄色葡萄球菌对Fg和Fn的粘附(P<0.01),Efb免疫组对金黄色葡萄球菌的粘附抑制优于Clf A,两种粘附因子免疫小鼠后产生的血清抗体效价与对照组比较有显著的升高,抗体滴度可达1∶40 500,攻毒结果显示Efb与Clf A免疫组均对小鼠具有良好的保护效果。该研究结果对Efb在金黄色葡萄球菌的亚单位疫苗的应用奠定了基础。; 刘云涛苏艳张宝江苏玲玲姜慧娇; 关键词：金黄色葡萄球菌 EFB

金黄色葡萄球菌黏附素ClfA,FnBPA-A,FnBPA-BCD联合免疫的免疫生物学特性被引量：5: 2015年; 【目的】为比较金黄色葡萄球菌黏附素分子聚集因子(Clf A)与纤连蛋白结合蛋白A(Fn BPA)A区(Fn BPA-A)及BCD区(Fn BPA-BCD)的抗原性、抗体的黏附抑制特性及其免疫保护力。【方法】分别表达了Clf A蛋白、Fn BPA-A和Fn BPA-BCD蛋白,并将表达纯化后得到Clf A、Fn BPA-A和Fn BPA-BCD重组蛋白单独或联合免疫小鼠,收集免疫血清对其进行抗原性及免疫保护力的比较分析。【结果】结果显示,重组蛋白Fn BPA-BCD对Fn的结合能力高于其对Fg的结合,而重组蛋白Clf A及Fn BPA-A对Fg的结合能力高于Fn BPA-BCD。血清抗体的检测结果表明,Clf A蛋白及Fn BPA-A蛋白免疫组诱导抗体的水平均优于Fn BPABCD组。3种蛋白联合免疫组的血清抗体效价及抗体抗黏附能力明显优于单一蛋白免疫组(P<0.05)。3种蛋白联合免疫组与Clf A蛋白免疫组免疫保护率为100%,Fn BPA-A组与Fn BPA-BCD组免疫保护率分别为80%与50%。【结论】重组蛋白Clf A及Fn BPA-A的免疫原性优于Fn BPA-BCD,三者联合免疫较单一蛋白免疫在抗细菌的黏附、抗体诱导和免疫保护方面具有优势,提示这3种蛋白联合免疫有利于达到更好的免疫效果。; 姜慧娇苏艳申煜; 关键词：金黄色葡萄球菌联合免疫

新疆地区牛乳源金黄色葡萄球菌粘附因子ClfA基因的克隆与序列分析被引量：3: 2013年; 采集新疆奶牛隐性乳腺炎乳样,对分离鉴定的致病性金黄色葡萄球菌,提取分离菌株的基因组DNA,参考GenBank中发表的ClfA(Clumping Factor A of Staphylococcus aureus)基因序列,设计特异性引物经PCR扩增得到1 560bp的ClfA基因。对新疆3个地区分离的9株金黄色葡萄球菌分别进行ClfA基因的克隆和序列分析,对ClfA蛋白的氨基酸序列分析结果表明,新疆3个地区ClfA蛋白氨基酸的同源性为91.5%～100%,与国外其他分离菌株的同源性为91.9%～100%,差异性较小,该结果表明ClfA基因在该菌进化和流行过程中是保守的。; 邵俊高苏艳; 关键词：金黄色葡萄球菌克隆

左旋咪唑对金黄色葡萄球菌粘附素ClfA重组DNA疫苗免疫效果的影响被引量：1: 2014年; 为了探究左旋咪唑(LMS)作为免疫增强剂对金黄色葡萄球菌粘附素ClfA重组DNA疫苗免疫效果的影响。分别用含左旋咪唑的ClfA重组DNA疫苗、ClfA重组DNA疫苗及空载体免疫昆明白小鼠,通过巨噬细胞吞噬试验、MTT实验、免疫血清对金黄色葡萄球菌识别能力、酶联免疫吸附试验和攻毒试验验证免疫效果。结果表明,含左旋咪唑DNA疫苗组在巨噬细胞吞噬指数、脾脏淋巴细胞增殖、免疫血清对金黄色葡萄球菌识别能力方面有增强作用,与其他两组相比差异显著(P<0.05),含左旋咪唑DNA疫苗组小鼠抗体水平及攻毒实验保护率高于单独ClfA重组DNA组和空载对照组,LMS能够对ClfA重组DNA疫苗免疫效果起到增强作用。; 江航孙鹏姜慧娇刘云涛苏艳; 关键词：左旋咪唑免疫增强金黄色葡萄球菌疫苗

牛乳源金黄色葡萄球菌黏附素分子FnBPA不同功能区生物学活性的比较分析被引量：4: 2015年; 旨在研究和比较牛乳源金黄色葡萄球菌黏附素分子A区(FnBPA-A)和BCD区(FnBPA-BCD)两个功能区重组蛋白质免疫后的生物学功能,并评价其作为抗原开展研制抗金黄色葡萄球菌疫苗的价值。利用原核表达载体pET-28a分别表达重组蛋白质FnBPA-A与FnBPA-BCD,比较二者的黏附特性,并用纯化后的重组蛋白质单独及联合免疫方式免疫新西兰白兔和小鼠,分析比较各组蛋白质诱导的特异性抗体抑制菌体及对纤维蛋白原(Fg)、纤维连接素(Fn)的结合能力,免疫小鼠抗体水平及对小鼠的免疫保护力。结果表明,两种重组蛋白质具有不同的黏附活性,联合免疫组产生的特异性抗体水平及与Fg、Fn的结合能力均较单独免疫组高。重组蛋白质FnBPA的A区及两种蛋白质联合免疫组特异性抗体水平,抗血清对金黄色葡萄球菌Fg,Fn黏附的抑制能力要优于BCD区。免疫小鼠攻毒结果显示各免疫组均对小鼠有良好的保护效果,其中FnBPA的A区蛋白质免疫保护率高于其他试验组。该研究的结果可为牛源金黄色葡萄球菌性的乳腺炎新型疫苗的优化设计与合理应用提供依据。; 邵俊高张宝江李善春王彩蝶王国勤苏艳; 关键词：金黄色葡萄球菌生物学活性

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新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目(201311108)