国家自然科学基金(81070405)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- RelB在蛋白酶体抑制剂诱导的maspin表达中的作用研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨前列腺癌细胞中,核转录因子NF-κB家族成员之一RelB在蛋白酶体抑制剂作用下maspin蛋白表达调控中的作用机制。方法:采用Western blotting法检测前列腺癌细胞中内源性及蛋白酶体抑制剂MG-132作用下RelA、RelB和maspin的蛋白表达;采用免疫组化法检测前列腺癌组织中RelB和maspin的表达情况;通过转染小分子RNA至前列腺癌细胞中沉默RelB的表达;采用Western blotting法检测RelB沉默对MG-132诱导的maspin蛋白表达情况的影响;PI染色法结合流式细胞术检测细胞死亡率。结果:雄激素非依赖型前列腺癌细胞DU145中RelB表达增强而maspin表达明显降低。在检测的10例前列腺癌组织样本中,恶性度高(Gleason评分4-5)的样本普遍同时存在胞核内RelB强染色和maspin表达缺失。MG-132作用DU145细胞24 h后RelB在胞浆和胞核中表达水平下调,伴随着maspin在胞核内的表达上调。MG-132处理RelB表达沉默的DU145细胞8和24 h后,maspin的表达无明显变化,而RelA蛋白的表达水平呈时间依赖性的下调。结论:在雄激素非依赖型前列腺癌细胞和晚期前列腺癌组织中,maspin与RelB的表达呈负相关性。蛋白酶体抑制剂诱导maspin的表达上调过程中,RelB是重要的调控因子。
- 国风郭凌川沈雅颖顾冬梅朱卫东康苏娅
- 关键词：蛋白酶体抑制剂RELBMASPIN前列腺肿瘤
- 核转录因子RelB对慢性B淋巴细胞白血病细胞蛋白酶体抑制剂敏感性的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨核转录因子RelB对慢性B淋巴细胞白血病（B-CLL）细胞蛋白酶体抑制剂敏感性的影响.方法 以初诊B-CLL患者CD5＋CD19＋细胞为研究对象,用RT-PCR法检测NF-κB家族成员RelB mRNA的表达水平;采用凝胶迁移实验及TransAMTMELISA法分析细胞核中RelB的活性;根据CLL细胞RelB活性将细胞分为RelB阳性（RelB＋）和RelB阴性（RelB-）两组,与人骨髓基质细胞共培养,分别加入氟达拉滨（10 μmol/L）、MG-132（1 μmol/L）和硼替佐米（1μmol/L）作用不同时间,采用碘化丙锭染色法分析药物对RelB＋和RelB-细胞死亡率的影响.结果 CLL细胞存在RelB mRNA表达及RelB活化,不同CLL细胞RelB mRNA表达水平及RelB活化水平不一.与骨髓基质细胞共培养时,三种药物均可促进细胞死亡,并具有时间依赖性.氟达拉滨对RelB＋和RelB-组CLL细胞的杀伤活性无明显差异,作用72 h后,两组CLL细胞死亡率分别为（61.11±6.91）％和（67.57±9.45）％;MG-132处理72 h对RelB＋细胞的杀伤活性高于RelB-组,两组细胞死亡率分别为（66.22±3.39）％和（51.07±5.93）％;硼替佐米处理24及48 h对RelB＋细胞杀伤活性高于RelB-组.24 h,两组细胞死亡率分别为（75.50±4.66）％和（66.32±10.20）％;48 h,死亡率分别为（92.11±3.14）％和（85.84±5.81）％.结论 骨髓来源CLL细胞中存在以RelB为代表的非经典性NF-κB活性.RelB活性增强可增加CLL细胞对蛋白酶体抑制剂硼替佐米和MG-132的敏感性,而对氟达拉滨的敏感性无明显影响.
- 徐晶晶周鹏孙爱宁国风
- 关键词：蛋白酶体抑制剂
- 非经典性NF—κB活性在慢性B淋巴细胞白血病中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨非经典性NF—κB信号通路在慢性B淋巴细胞白血病（B—CLL）中的作用。方法采用实时荧光定量RT-PCR法检测56例B—CLL初诊患者骨髓CD5＋CD19＋细胞（CLL—B细胞）NF-κB家族成员mRNA表达水平；采用TransAM^TM ELISA法定量分析CLL—B细胞核中NF-κB蛋白质复合物的活性成分；采用流式细胞术分析CLL—B细胞体外单独或与骨髓基质细胞（hBMSC）共培养后细胞死亡率；采用Westemblot法检测共培养对骨髓CLL-B细胞中NF-κB家族成员RelA和RelB蛋白水平表达的影响。结果CLL—B细胞的NF-κB家族成员RelA、p50、RelB和p52mRNA水平均高于正常B细胞，差异有统计学意义（P值均〈0．01）。所有标本中CLL—B细胞都存在RelA活化，而RelB只在部分标本中活性增强。CLL．B细胞核中平均RelA活性比正常B细胞显著增强，而平均RelB活性与正常B细胞相似。体外单独培养24、48和72h时，RelA＋／RelB组CLL．B细胞死亡率分别为（35．544-4．43）％、（50．92土8．44）％和（49．24士8．16）％；RelA＋／RelB＋组CLL—B细胞死亡率分别为（20．65±2．37）％、（18．17±1.36）％和（26．55±4．08）％。与hBMSC共培养，RelA＋／RelB一组CLL．B细胞死亡率较单独培养时下降，但相对于RelA＋／RelB＋组CLL—B细胞死亡率仍较高；共培养48h后，RelA＋／RelB-组CLL—B细胞中RelA和RelB显著上调，RelA＋／RelB＋组中CLL—B细胞质中RelA表达上调，RelB在胞质中显著下调并在胞核中轻度上调。结论骨髓CLL—B细胞中存在非经典性NF-κB的活化，RelB活化程度在不同的CLL—B细胞中差异显著；RelB和RelA活化共表达赋予骨髓CLL—B细胞存活优势，CLL—B细胞与hBMSC共培养，通过诱导CLL—B细胞中RelA和RelB的表达发挥对其体外存活的保护作用。
- 徐晶晶周鹏国风
- 关键词：骨髓基质细胞
