山西省回国留学人员科研经费资助项目(211-091)
- 作品数：15 被引量：51H指数：4
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- 相关机构：长治医学院山西医科大学南加州大学更多>>
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- 低氧诱导因子在肝肺综合征大鼠肺组织中的表达及其与糖调节蛋白78的关系
- 2016年
- 目的探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠肝肺综合征(HPS)发病中的作用及其与糖调节蛋白78(GRP78)的关系。方法复合致病因素法制备HPS大鼠模型。Western blotting法检测肺组织HIF-1α、血管内皮生长因子164(VEGF164)及GRP78蛋白表达水平。免疫组化染色法观察肺组织VEGF受体2(VEGFR-2)及CD105的表达。结果模型组动物肺组织HIF-1α蛋白表达水平在第8周显著高于同期正常对照组及4周、6周组;GRP78蛋白表达随病程进展逐渐升高,至第8周达到最高水平,各时间点之间以及与同期正常对照组比较差异均具有统计学意义;VEGF164蛋白表达随病程进展逐渐增加,至6周达到高峰,各时间点均显著高于同期正常对照组,6周和8周表达水平显著高于4周;VEGFR-2及CD105免疫组化染色强度和数量均随HPS进展逐渐增高;GRP78分别与VEGF164、VEGFR-2及CD105的表达水平呈正相关(P<0.05),HIF-1α与GRP78亦呈正相关关系(P<0.05)。结论 HIF-1α可能在HPS发病中起一定作用,与GRP78共同促进了肺微血管重构。
- 李旭炯张慧英田小霞陈云霞孟莉来丽娜赵中夫韩德五Cheng Ji
- 关键词：肝肺综合征低氧诱导因子-1Α糖调节蛋白78血管内皮生长因子
- 复合致病因素诱导肝硬化大鼠TGF-α和TGF-β1的动态变化被引量：5
- 2016年
- 目的:观察复合致病因素诱导肝硬化大鼠肝组织中转化生长因子-α(TGF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的动态变化。方法:采用复合致病因素法复制大鼠肝硬化模型:首次皮下注射CCl4原液(0.5 ml/100 g·w),之后每隔3天皮下注射40%CCl4油溶液(0.3 ml/100 g·w),同时辅以低胆碱、高胆固醇、高脂肪、高醇饮食。随机将大鼠分为肝硬化模型4周、6周和8周组,并分别设立同期正常对照组。检测各组大鼠血浆中谷丙转氨酶(ALT)、内毒素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和同型半胱氨酸(Hcy)的水平;肝组织切片行HE染色,TGF-α和TGF-β1的免疫组化染色。结果:与相应的同期正常对照组比较,大鼠血浆中ALT、内毒素、TNF-α和Hcy水平在肝硬化模型4周、6周和8周组均逐渐显著升高(P<0.05);肝组织中TGF-α的表达在肝硬化模型4周组明显增加(P<0.05),而肝组织中TGF-β1的表达则随着肝硬化病程的进展持续显著增加(P<0.05)。结论:在肝硬化形成过程中,TGF-α的表达先增加后被抑制,TGF-β1的表达持续增加,导致肝细胞再生先增强后被抑制,而肝纤维化程度不断加重,最终发生肝硬化。TGF-α和TGF-β1的这一特征性动态变化可能与内毒素血症、TNF-α水平增高以及高同型半胱氨酸血症有关。
- 田小霞张慧英王黎敏李旭炯刘燕张丽丽毕杨辉
- 关键词：肝硬化肝再生肝纤维化TGF-ΑTGF-Β1
- 肝硬化大鼠不同脏器NO表达差异及其机制被引量：1
- 2015年
- 目的:观察肝硬化大鼠发病过程中不同脏器NO表达的差异并探讨其可能原因。方法:采用复合致病因素法建立肝硬化大鼠模型。8周末测定大鼠血浆内毒素(ET)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;检测各组织匀浆中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量;组织学切片HE染色进行巨噬细胞计数。结果:与正常对照组相比,肝硬化大鼠血浆ET、TNF-α、ALT水平明显升高,肝、肺、心、脑、肾组织中巨噬细胞计数及匀浆中MDA、NO、iNOS含量升高,除脑组织巨噬细胞计数以外,其它指标升高均具有统计学意义。结论:肝硬化发病过程中,肠源性内毒素及其诱导产生的TNF-α,是不同脏器NO表达差异的重要原因;而巨噬细胞在各个脏器分布的特点,是导致NO表达差异的基本机制。
- 王黎敏张丽丽李旭炯陈云霞田小霞范毅敏张慧英
- 关键词：肝硬化内毒素巨噬细胞一氧化氮氧化应激
- 肺微血管内皮细胞原代培养方法的建立被引量：7
- 2014年
- 目的 建立大鼠肺微血管内皮细胞原代培养方法, 观察细胞生长状态并鉴定细胞性质。方法 4-5周龄大鼠随机分成3组, 无菌状态下剥除胸膜, 将肺组织边缘剪成1 mm3的大小, 贴入一次性培养瓶, 分别用含肝素钠的DMEM完全培养液、RPMI1640完全培养液以及含原代内皮细胞培养特制添加剂的完全培养液培养, 在倒置显微镜下观察细胞生长和形态, 免疫荧光组织化学染色观察细胞CD31的表达。结果 与2组对照组相比, 采用含原代内皮细胞培养特制添加剂的完全培养液培养, 获得的肺微血管内皮细胞数量多, 纯度高。内皮细胞于24 h迁移出肺组织块, 14 d左右汇合, 呈多角形, 以铺路石样镶嵌状排列生长。传代细胞呈长梭形, 生长迅速, 具有自发形成血管的倾向。细胞为CD31免疫反应阳性, 证实其为内皮细胞。结论 采用组织块贴壁法, 选择原代内皮细胞培养特制添加剂以及优化分离过程, 可以获得高纯度原代大鼠肺微血管内皮细胞。
- 贾建桃张慧英王黎敏赵中夫刘明社来丽娜卢彦珍
- 关键词：肺微血管内皮细胞原代培养
- 葡萄糖调节蛋白78促进肝硬化大鼠心肌细胞凋亡及其机制被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78/免疫球蛋白重链结合蛋白(GRP78/BiP)是否促进肝硬化大鼠心肌细胞凋亡及其发生机制。方法:采用复合致病因素法建立肝硬化大鼠模型,在4周、6周和8周分别取材。实验1:取心脏称重并测量左室壁厚度,计算左室壁厚度与心脏重量比值及心脏指数。实验2:TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况;免疫组化方法检测心肌组织中GRP78/BiP蛋白以及凋亡相关蛋白CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白/生长停滞及DNA诱导蛋白153(CHOP/GADD153)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)、B细胞淋巴瘤/白血病蛋白2(Bcl-2)的表达。结果:随肝硬化病程进展,左室壁厚度与心脏重量比值以及心脏指数逐渐增加,8周组增加显著(P<0.05);心肌细胞凋亡指数、CHOP/GADD153和caspase-12阳性蛋白表达指数逐渐升高,8周组差异显著(P<0.05);NF-κB p65和Bcl-2阳性蛋白表达指数呈一致性变化,在4周组较其它组明显增高(P<0.05);GRP78/BiP蛋白阳性表达指数与心肌细胞凋亡指数、CHOP/GADD153、caspase-12蛋白阳性表达指数呈显著正相关,CHOP/GADD153与NF-κB p65、Bcl-2蛋白阳性表达指数呈显著负相关。结论:GRP78高表达在内质网应激介导的肝硬化心肌病发病中可能发挥重要作用。
- 张丽丽庞慧吕敏丽山西医科大学第二医院ICU张慧英贾建桃王黎敏刘燕李旭炯李宝红张翠英赵中夫韩德五JI Cheng
- 关键词：葡萄糖调节蛋白78内质网应激细胞凋亡内毒素类
- 葡萄糖调节蛋白78在大鼠肝肺综合征肺微血管重构中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)引发大鼠肝肺综合征(HPS)肺微血管重构的机制。方法:Wistar大鼠被随机分为4周组、6周组和8周组3个时点,采用复合致病因素法制备大鼠肝硬化合并HPS模型,并设标准饮食的正常大鼠作为对照组。免疫组化染色法观察肺组织GRP78、Ⅷ因子相关抗原(FⅧ-RAg)C/EBP同源蛋白(CHOP)/生长阻滞及DNA损伤诱导蛋白153(GADD153)、caspase-12、Bcl-2和核因子(nuclear factor,NF)-κB的表达。RT-PCR和Western blotting法检测肺组织血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达水平。结果:模型组动物肺组织中GRP78、FⅧ-RAg及VEGF蛋白的表达随HPS进展逐步增高,CHOP/GADD153及caspase-12的表达随HPS进展逐步降低,Bcl-2和NF-κB随病程进展表达逐渐增加,NF-κB尤以胞核表达增高明显。GRP78与FⅧ-RAg及VEGF蛋白水平呈明显正相关(P<0.01),而与CHOP/GADD153及caspase-12的表达呈明显负相关(P<0.01)。在各时点,模型组动物肺组织GRP78和FⅧ-RAg显著高于正常对照组;VEGF蛋白和mRNA均显著高于正常对照组;而CHOP/GADD153及caspase-12的表达均低于正常对照组(P<0.05)。结论:GRP78可能通过促进血管内皮细胞增殖和抑制其凋亡,促进肺微血管重构,导致HPS的发病。
- 贾建桃张慧英郭建红李晨吕敏丽张丽丽张翠英李宝红赵中夫韩德五CHENG Ji
- 关键词：肝硬化肝肺综合征葡萄糖调节蛋白78
- 大黄素对肝纤维化大鼠肺损伤的保护作用被引量：11
- 2014年
- 目的:探讨不同剂量大黄素对肝纤维化大鼠肺损伤的保护作用。方法:采用复合致病因素法(CCl4、乙醇、高脂、高胆固醇和低胆碱)建立肝纤维化大鼠模型并以不同剂量(20 mg/kg和40 mg/kg)大黄素进行治疗。4周后,测定肝指数,检测血清内毒素、同型半胱氨酸、反映肝功能的指标白蛋白、天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、总胆红素、总胆固醇、甘油三酯和肝纤维化指标透明质酸、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、Ⅲ型前胶原蛋白的含量,观察肝组织病理学改变;测定肺指数,光镜下行肺组织病理学观察,检测肺组织匀浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和过氧亚硝基阴离子(ONOO-)含量。结果:大鼠肝纤维化模型复制成功,模型组大鼠肺指数明显增加,肺脏发生水肿、炎症反应,肺匀浆TNF-α、MDA、NO和ONOO-含量明显增加;大黄素治疗组肺指数较模型组下降,肺组织病理性损伤明显减轻,肺组织TNF-α、MDA、NO和ONOO-含量明显降低。结论:大黄素对肝纤维化大鼠的肺损伤具有一定的保护作用。
- 张丽丽张慧英王黎敏李旭炯贾建桃吕敏丽范毅敏张翠英刘明社赵中夫韩德五CHENG Ji
- 关键词：大黄素肝纤维化肝肺综合征肺损伤
- 巨噬细胞极化在大鼠肝硬化发生发展中的作用被引量：4
- 2016年
- 目的：探讨在大鼠肝硬化发病过程中,巨噬细胞的极化状态及其与肠源性内毒素血症-内质网应激反应之间的关系。方法：36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和肝硬化模型组。各组动物分别于造模第4周末、6周末和8周末处死取材。ELISA法检测大鼠血浆中ALT、内毒素、Hcy的水平和肝组织匀浆中i NOS、TNF-α、IL-6、Arg-1、IL-10的水平;肝组织切片行HE染色和VG染色;实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织中Grp78、NF-κB、IRF5、CD86、CD206和TGF-β1的mRNA表达。结果：与相应的正常对照组相比,肝硬化模型组动物血浆中ALT、内毒素、Hcy水平和肝组织中Grp78的mRNA表达在4周、6周和8周均随病程进展逐渐升高（P〈0.05）;肝组织中NF-κB、IRF5和CD86的mRNA表达以及i NOS、TNF-α、IL-6的水平均显著升高（P〈0.05）,且它们的变化趋势为6周水平最高,4周次之,8周最低;肝组织中CD206和TGF-β1的mRNA表达以及Arg-1、IL-10的水平在4周未见明显变化,在6~8周逐渐升高（P〈0.05）。相关性分析结果显示,血浆中内毒素水平与肝组织中Grp78的mRNA表达显著相关（P〈0.01）;血浆中内毒素水平和肝组织中Grp78的mRNA表达均与肝组织中CD86和CD206的mRNA表达显著相关（P〈0.01）。结论：肝损伤-肠源性内毒素血症-内质网应激-巨噬细胞极化途径可能是肝纤维化乃至肝硬化发病的重要机制。
- 田小霞张慧英陈云霞李旭炯王黎敏孟丽来丽娜赵中夫韩德五CHENG Ji
- 关键词：肝硬化肝纤维化巨噬细胞内质网应激内毒素
- 甜菜碱对大鼠肝纤维化的保护作用研究被引量：2
- 2015年
- 目的观察甜菜碱对复合致病因素诱导肝纤维化大鼠的保护作用。方法复合致病因素法诱导制备肝纤维化大鼠模型,观察灌服甜菜碱对肝纤维化大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、内毒素(ET)、同型半胱氨酸(Hcy)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、IV胶原蛋白(IV-C)、Ⅲ型前胶原蛋白(PC-Ⅲ)及肝组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、过氧亚硝酸盐阴离子(ONOO-)、丙二醛(MDA)的变化,并采用HE和VG染色分别观察肝损伤和肝纤维化情况。结果大鼠肝纤维化模型复制成功。给与三个剂量的甜菜碱后,肝组织病理损伤改善。反映大鼠肝功能(ALT、AST)及肝纤维化指标(HA、LN、IV-C)的水平不同程度降低。血清内毒素、肝组织NO、MDA水平亦明显降低。同时Hcy及ONOO-在中、高剂量组明显降低,而TNF-α的降低在高剂量组中也具有明显的统计学差异。结论甜菜碱可抑制复合因素诱导的大鼠肝纤维化,其作用可能是通过降低大鼠体内高同型半胱氨酸、调节炎性细胞因子和氧化应激实现的。
- 李旭炯张慧英张丽丽赵中夫韩德五Cheng Ji
- 关键词：甜菜碱肝纤维化内毒素
- 肝硬化大鼠细菌易位以及甜菜碱的干预作用被引量：3
- 2014年
- 【目的】研究肝硬化大鼠的细菌易位情况,并探讨甜菜碱对其的干预作用。【方法】随机将48只健康雄性SD(Sprague dawley,SD)大鼠分为四组:正常对照组(N),甜菜碱干预的正常对照组(NB),肝硬化模型组(M),甜菜碱干预的肝硬化模型组(MB)。采用复合致病因素法诱导大鼠肝硬化,NB组和MB组使用1 000 mg/(kg w·d)的甜菜碱水溶液灌胃,N组和M组使用等体积饮用水灌胃;HE染色观察肝脏与小肠损伤情况,并检测各组动物脏器指数与细菌易位情况。【结果】M组大鼠体重增长缓慢(与N组比较,4周和6周时间点均P=0,P<0.01);与M组相比,MB组大鼠体重增长较快,至6周时间点体重差异显著(P=0.023,P<0.05)。与N组相比,M组动物4周时间点肝脏指数显著升高(P=0,P<0.01);6周时间点肝脏(P=0,P<0.01)、脾脏指数(P=0.038,P<0.05)均显著升高,肾脏指数显著降低(P=0.019,P<0.05);与M组相比,6周时间点MB组动物肝脏指数(P=0.038,P<0.05)明显降低,肾脏指数(P=0.011,P<0.05)明显升高。M组动物肝、肠组织发生明显病理学改变;MB组动物病理学改变减轻。M组发生细菌易位的大鼠数量升高,4周时主要易位于MLN,6周时主要易位于MLN和肾脏;MB组发生细菌易位的大鼠数量有所减少,其中6周时易位至MLN的大鼠数量明显减少(P=0.046,P<0.05)。【结论】复合致病因素诱导的肝硬化大鼠,发生细菌易位的器官主要是MLN和肾脏,易位的细菌可通过淋巴管道转位,并随肝硬化病程进展趋于严重。甜菜碱除了其转甲基的保护作用以外,很可能还通过对肠道的保护作用,在一定程度上阻止了肝硬化动物细菌易位的发生。
- 陈云霞张慧英孟莉李旭炯来丽娜田小霞王黎敏
- 关键词：肝硬化细菌易位甜菜碱干预作用
