国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-46-10) 作品数:28 被引量:215 H指数:9 相关作者: 谢骏 梁利国 习丙文 夏飞 陈凯 更多>> 相关机构: 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 南京农业大学 上海海洋大学 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 天文地球 更多>>
嗜水气单胞菌ERIC-PCR指纹图谱多样性研究 被引量:3 2014年 对采集自江苏、河南、福建等地淡水养殖区域的105株嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行了基因分型,并探讨嗜水气单胞菌的基因型与区域分布及生态位的关联性。该实验以ERIC-PCR技术进行分型,应用Quantity one 4.6对电泳图谱进行分析,采用非加权配对法(UPGMA法)做遗传分析的树状图。结果表明,105株嗜水气单胞菌可分为28个基因型。其中,XV基因型的菌株相对最多,Ⅳ、Ⅺ、ⅩⅫ、ⅩⅩⅤ、ⅩⅩⅥ、ⅩⅩⅦ和ⅩⅩⅧ基因型的菌株相对最少。生态位背景来源相似的菌株有聚类趋势。此外,不同地域、不同生态位的嗜水气单胞菌也可能聚为同一种基因型。由此推断嗜水气单胞菌的基因型可能与生态位及地理位置有一定的关联性。 叶诗尧 梁利国 谢骏关键词:嗜水气单胞菌 ERIC-PCR 生态位 嗜水气单胞菌耐药性研究进展 被引量:5 2012年 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)具有广泛的致病性,是水生动物尤其是鱼类最常见的致病菌。对嗜水气单胞菌耐药性的产生及机制包括固有耐药性、获得性耐药性以及耐药性基因的种类等进行了论述,并对发展前景进行了展望。 夏飞 梁利国 谢骏关键词:嗜水气单胞菌 耐药性 耐药基因 鱼类瘦素的研究进展 2017年 瘦素(leptin)由肥胖基因(obesity genes,Ob)编码,主要由脂肪组织分泌,在脊椎动物生理活动中具有重要的生理作用。瘦素可通过与瘦素受体(leptin receptor,简称LepR)结合,在抑制食欲、调节能量平衡、神经内分泌、生长与生殖等方面发挥着重要作用。本文主要针对近年来鱼类瘦素的克隆、分子特征与生物学功能、脂类代谢和繁殖的调控进行简要概述,以期为鱼类生理学研究及渔业生产提供一定的参考。 高金伟 习丙文 谢骏关键词:鱼类 脂类代谢 团头鲂黏蛋白基因Muc5b克隆及表达分析 被引量:6 2014年 黏液(mucus)在鱼体防御外界病原侵袭、信息传递、调节渗透压等方面具有重要作用。黏蛋白(mucin)作为黏液的基础骨架组分,与其相关的研究正受到广泛的关注。在本研究中,作者克隆获得团头鲂(Megalobrama amblycephala)Muc5b mRNA的部分序列3 895 bp,并通过qRT-PCR分析了Muc5b在团头鲂不同组织的表达分布及其在捕捞应激后在鳃和表皮中的表达变化。序列分析结果显示,团头鲂Muc5b与鲤(Cyprinus carpio)等脊椎动物的Muc5b有较高的同源性,其N端含有黏蛋白特异性结构域:3个VWD区域,3个C8区域,2个TIL区。组织表达分析结果表明,Muc5b在鳃和表皮表达量相对较高,在脑、脾、肾中表达水平较低,在肝、肠道几乎不表达。捕捞应激后1 h时鳃中Muc5b显著降低(P<0.05),24 h时恢复初始水平;表皮中Muc5b在4 h时显著上升(P<0.05),24 h时恢复到初始水平。 薛春雨 董晶晶 习丙文 任鸣春 梁利国 谢骏关键词:团头鲂 黏液 应激 异育银鲫致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定与药敏特性研究 被引量:18 2012年 对江苏盐城某养殖场患出血病的异育银鲫(Carassius auratus gibelio)进行细菌分离鉴定和药敏试验,为该病的防控提供科学依据。从病死及濒死异育银鲫的肝脏、脾、肾中分离病原菌,经过形态观察、生理生化试验、16S rRNA序列分析,最终进行细菌鉴定,采用纸片扩散法进行药敏实验,通过人工回归感染试验确定分离菌株的致病性。分离的2株细菌(编号为WJ11-3和WJ11-4)均为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),均能导致异育银鲫死亡,并出现与自然条件下基本一致的症状。药物敏感性试验结果显示,嗜水气单胞菌分离株WJ11-3对苯唑西林、林克霉素、万古霉素显示耐药性,对恩诺沙星等28种药物高度敏感;WJ11-4对苯唑西林、林克霉素、新生霉素显示耐药性,对氟苯尼考等28种药物高度敏感。本次异育银鲫的出血病由嗜水气单胞菌感染引起,可选用恩诺沙星、阿洛西林、氧氟沙星、苯唑西林、林克霉素、新生霉素等多种药物进行防治。 刘亚楠 梁利国 顾伟 谢骏关键词:异育银鲫 嗜水气单胞菌 药敏特性 异育银鲫源杀鲑气单胞菌杀鲑亚种的分离鉴定 被引量:10 2016年 【目的】分离鉴定江苏省扬州市养殖场异育银鲫患病病原。【方法】采用常规的理化特性和分子生物学的方法,对从濒死异育银鲫肝脏处分离到的菌株YZ-1进行表型生物学、分子生物学及药敏试验的系统研究。【结果】该菌株16S r RNA基因(序列长度1 446 bp,Gen Bank登录号为JX164202)与其它杀鲑气单胞菌16S r RNA基因一致性在99%-100%之间,构建发育树确定该菌株为杀鲑气单胞菌杀鲑亚种(Aeromonas salmonicida subsp.salmonicida)。人工回感可导致异育银鲫死亡。药敏试验结果显示:对头孢呋辛、复方新诺明、恩诺沙星等23种抗生素敏感;对阿米卡星、四环素、大观霉素、头孢拉定等11种抗生素中度敏感;对青霉素G、链霉素、庆大霉素、氟苯尼考、万古霉素等10种抗生素耐药。【结论】研究结果证实引起异育银鲫死亡的病原为杀鲑气单胞菌杀鲑亚种。 王亚冰 梁利国 高金伟 习丙文 谢骏团头鲂黑素皮质素受体2基因克隆、组织分布和应激后的表达分析 被引量:3 2014年 在神经内分泌下丘脑-垂体-肾间组织轴调控中,黑素皮质素受体2(MC2R)与垂体释放的促肾上腺皮质激素结合而激活相应的cAMP信号转导途径,对鱼类的应激反应调控具有重要的作用。本研究通过PCR、RACE技术克隆获得团头鲂MC2R mRNA序列,并通过实时定量PCR分析了团头鲂MC2R组织分布情况及捕捞胁迫后的表达变化。结果显示,获得的MC2R mRNA序列开放阅读框为915 bp,编码304个氨基酸。序列同源性及系统育分析显示,团头鲂MC2R氨基酸序列与鲤科鱼类的MC2R聚为一支,与金鱼(Carassius auratus)MC2R的氨基酸序列同源性最高(87%)。组织分布结果表明,头肾中MC2R的表达量最高,脾脏、精巢和脑中有相对较高的表达量,中肾、肝、肠和肌肉等MC2R的表达量相对较低。经捕捞出水体60 s的急性应激处理后,皮质醇在4 h时显著升高,24 h时表现出下降的趋势;MC2R基因表达量在头肾中变化不显著,然而脾、脑和精巢中MC2R在4 h时表达量相对于1 h则呈现出显著的下降。通过对团头鲂应激后主要调控因子变化规律的研究,可为鱼类应激后调控措施的实施提供参考依据。 董晶晶 薛春雨 习丙文 梁利国 刘波 任鸣春 谢骏关键词:团头鲂 皮质醇 克隆 应激 团头鲂养殖池塘维氏气单胞菌的致病性耐药性及在不同生态位间的差异 被引量:17 2012年 从江苏省常州市团头鲂养殖池塘鱼体内、外环境(内环境包括鱼体肠道、体表黏液、鳃、腹腔、肝脏、肾脏等,外环境包括水体、底泥、浮游生物等)分离鉴定了56株维氏气单胞菌(Aeromonas veronii),分析56株维氏气单胞菌的致病性、毒力基因及耐药性,并比较了不同生态位间的差异。结果表明:(1)维氏气单胞菌具有一定的致病性,56株维氏气单胞菌中使团头鲂的48 h死亡率在40%以上的菌株有26株,为团头鲂细菌性出血病的病原菌之一。(2)细胞兴奋性肠毒素基因alt、溶血素基因hly的检出率分别为26.8%、48.2%,具有2种毒力基因的菌株占19.6%;(alt+、hly+)、(alt+、hly-)、(alt-、hly+)、(alt-、hly-)4种毒力基因菌株型48 h致死率分别为41.8%、35%、32.3%、29.2%,表明死亡率与这2种毒力基因可能存在一定的正相关性。(3)维氏气单胞菌对大多数抗生素耐药,对氨苄西林完全耐药,对复方新诺明、诺氟沙星、洛美沙星的耐药率也分别高达94.6%、94.6%、91.1%,只对多黏菌素、庆大霉素较为敏感,敏感率分别为64.3%、48.2%。(4)不同生态位菌株的毒力基因比较结果显示,鱼体上菌株2种毒力基因的携带率(alt 30.4%、hly 47.8%)大于外界环境毒力基因的携带率(alt 10%、hly 40%);不同生态位菌株的抗药性呈现出一个特点,即鱼体上分离到的菌株耐药率(67.2%)要明显大于外环境中菌株对药物的耐药率(40%)。 周光 谢骏 周群兰 习丙文 徐跑关键词:维氏气单胞菌 毒力基因 药敏 生态位 团头鲂病原嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:25 2012年 从患病的团头鲂肝脏中分离到1株优势菌WJ-8。将菌株WJ-8进行人工回归感染试验,其患病症状同自然发病症状,证明其对团头鲂有致病性。该菌株的形态特征、主要理化特性、16SrRNA序列测定结果及系统发育树的构建表明该菌株为嗜水气单胞菌。药敏试验结果显示,该菌株对氟苯尼考、甲哌利福霉素、链霉素、卡那霉素等22种药物敏感,对青霉素、氨苄西林、羧苄青霉素、苯唑西林等12种药物表现出耐药性。 夏飞 梁利国 谢骏关键词:团头鲂 嗜水气单胞菌 药敏试验 鳜源致病性维氏气单胞菌的鉴定及药敏试验 被引量:14 2016年 【目的】通过对从患病的鳜(Siniperca chuatsi)肝脏中分离得到的一株优势菌WJ2014-1进行鉴定,旨在确定病因并筛选出敏感药物,为今后鳜维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的防治提供参考。【方法】从患病鳜肝脏分离致病菌,通过对其生理生化特征与16S r RNA基因序列分析进行鉴定,并通过纸片扩散法进行药敏试验。【结果】用菌株WJ2014-1进行人工回归感染试验后,鳜发病症状与自然发病症状相似。根据该菌株的形态特征、生化特性、16S r RNA基因序列分析结果鉴定为维氏气单胞菌。该菌株对复方新诺明、强力霉素、罗红霉素、头孢噻肟、哌拉西林等21种抗生素敏感,对氯霉素、诺氟沙星、萘啶酸等9种抗生素耐药。【结论】分离得到的菌株WJ2014-1对鳜有致病性,生产中可选用复方新诺明、强力霉素、罗红霉素等药物进行防治。 高金伟 梁利国 王亚冰 谢骏关键词:维氏气单胞菌 药敏试验