广西壮族自治区自然科学基金(2011GXNSFA018261)
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 相关作者：周素芳涂镇波李玲黄朋范升龙更多>>
- 相关机构：广西医科大学广西壮族自治区妇幼保健院桂林医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外周血中亲环素A mRNA的表达水平测定
- 2011年
- 目的探讨外周血中亲环素A(CyPA)mRNA表达水平与恶性肿瘤及非恶性肿瘤疾病的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)测定恶性肿瘤组、非恶性肿瘤组及对照组外周血中CyPA mRNA相对表达水平。结果外周血中CyPAmRNA相对表达水平从高到低依次为非恶性肿瘤组、恶性肿瘤组及对照组,非恶性肿瘤组与恶性肿瘤组比较差异无统计学意义(P>0.05),非恶性肿瘤组及恶性肿瘤组均高于对照组(P<0.05)。结论外周血中CyPA mRNA相对表达水平升高与疾病的发生发展有关。
- 蒋冬香陈刚郑海青张鹏涂镇波李玲周素芳
- 关键词：亲环素A恶性肿瘤实时荧光定量聚合酶链反应
- H2-Calponin蛋白在4种癌组织的表达及临床意义
- 2013年
- 目的探索肿瘤相关抗原H2-Calponin mRNA及其蛋白在肺癌、胃癌、鼻咽癌和肝癌中表达及其临床意义。方法用免疫组织化学和原位RT-PCR检测癌组织中H2-Calponin蛋白及其mRNA的表达分布和定位情况。结果H2-Calponin蛋白主要分布在胞质;在肺癌、胃癌、鼻咽癌和肝癌中阳性率分别为30.0%、27.5%、45.0%和51.8%,肝癌组织阳性率最高。H2-Calponin mRNA定位主要在细胞核周;H2-Calponin mRNA在肺癌、胃癌、鼻咽癌和肝癌中表达阳性率分别为17.5%、10.0%、20.0%和50.0%,在肝癌组织阳性率最高(P<0.05)。H2-Calponin在伴有转移的肝癌组织中的阳性表达率高于无转移的肝癌组织中的阳性表达率(P<0.05),但该蛋白在4种不同癌组织中的表达与患者的性别、年龄及癌组织的病理分级等因素无关。结论肝癌组织高表达H2-Calponin蛋白和mRNA,可能具有肝癌特异性且与肝癌是否伴有转移相关。
- 李玲涂镇波张永聪陶欢单安祺黎业源周素芳
- 关键词：肝癌免疫组织化学
- 肝癌相关抗原SMP30重组基因的构建、表达及分子伴侣共表达系统的探索被引量：3
- 2012年
- 旨在通过应用基因工程的方法构建、表达和纯化肝癌相关抗原SMP30,研究共表达分子伴侣提高基因工程蛋白表达的可溶性及效率。PCR扩增SMP30 cDNA序列,用基因工程技术构建重组表达质粒,转化E.coliBL21(DE3)pLysS宿主菌。表达蛋白经Ni-NTA亲和柱纯化获得HIS-SMP30融合蛋白;分别将4种表达不同分子伴侣的质粒(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pTf16)转入E.coliBL21(DE3)中;然后再将重组质粒转入含有分子伴侣质粒的细胞中,进行分子伴侣与重组质粒的共表达,SDS-PAGE检测目的蛋白的表达量与可溶性分析。经优化表达条件后,目的蛋白以包涵体形式表达,目的蛋白占总蛋白的60%以上;纯化后纯度高达95%以上;诱导共表达后,目的蛋白在上清含量极少,不到总表达目的蛋白的10%。成功构建出高效表达的SMP30重组质粒;加入到诱导表达体系中的4种分子伴侣质粒不能有效的促进可溶性蛋白的表达,pTf16共表达系统能增加目的蛋白表达量。
- 黄朋范升龙凌敏贺菽嘉周素芳
- 关键词：基因工程共表达
- Calponin家族在肿瘤转移过程中的作用
- 2013年
- 近几年Calponin家族在肿瘤的发生发展过程中的作用受到广泛关注，以往的研究着重在作为一种钙调节蛋白参与细胞的收缩作用方面，
- 涂镇波李玲冯安林周素芳
- 关键词：CALPONIN肿瘤转移家族
- 保温小室在组织芯片免疫组化中避免“边缘效应”的作用
- 2012年
- 目的探讨保温小室在组织芯片免疫组化中避免"边缘效应"的作用。方法采用常规免疫组化SP两步法,实验分为两组,一组采用保温小室,另一组采用免疫组化PAP笔,同时改良抗体滴加方法。结果 40例肺癌组织芯片采用保温小室,32例肝癌组织芯片、各40例胃癌及鼻咽癌组织芯片使用免疫组化PAP笔,分别计算边缘组织和中央组织平均光密度值。经统计发现不论是采用保温小室或免疫组化PAP笔,4种组织切片边缘与中央部位平均光密度值相比,差异无统计学意义。结论采用保温小室较免疫组化PAP笔更为简单易行,在组织芯片免疫组化染色时避免"边缘效应"方面保温小室可取代免疫组化PAP笔。
- 涂镇波李玲冯安林黄朋李晓龙周素芳
- 关键词：组织芯片免疫组化
- 肝癌相关抗原H2-calponin基因重组质粒的构建与表达
- 2012年
- 目的应用基因工程的方法构建H2-calponin(CNN2)基因工程表达质粒,体外表达、分离、纯化CNN2蛋白。方法以PCR扩增CNN2cDNA序列,用基因工程技术将CNN2基因重组到表达质粒pColdⅢ中,转化BL21(DE3)pLysS宿主菌,以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamideg elelectrophoresis,SDS-PAGE)检测目的蛋白的表达情况,优化表达条件,以较大体积培养基因工程菌,菌体经超声波破菌后,过Ni-NTA亲和柱纯化,Western-blot检测表达纯化的融合蛋白。结果转化有pColdⅢ-CNN2重组质粒的基因工程菌能诱导表达CNN2蛋白,表达的目的蛋白占总菌体蛋白的35%;SDS-PAGE检测发现菌体上清液和沉淀物中均有目的蛋白片段,证实部分CNN2蛋白以可溶性形式表达;Western-blot检测结果提示表达纯化的蛋白能与抗CNN2抗体发生反应。结论成功构建出表达可溶性CNN2蛋白的重组质粒,诱导表达的蛋白具有CNN2免疫原性。
- 范升龙黄朋涂镇波李玲张胜昌陆巧巧赵赫周素芳
- 关键词：肝肿瘤基因工程纯化
