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植物脂质转移蛋白被引量：16: 2008年; 脂质转移蛋白(lipid transfer proteins,LTPs)是植物生命活动中一类重要的活性蛋白质,在体外能够可逆地结合和转运多种脂质分子。目前已从多种植物中分离到LTPs基因。随着研究的深入,其不同水平的转录本在不同植物的不同发育阶段和生理条件下的不同组织中被发现,但LTPs体内确切的生理、生化功能和作用机制尚不明确。现介绍目前这一领域细胞与分子生物学方面的研究进展,并结合本课题组的研究结果进行了相关探讨,为进一步研究LTPs在植物生殖发育、抗性和防御反应及信号转导中的作用机制提供了新的线索。; 田爱梅曹家树; 关键词：基因表达生物学功能

白菜雄性不育相关基因BcMF15启动子的克隆、序列分析及植物表达载体的构建: 研究目的:启动子是调控基因表达的关键元件,启动子的克隆对于构建基因工程载体,调控目的基因的时空表达有着重要的意义。材料与方法:启动子的克隆:以白菜 Brassicarapa ssp.chinensis 基因组 DNA 为...; 田爱梅曹家树; 文献传递

白菜多聚半乳糖醛酸酶基因BcMF6的克隆、序列分析及其表达被引量：8: 2007年; 从白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis Makino)核隐性不育两用系‘Bajh97-01A/B’可育株中分离得到的一个cDNA-AFLP差异片段入手,利用RACE技术成功克隆了一个花粉特异的多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因BcMF6的DNA和cDNA全长序列,并对其序列进行了分析。结果表明,该基因包含4个外显子和3个内含子,最大开放阅读框为1194bp,编码397个氨基酸序列,对推导的氨基酸序列进行分析,1到22个氨基酸是1信号肽序列,其后有4个平行β螺旋重复(PbH1)结构,该序列包含3个N-糖基化位点,4个蛋白激酶c磷酸化位点,5个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,10个N-豆蔻酰化位点,1个PG活性位点(227RVTCGPGHGIS.IGS240)等。将BcMF6基因氨基酸序列与数据库中的其他PGs基因进行同源序列比对,构建系统进化树,发现该基因具有所有PGs基因特有的4个保守结构域,并且与花粉中特异表达的PG基因聚为一类,表明该基因是与花粉发育相关的多聚半乳糖醛酸酶基因。RT-PCR对其表达的研究表明,该基因在可育株(野生型)的中大蕾、开放花和短角果中特异表达,进一步表明该多聚半乳糖醛酸酶基因与白菜的花粉发育相关。; 张强黄鹂曹家树; 关键词：白菜花粉发育多聚半乳糖醛酸酶克隆

紫菜薹快速碱化因子基因BcMF14p的序列与表达分析被引量：7: 2008年; 快速碱化因子是近年来新发现的一种植物多肽类信号分子。根据已知的普通白菜两用系中可育株系特异表达的快速碱化因子基因BcMF14序列,在其编码框两侧设计引物,从紫菜薹中克隆出该类信号分子基因,命名为BcMF14p(登陆号:EF523517),全长273 bp,不含内含子,编码框包含222个核苷酸,编码73个氨基酸。NCBI在线同源比对结果表明该基因属于快速碱化因子家族,与花椰菜、拟南芥等的快速碱化因子核苷酸序列相似性达到86%以上。对该信号分子的表达进行RT-PCR分析,结果显示BcMF14p只在紫菜薹花蕾、花、角果等生殖器管中表达,在茎、叶等营养器官中不表达,说明BcMF14p可能参与紫菜薹生殖发育过程中的信号传导。; 李焰焰曹家树; 关键词：紫菜薹

BcA9启动子调控的反义BcMF12对白菜基因沉默的效果被引量：3: 2008年; 【目的】探讨花药绒毡层特异启动子BcA9调控的反义BcMF12基因对白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis,syn.B.rapaL.ssp.chinensis)基因沉默的效果,明确其对花粉发育的影响。【方法】在从白菜花蕾cDNA中克隆BcMF12基因的保守区段的基础上,将白菜花药特异表达启动子BcA9与反义BcMF12基因融合,构建反义表达载体,并经农杆菌介导导入到白菜基因组中,利用抗生素筛选和分子检测筛选出转基因植株。【结果】PCR和Southern检测结果表明,BcA9启动子驱动的反义BcMF12-GUS报告基因已整合到白菜基因组中;Northern杂交显示转基因植株花蕾和花中的BcMF12在mRNA水平的表达明显受到抑制,而且花粉萌发率显著下降。【结论】BcA9调控的反义BcMF12基因明显抑制了BcMF12的表达,从而影响白菜花粉的发育。; 宋江华朱熠鹏余小林向珣曹家树; 关键词：白菜反义RNA GUS活性

BcMF16的反义基因植物表达载体的构建及其对菜心的遗传转化: 白菜(Brassica rapa L.ssp.chinensis,syn B.campestris ssp.chinensis)是典型的异花授粉作物,具有明显杂种优势。BcMF16是本实验室前期克隆的一个仅在花粉和绒毡层...; 张爱红曹家树; 关键词：多聚半乳糖醛酸酶; 文献传递

白菜花药特异基因BcACT的克隆与表达分析被引量：1: 2009年; 根据GenBank数据库中已发布的肌动蛋白基因序列设计全长扩增引物,分别从白菜混合花蕾cDNA和叶片基因组DNA中克隆到各自的全长,其基因命名为BcACT,并利用RT-PCR技术研究该基因在白菜3个材料的不同器官以及保持系花蕾各部位的表达模式.结果表明:BcACT的DNA全长为1704bp,具有3个内含子,编码区长度为1134bp,编码377个氨基酸;基因表达结果显示,BcACT基因在保持系Bcajh97-01B和Polima不育系Bcpol97-05A的花蕾中表达,但表达模式存在差异,而在Ogura不育系Bcogu97-06A中未检测到;此外,BcACT基因的表达具有花药特异性,并且在花药发育过程中上调表达.; 蒋明曹家树; 关键词：白菜雄性不育肌动蛋白基因

农杆菌介导的芥蓝遗传转化体系的建立被引量：9: 2007年; 采用正交旋转设计方法对影响芥蓝遗传转化体系的因素进行了优化研究,结果表明:影响芥蓝KanR苗率的最主要因素是Kan浓度,而预培养时间和共培养时间是芥蓝遗传转化的主要影响因素。最利于芥蓝遗传转化的操作程序为:将芥蓝无菌苗下胚轴在预培养基上预培养2天后,在LBA4404菌液中感染8min,置于共培养培养基上培养2天,随后把外植体转入含Kan的选择分化培养基上诱导不定芽,28天转瓶一次,当抗性幼苗长至2～3cm时,齐愈伤组织处切下幼苗在生根培养基上诱导不定根,25天左右后等不定根长成即可开瓶炼苗,继而移栽至营养土中,正常管理至开花结果;经PCR、Southern印迹检测,证明CYP86MF基因已经整合至转基因植株染色体中。; 黄科叶纨芝余小林向珣卢钢曹家树; 关键词：芥蓝遗传转化体系正交旋转组合设计

白菜花药特异基因BcPRO的克隆及表达分析被引量：2: 2008年; 根据基因数据库已有的Profilin 4序列设计简并引物,在白菜花蕾cDNA中成功克隆到前纤维蛋白基因,命名为BcPRO,在基因库中的登陆号为EF492988.BcPRO基因编码区由405个核苷酸组成,编码134个氨基酸,推导的氨基酸序列与甘蓝型油菜和拟南芥的花粉前纤维蛋白分别有95%和92%的同源性.RT-PCR表明,BcPRO基因仅在保持系的Ⅲ级、Ⅳ级和Ⅴ级花蕾及Polima雄性不育系的Ⅲ级和Ⅳ级花蕾中表达,并且表达量逐级增大,而在莲座叶、花茎叶、茎、根及Ogura雄性不育系的所有部位均未能检测到.进一步研究发现,BcPRO基因在花药中表达,在萼片、花丝、雌蕊、花瓣等部位均未见表达.这些实验结果表明,BcPRO基因为花药特异基因,可能在花粉发育过程中起着重要作用,并且在相同核背景下,有着不同的细胞核-细胞质互作模式.文中还就不同植物花粉前纤维蛋白氨基酸序列进行了比对、分析.; 蒋明曹家树; 关键词：白菜雄性不育

植物SET蛋白被引量：5: 2007年; SET蛋白是一类包含保守的SET结构域、与组蛋白甲基化密切相关的蛋白质。组蛋白修饰作为调控基因表达的重要因素,在植物体基因转录调控中发挥关键的作用。有关SET蛋白的研究为深入了解组蛋白修饰的机制提供了重要信息。植物SET蛋白具有保守的结构特征及进化机制,参与众多细胞核内的反应过程,如染色体的浓缩和分离,基因的转录,以及DNA的复制和修复等,调控植物基因的表达,影响植物体的发育。; 宋江华曹家树; 关键词：组蛋白密码甲基化基因表达

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