国家科技支撑计划(2006BAD0806-01)
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
- 相关作者:丛斌董辉柳晓利钱海涛张柱亭更多>>
- 相关机构:沈阳农业大学更多>>
- 发文基金:辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省高校重点实验室支持计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 单头赤眼蜂DNA提取方法比较及其PCR反应体系优化被引量:8
- 2011年
- 为了探明有效的基因组DNA提取方法和PCR反应体系,从而得到符合分子生物学实验要求的基因组DNA模板的数量和质量,以单头松毛虫赤眼蜂为材料,应用CTAB法、SDS法和Chelex法进行基因组DNA提取效果的比较,并将核酸助沉剂用于赤眼蜂DNA的提取中,然后将提取的基因组DNA采用L16(45)正交设计试验,对影响赤眼蜂基因组DNA PCR反应体系的5因素(Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、DNA模板、Taq聚合酶)4水平进行筛选。结果表明:CTAB法优于SDS法和Chelex法,且核酸助沉剂的加入明显增强了模板DNA提取效果。同时确立的ITS2的PCR优化反应体系为:总体积为25mL,Mg2+浓度为1.50mM,dNTPs浓度为0.25mM,引物浓度为0.30μM,DNA模板取2.00μL,Taq聚合酶量为2.00U。
- 柳晓利董辉丛斌张柱亭冮爽
- 关键词:赤眼蜂DNA提取正交设计
- SSCP技术检测松毛虫赤眼蜂mtDNA编码区SNPs的可行性研究被引量:1
- 2013年
- SNPs标记是最具广泛利用潜力的第3代遗传标记,本研究旨在了解SSCP技术检测松毛虫赤眼蜂Trichogramma dentrolimi mtDNA编码区SNPs的灵敏度和精确度,建立大规模筛查SNPs的技术平台。结果表明,运用SSCP技术检测40个松毛虫赤眼蜂样本,单倍型检出率达100%。Cytb和COⅡ基因SNPs的平均密度分别为19SNPs/kb和16 SNPs/kb。SSCP技术操作简单、成本低廉、结果直观、易于分型,适于松毛虫赤眼蜂线粒体编码区未知SNPs的检测,建立了基于SSCP技术检测松毛虫赤眼蜂mtDNA SNPs的技术平台。
- 董辉谢丽娜钱海涛丛斌王宏侠
- 关键词:松毛虫赤眼蜂SSCP线粒体DNA
- SNPs分子标记技术在昆虫学研究中的应用被引量:3
- 2011年
- 单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)主要是指在染色体基因组水平上由于单个核苷酸的变异而引起的DNA序列多态性,包括单碱基的转换或颠换引起的点突变,其中最少出现1种等位基因频率不小于1%,常以双等位基因的形式出现,稳定而可靠。在目前的昆虫基因组研究中,SNPs标记的研究主要集中在果蝇、蚊媒、家蚕等一些模式生物。本文对SNPs标记在昆虫的种类鉴定、遗传图谱构建、种群遗传学、抗药性分子机理等方面进行了综述,最后展望了SNPs在种群遗传、标记辅助选择和生物进化等研究领域中的应用前景。
- 董辉钱海涛柳晓利丛斌
- 关键词:单核苷酸多态性昆虫学DNA