博士科研启动基金(D2007-1)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：周恩民闻晓波李晓娟李树东王密更多>>
- 相关机构：黑龙江八一农垦大学更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪圆环病毒2型ORF3基因的原核表达被引量：4
- 2010年
- 用原核表达系统表达猪圆环病毒2型ORF3基因,分析ORF3蛋白的抗原性。根据GenBank上公布的猪圆环病毒2型(PCV-2)核苷酸序列进行分析,针对ORF3基因设计并合成1对特异性引物,PCR扩增该基因,并将此片段克隆入原核表达载体pET-32a(+)上,命名为pET32a-ORF3,转化大肠杆菌Rosetta-blue(DE3)pLacⅠ感受态细胞,1.0mmol/L IPTG37℃诱导表达。结果表明,PCR扩增得到315bp的片段,重组蛋白大小约为29ku,与预期大小相符。Western blotting分析结果表明,重组蛋白能与抗His-tag的单克隆抗体反应,不与PCV-2阳性血清发生反应。猪圆环病毒2型ORF3基因能在大肠杆菌中成功表达,但与阳性血清之间没有反应原性,为进一步研究PCV-2ORF3蛋白的功能及特性奠定基础。
- 冉旭华李树东闻晓波王密杨焕民倪宏波侯喜林朴范泽邵磊李晓娟李冬野周恩民
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF3基因原核表达
