国家自然科学基金(30960296)
- 作品数：20 被引量：52H指数：5
- 相关作者：文春根胡宝庆谢彦海吴丹陶志英更多>>
- 相关机构：南昌大学江西省水产科学研究所南昌益生生物技术有限公司更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 中华圆田螺血细胞的分类和吞噬活性被引量：4
- 2011年
- 血细胞作为主要的免疫效应细胞在贝类的免疫和防御中有重要作用。本文通过相差显微镜和透射电子显微镜对中华圆田螺(Viviparus chinensis)血细胞的形态与类型以及血细胞对枯草芽孢杆菌的吞噬观察。结果发现壳高4～6 cm的田螺血细胞浓度为(2.17±0.38)×106个/mL。根据血细胞大小,形态和胞质内颗粒的有无可以将血细胞分为颗粒细胞、无颗粒细胞、透明细胞、淋巴样细胞四种类型。Wrighte-Giemsa染色显示,颗粒细胞表现为嗜酸性,其余3类细胞均呈现嗜碱性。另外,通过对颗粒细胞形态的连续观察,发现透明细胞可能是颗粒细胞脱颗粒而形成的衰老细胞。血细胞对枯草芽孢杆菌的吞噬实验结果表明,颗粒细胞吞噬杆菌活性最强,吞噬率和吞噬指数分别是47.73%和1.44,其次无颗粒细胞,吞噬率和吞噬指数分别是30.44%和1.12,透明细胞和淋巴样细胞无吞噬活性。
- 裴鹏祖胡宝庆谢彦海文春根
- 关键词：中华圆田螺血细胞
- 褶纹冠蚌(Cristaria plicata)热休克蛋白70的原核表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2014年
- 构建褶纹冠蚌热休克蛋白70基因的原核表达质粒pET30a-cpHSP70,并经酶切和DAN测序鉴定。将其转入到表达宿主BL21(DE3)菌中,用IPTG诱导表达,最后用SDS-PAGE和Western-blot检测。结果显示:新表达的重组蛋白分子量约为74kD。在IPTG的诱导下,其表达量随时间的增加而增加,最适表达条件是37℃诱导8h。表达蛋白可溶性分析发现,一部分蛋白以不溶性的包涵体形式存在,一部分蛋白以可溶性蛋白形式存在。Westernblot检测显示蚌在35℃热激诱导1h后,其血、鳃、肌肉、肝胰腺和外套膜组织cpHSP70蛋白表达水平相对于蚌在20℃暂养3h后的表达量明显升高。
- 谢彦海俞泽溪文春根胡宝庆
- 关键词：褶纹冠蚌热休克蛋白70原核表达多克隆抗体
- 新棘衣棘头虫及黄鳝组织酯酶同工酶分析被引量：1
- 2010年
- 采用不连续聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳分析新棘衣棘头虫和黄鳝的肌肉、肝胰脏、肠道、脾脏、性腺、肾脏及心脏7种组织。电泳结果表明酯酶在黄鳝各组织及新棘衣棘头虫中均有表达,并且具有明显的特异性。肌肉组织仅3条酶带,比其它组织的特异性较明显;肝胰脏组织酯酶活性最强,有12条酶带;脾脏与肾脏组织相似性最高;除肠组织外,其它6个组织均有g酶带,且活性一样强,推测g酶带为黄鳝组织EST酶谱的基础带。肠组织只有2条弱酶带,可能是由于黄鳝的肠组织受到损伤引起。新棘衣棘头虫的两条酶带a和i,这两条酶带在黄鳝的其它组织中也出现,由联合系数和聚类分析发现肠道和棘头虫的酯酶特异性最小,推测黄鳝和新棘衣棘头虫之间可能存在协同进化的关系。
- 邓利荣胡宝庆谢彦海文春根龚贵如
- 关键词：黄鳝酯酶同工酶协同进化
- 褶纹冠蚌热休克蛋白HSP70基因的克隆及表达研究被引量：3
- 2011年
- 运用兼并引物结合RT-PCR方法从褶纹冠蚌(Cristaria plicata)血细胞中克隆出热休克蛋白70(HSP70)的cDNA序列。用半定量PCR方法研究了HSP70mRNA在褶纹冠蚌不同组织的表达情况。结果表明:HSP70cDNA全长为2 664bp,5’非编码区364个核苷酸,3’非编码区383个核苷酸,开放阅读框为1 917bp,编码638个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白理论等电点为5.61,分子量为70.3kD。HSP70基因不含内含子。氨基酸序列分析发现,推导的氨基酸序列含有HSP70家族的3个标签序列(I10DLGTTYS17,V198FDLGGGTFDVSIL211和V336VLVGGSTRIPKV QK350)。氨基酸序列同源性比较显示HSP70与紫贻贝(Mytihcs galloprovincialis)和美洲牡蛎(Crassostrea virginica)氨基酸序列同源性分别为79.47%和77%。半定量PCR分析显示在正常褶纹冠蚌血液、外套膜、鳃、闭壳肌和肝胰腺5种组织中均能检测到HSP70的基因表达。经过热休克或病原菌刺激后,蚌各组织中HSP70mRNA的表达显著增加,其中热休克处理后,蚌的鳃和血液中HSP70mRNA表达量增加最为显著;而嗜水气单胞菌刺激后蚌的肌肉和鳃组织中HSP70mRNA表达量增加最明显。
- 谢彦海胡宝庆文春根
- 关键词：嗜水气单胞菌
- 氯苯和乙腈混合液对褶纹冠蚌抗氧化因子活性的影响
- 2014年
- 将褶纹冠蚌暴露于氯苯和乙腈的等浓度混合液中,测定了毒物对蚌的血清和肝胰脏抗氧化酶活性。结果表明,血清中SOD的活性先抑制后诱导,肝胰脏中SOD的活性均被诱导;血清中GSH-PX活性在0.1和1mg·L-1浓度组中先被诱导再被抑制,肝胰脏中0.1mg·L-1浓度组先抑制后诱导;血清和肝胰脏中H2O2酶都被诱导;血清中GSH含量上升,肝胰脏中0.1和1mg·L-1浓度组中GSH含量上升,10mg·L-1浓度组中GSH含量一直下降;血清中MDA含量在0.1和1mg·L-1浓度组中被抑制,10mg·L-1浓度组中被诱导后恢复到对照组水平,肝胰脏中各浓度组中持续被诱导。并且低浓度组比高浓度组对污染物的抗氧化作用敏感。褶纹冠蚌肝胰脏中GSH含量可以用来指示生态环境中氯苯和乙腈的污染。
- 戴文娟曾明玉胡宝庆文春根
- 关键词：褶纹冠蚌氯苯乙腈活性
- 中华鳖“红脖子病”组织病理观察、病原鉴定及药敏试验被引量：4
- 2017年
- 对患"红脖子病"中华鳖(Trionyx Sinensis)的咽喉、肝、肺和肠组织进行石蜡切片观察,发现4种组织皆有不同程度的损伤,其中肝和肺最严重。从病鳖肺、肠和血液中共分离到3株优势菌株,DNA测序鉴定表明,2株为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),1株为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)。利用二倍稀释法检测嗜水气单胞菌对10种抗生素的最小抑菌浓度(MIC),结果表明,盐酸左氧氟沙星、硫酸庆大霉素、强力霉素、氟苯尼考和诺氟沙星对该菌的MIC分别为1.6、1.6、6.4、12.8和12.8μg·mL^(-1),其余5种抗生素抑菌效果不明显。利用牛津杯法对抑菌效果明显的5种抗生素进行体外药敏试验,结果显示,5种抗生素的抑菌敏感度由低到高依次为诺氟沙星、氟苯尼考、强力霉素、盐酸左氧氟沙星和硫酸庆大霉素,浓度依次为128、64、32、16和8μg·mL^(-1)。
- 薛俊敬张飞阳钢简少卿胡宝庆文春根
- 关键词：中华鳖红脖子病嗜水气单胞菌蜡样芽胞杆菌
- 利用相差显微镜和流式细胞术分析褶纹冠蚌血细胞类型被引量：5
- 2010年
- 利用相差显微镜对褶纹冠蚌的血细胞进行了观察,结果发现颗粒细胞和无颗粒细胞两大类。颗粒细胞还可以根据细胞和颗粒的大小分为大颗粒细胞和小颗粒细胞,无颗粒细胞也可以根据细胞的大小和细胞的核质比分为透明细胞和淋巴样细胞。另外,利用流式细胞仪进一步分析了褶纹冠蚌血细胞的类群。通过测试前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)两个参数,分别代表细胞的大小和细胞的颗粒度,绘制双参数(SSC×FSC)点图和等高图,FSC和SSC单参数直方图,得出褶纹冠蚌血细胞可以分为两大群,即颗粒细胞(A)和无颗粒细胞(B)两种类型,其中颗粒细胞群可以划为两个亚群,即大颗粒细胞(A1)和小颗粒细胞(A2),无颗粒细胞群也可以划为两个亚群,即透明细胞(B2)和淋巴样细胞(B1)。在四种血细胞中,小颗粒细胞和透明细胞是主要的细胞类群,分别占血细胞总数的56.54%和35.90%,而大颗粒细胞和淋巴样细胞数量较少,分别为4.57%和2.99%。
- 谢彦海胡宝庆文春根
- 关键词：褶纹冠蚌血细胞相差显微镜流式细胞仪
- 褶纹冠蚌alpha2巨球蛋白基因的分子克隆与序列分析被引量：5
- 2010年
- alpha2巨球蛋白（α2M）是一类广谱的蛋白酶抑制因子,存在于许多无脊椎或脊椎动物的血浆中[1]。它不仅可以与机体内过量的蛋白酶相结合产生α2M-蛋白酶复合物,清除血液中流动的蛋白酶[2],还能与细菌内毒素脂多糖,
- 胡宝庆谢彦海代功园文春根
- 关键词：褶纹冠蚌基因克隆
- 鄱阳湖黄鳝体内鳗鲡独孤吸虫季节动态与种群分布被引量：3
- 2010年
- 通过对鄱阳湖黄鳝体内鳗鲡独孤吸虫感染情况的调查,结果发现在799尾黄鳝中,有101尾黄鳝的消化道中发现有吸虫感染,感染率为12.64%,丰盛度为3.33±1.71。不同月份之间黄鳝体内鳗鲡孤独吸虫的感染率存在显著的差异(G=144.968>x02.005=18.548,df=6,P<0.005);其中5月份的感染率与丰盛度最高,分别为31.48%和6.41±4.29。1,2月份没有吸虫寄生。不同体长组黄鳝体内吸虫的感染率存在极显著性差异;其中21.0 cm以下的黄鳝未检出鳗鲡独孤吸虫,60 cm以上的黄鳝感染率最高。吸虫感染与未感染黄鳝之间的肥满度没有显著的差异。另外,用的比值衡量与负二项分布拟合证明吸虫在黄鳝消化道内呈聚集分布。
- 杨细兰林刚胡宝庆文春根龚贵如
- 关键词：黄鳝种群分布鄱阳湖
- 生物有机肥对浮游植物种群演替的影响被引量：3
- 2013年
- 通过在水体中施用生物有机肥,观察水体中浮游植物群落的变化。结果共观察到浮游植物8门93属185种。叶绿素a的含量和生物密度随着施肥量的增加呈上升趋势,充氧与不充氧组之间差异不显著(P>0.05);当施肥量为0.24g.L-1,水温25℃时,叶绿素a含量最高,为119.24ug.L-1,并且生物密度最大,为5.15×107 cells/L;充氧施肥量为0.06g.L-1时,生物密度达到最大,为3.81×107 cells/L;不充氧施肥量达0.48g.L-1时,生物密度达到最大,为3.97×107 cells/L;充氧与不充氧组之间没有显著的差异(P>0.05)。施肥前多样性指数为2.08,施肥量至0.24g.L-1时,充氧条件下多样性指数最高,为2.69;水温25℃时,多样性指数最高,为2.74。未施肥时,只有肘状针杆藻和硬弓形藻2个优势种,而施肥后先后共出现17个优势种;其中绿藻门,蓝藻门中的最多,绿藻门有7个,蓝藻门有6个;施肥量相同时,充氧组的优势种数量明显多于不充氧组;黄藻门和隐藻门的种类只有在充氧条件下才成为优势种。当施肥量恒定为0.24g.L-1时,不同温度下先后共出现12个优势种,其中绿藻门,蓝藻门中的优势种最多,均有5个优势种;随温度上升,优势种的数量逐渐减少。
- 陶志英熊宗辉刘大伟文春根胡宝庆万会平
- 关键词：生物有机肥浮游植物优势种演替
