国家自然科学基金(30671432)
- 作品数：9 被引量：79H指数：6
- 相关作者：张志宏李贺高秀岩常琳琳韩柏明更多>>
- 相关机构：沈阳农业大学辽宁省农业科学院中国农业科学院果树研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”辽宁省高等学校优秀人才支持计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 草莓不同器官中microRNA表达差异研究被引量：15
- 2009年
- MicroRNA(miRNA)在植物的生长发育过程中起着重要作用。以CTAB法提取的总RNA为模板,通过设计茎环反转录引物,利用实时RT-PCR技术对草莓根系、花托、茎尖和叶片4种器官中的6种miRNA进行了表达差异研究。以草莓叶片中6种miRNA的表达量为1,差异表达结果显示miR164在草莓花托中高度表达,达到6.615,明显高于根系(0.485)、茎尖(0.371)和叶片(1.000);miR172在茎尖和花托中的表达量都较低,分别为0.029和0.020,在根系中的表达量更低,只有0.0008454;miR167在根系中表达也很低,只有0.053;miR156,miR159和miR165在4种草莓器官中的表达差异不明显。这些结果为进一步验证miRNA基因在草莓植株生长发育过程中的作用奠定了基础。
- 李贺印东升王志刚黄飞飞常琳琳张志宏
- 关键词：草莓MICRORNAREALTIME
- 草莓microRNA的RT-PCR鉴定被引量：12
- 2009年
- 【目的】microRNAs(miRNAs)在植物的生长发育过程中起着重要作用,本研究旨在建立一种快速准确地鉴定草莓中保守miRNA的方法。【方法】以草莓叶片为试材,在利用改进的CTAB法成功富集小于150bp的小分子RNA的基础之上,采用3′端加接头、5′端和3′端两端加接头、利用茎环等3种RT-PCR策略来检测鉴定草莓中保守miRNA,同时比较总核酸、总RNA和小分子RNA等不同种类的模板对利用茎环RT-PCR检测miRNA的影响。【结果】对于植物中20种miRNAs,通过3′端加接头方式鉴定出7种;通过两端加接头方式鉴定出1种;而利用茎环的方式鉴定出15种。分别以3种核酸为模板的茎环RT-PCR的扩增效果没有差异。【结论】总核酸的提取是最快速最简单的,因此,以总核酸为模板,利用茎环RT-PCR是鉴定植物中miRNA的最简便快速而有效的方法,这种方法的可行性已在苹果、葡萄等植物上得到验证。
- 李贺张志宏高秀岩刘月学黄飞飞
- 关键词：MICRORNASRT-PCR草莓
- 组织培养导致的草莓DNA甲基化变异被引量：9
- 2010年
- 以草莓品种‘丰香'和‘全明星'为材料,用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术研究组织培养对草莓DNA甲基化的影响。结果表明,与普通苗相比,组织培养导致草莓试管苗的DNA甲基化水平下降,甲基化模式的变异以去甲基化为主。组织培养导致的DNA甲基化变异不稳定,在田间无性繁殖过程中,试管苗的无性繁殖后代DNA甲基化水平逐渐升高,仅部分变异的甲基化模式能够在试管苗的无性繁殖后代中稳定传递。两个品种之间,组织培养对DNA甲基化变异程度的影响不同。
- 韩柏明赵恺李贺高秀岩张志宏
- 关键词：草莓甲基化MSAP
- 携带斑驳病毒和微繁殖对草莓生长的影响被引量：2
- 2008年
- 比较了草莓主栽品种丰香携带斑驳病毒(SMoV)、脱毒微繁殖苗及携带斑驳病毒匍匐茎苗的田间生长情况和抽生匍匐茎能力。在整个生长期,丰香草莓的株高和冠径都表现为:携带斑驳病毒匍匐茎苗>脱毒微繁殖苗>携带斑驳病毒微繁殖苗。草莓苗平均单株抽生匍匐茎的数量,2种微繁殖苗是匍匐茎苗的2～3倍,而微繁殖苗之间没有明显差异。结果表明,感染斑驳病毒导致草莓植株生长势明显下降。与常规的分株繁殖方法相比,采用微繁殖方法繁育的草莓苗,生长势较弱,但匍匐茎抽生能力明显增强。
- 袁芳韩柏明常琳琳张志宏
- 关键词：草莓斑驳病毒脱毒田间表现
- 草莓MET1基因启动子克隆及瞬时表达分析被引量：1
- 2011年
- 根据草莓MET1类DNA甲基转移酶基因(FaMET1)全长序列设计引物,通过PCR获得了该基因翻译起始位点上游669 bp的序列。生物信息学分析表明,该序列中存在启动子的基本元件TATA-box、CAAT-box和多个胁迫诱导元件。进一步构建了FaMET1基因启动子驱动GUS的植物表达载体FMpro∷GUS,通过农杆菌注射法转化草莓果实细胞,结果表明,该序列能够驱动GUS在草莓果实中瞬时表达,为进一步研究FaMET1的表达调控奠定了基础。
- 常琳琳张志宏张运涛李贺王桂霞张利喜
- 关键词：草莓启动子
- 组培条件下脱毒与带毒丰香草莓植株表型的比较被引量：6
- 2009年
- 为了区分草莓微繁殖苗生长表型中的组培效应和脱毒效应,以草莓主栽品种丰香为试材,通过茎尖培养进行脱毒,采用RT-PCR技术进行病毒鉴定,并比较脱毒微繁殖苗、带毒微繁殖苗(草莓斑驳病毒)和带毒普通苗在田间和日光温室条件下性状表现。结果表明:无论带毒与否,微繁殖苗的单株匍匐茎子苗数、新茎数、花序数、开花数和结果数均高于带毒普通苗,而它们的物候期差异不大。在整个生长季内,脱毒微繁殖二代苗的生长势最强,其株高始终高于一代苗和普通苗。脱毒和带病毒微繁殖一代苗与带病毒普通苗的产量差异不大,但脱毒微繁殖二代苗的产量比普通苗和一代苗高19.7%,差异显著。微繁殖苗的白粉病发病较早,在发病早期,微繁殖苗的感病率比普通苗高5%～10%,微繁殖苗的病情指数约是普通苗的1.5倍。组培效应导致了微繁殖苗在单株匍匐茎子苗数、新茎数、花序数、开花数和结果数上高于普通苗。微繁殖苗对白粉病的抗性有所下降。
- 韩柏明李贺高秀岩张志宏
- 关键词：草莓组培脱毒表型
- 草莓品种对炭疽病抗性的鉴定技术研究被引量：26
- 2008年
- 从沈阳农业大学草莓试验园的发病草莓植株上分离获得胶孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides(Penz.)Sacc.],以6个草莓主栽品种为试材,进行品种抗病性鉴定技术研究。结果表明,点滴接种、菌片接种和喷雾接种3种方法均能使供试草莓植株感染炭疽病,其中以喷雾接种法发病率和病情指数最高。据此建立了草莓对炭疽病抗性鉴定技术体系:以菌悬液在植株6叶期喷雾接种,接种适宜孢子量1.0×105个/mL,保湿时间48h,接种后5d调查叶片病情和接种后7d调查叶柄及匍匐茎病情。草莓品种抗性鉴定结果表明,红颜属感病品种,丰香表现中感,哈尼、新明星表现中抗,而玛利亚和吐德拉抗性较强,此结果与其生产上的表现基本一致。
- 王丰马跃高秀岩张志宏
- 关键词：草莓炭疽病抗病性
- 草莓微繁殖苗移栽后开花结果的研究被引量：4
- 2007年
- 以草莓品种丰香、吐德拉、全明星、北辉为试材,研究了移栽时期、生根方式对草莓微繁殖苗移栽后开花结果的影响。草莓微繁殖苗在春季移栽时期对开花结果习性具有重要影响,2月份移栽,4个品种都开花结果,成熟期比露地栽培草莓大约晚20d,全明星、吐德拉和丰香3个品种的产量与普通苗露地栽培的产量相近;3月份移栽,虽然有开花结果,但并无经济学产量;4月份移栽,4个品种均未开花。不同品种的微繁殖苗在开花株率、单株产量等指标上差异显著,其中全明星微繁殖苗的开花结果能力最强,2月份移栽的微繁殖苗的开花株率达89.3%,单株产量达98.2g。在花序数上,培养基中不含植物生长调节剂处理显著高于附加植物生长调节剂的处理。
- 米建梅张志宏李贺高秀岩杜国栋
- 关键词：草莓开花移栽
- 全基因组基因表达分析技术及其在果树上的应用被引量：6
- 2008年
- 基因表达分析对于揭示基因功能、了解基因间相互关系、阐明植物生长发育过程中的生理生化调控机制起着至关重要的作用。综述了mRNA差异显示、cDNA-AFLP、基因芯片、EST数据分析、基因表达系列分析(SAGE)等全基因组基因表达分析技术的原理特点及在果树上的应用情况,并介绍了利用全基因组基因表达分析技术开展果树研究的思路。
- 张志宏赵进春代红艳
- 关键词：基因表达表达序列标签基因表达系列分析
