北京市科技计划项目(Z0006321000191)
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
- 相关作者:陈小玲梁之昶季海峰周宏专章振华更多>>
- 相关机构:江西生物科技职业学院北京华大吉比爱生物技术有限公司首都师范大学更多>>
- 发文基金:北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 用于检测仔猪致病菌的23S rRNA基因芯片的研制被引量:3
- 2010年
- 以副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、肠道沙门氏菌、猪链球菌等12种仔猪致病菌为目标细菌,23SrRNA基因为靶基因,从GenBank中下载其23SrDNA全序列,在其变异区设计特异性探针,在保守区设计通用引物。通过序列分析、PCR靶标与探针杂交试验,建立了有13条寡核苷酸探针和2对通用引物的仔猪常见致病菌基因芯片检测方法。以参考菌株粗提基因组DNA的10倍系列稀释模板做PCR,扩增产物与探针杂交,检出芯片的灵敏度为100fg。对33个参考菌株用芯片检测,结果有1例不正确,只鉴定到属;在61个野外分离株中,55株的芯片检测结果与生化或测序结果一致,有6例不一致,符合率为90%。初步研究证明,该检测方法能快速、有效地鉴定多种仔猪常见致病菌,但要区分某些细菌的致病株与非致病株,还要检测毒力/毒素基因。
- 伍诚意曹峰子梁之昶章振华杨兵周宏专季海峰陈小玲
- 关键词:仔猪致病菌RRNA基因寡核苷酸探针