河南省教育厅自然科学基金(2011A230016)
- 作品数：5 被引量：32H指数：3
- 相关作者：赵丽宁豫昌赵绪永马辉更多>>
- 相关机构：郑州牧业工程高等专科学校河南农业大学更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 作物连做障碍中酚酸类物质的生物降解研究被引量：12
- 2011年
- 为了有效解决作物连做障碍中酚酸类物质的危害问题,探索了黄孢原毛平革菌所分泌的胞外酶系对酚酸类物质香草酸、阿魏酸和对羟基苯甲酸的降解功能。选用黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium)与香草酸、阿魏酸、对羟基苯甲酸等酚酸类物质共同培养3天后,用高效液相色谱技术检测其含量。结果表明,3种酚酸平均降解率分别为98.39%、97.88%和58.20%,其降解效果均达极其显著水平。该研究结果,将为今后在农业生产中有效利用该菌进行农作物连做障碍治理和改善土壤环境,提供了理论依据。
- 李华玮赵绪永李鹏坤
- 关键词：黄孢原毛平革菌酚酸生物降解连作障碍
- 多重实时定量PCR快速检测PRRSV、CSFV和PCV2混合感染方法的建立被引量：7
- 2013年
- 根据TaqMan复合荧光探针设计原则,应用Primer 5.0和Oligo 6.0软件设计检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的特异性引物和探针,优化反应条件,建立了检测PRRSV、CSFV和PCV2的单项和多重Real-time PCR方法。结果表明,建立的方法具有高度特异性,与其他病原检测无明显交叉反应;对阳性质粒和病毒的最低检测量分别为<101个拷贝和<1TCID50/反应,检测灵敏度比常规PCR检测高100倍。通过对20份临床样本进行检测,多重Real-time PCR检测结果和单项Real-time PCR检测结果一致。建立的多重Real-time PCR方法可用于同时快速检测PRRSV、CSF和PCV2的混合感染,具有灵敏、特异、重复性好并能对样品进行定量检测等优点。
- 赵绪永宁豫昌赵丽马辉
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒猪圆环病毒2型
- 猪主要繁殖障碍疾病病原的多重实时定量PCR快速检测被引量：1
- 2012年
- 本研究旨在建立多重Real-time PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)。根据GenBank数据库中PRRSV、PCV2、PRV、和PPV的核苷酸序列设计特异性引物和探针,通过优化反应条件,检测系列稀释的纯化阳性质粒,建立检测PRRSV、PCV2、PRV和PPV的单项和多重Real-time PCR方法。灵敏度和特异性试验结果表明,无论是单项和多重Real-timePCR检测,该方法都具有高度特异性,与其它病原检测无明显交叉反应;对4种病毒的最低检测量为<101拷贝或1TCID50,检测灵敏度比常规PCR高100倍。对40份临床样本进行检测,多重Real-time PCR检测结果和单项Real-time PCR检测结果完全一致。建立的同时检测PRRSV、PCV2、PRV和PPV的多重Real-time PCR方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能对样品进行定量检测等优点。
- 赵绪永赵丽宁豫昌马辉
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型猪伪狂犬病毒猪细小病毒
- 胶体金免疫层析法检测猪瘟(强弱毒区分)抗体研究被引量：9
- 2012年
- 以原核表达的重组猪瘟病毒E2蛋白为弱毒抗原,以猪瘟病毒（HCV）强毒株细胞培养物为强毒抗原,利用胶体金标记技术国内首次建立了HCV抗体检测（强弱毒区分）的免疫层析试纸条（双抗原夹心法）。研究结果表明,检测时只需将80μL待检测猪血清加于加样端20 min后观察结果即可。若观察区上端仅1条红色条带,即为HCV抗体阴性;2~3条条带即为HCV抗体阳性;若出现2条条带的位置为观察区上端和中间部位,即为HCV弱毒抗体阳性;若出现2条条带的位置位于观察区上端和下端部位,则为HCV强毒抗体阳性;若出现3条条带则HCV强弱毒抗体均为阳性。本试纸可很好地避免因试验操作造成的假阳性、假阴性,且操作简单、快速、简便、灵敏度高、特异好、不需特殊设备、价格低廉,20 min即可判断结果,且可区分强弱毒感染,适于基层实验室和现场检测。
- 李华玮郑鸣
- 关键词：胶体金免疫层析
- 3种猪繁殖障碍性病毒Real-time PCR快速检测方法的建立被引量：3
- 2012年
- 【目的】建立可同时检测猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的多重实时荧光定量PCR方法。【方法】根据GenBank数据库中PRV、PPV和PCV2的核苷酸序列,设计3对特异性引物和探针,以10倍系列稀释的阳性质粒为模板,优化反应条件,建立检测PRV、PPV和PCV2的多重Real-time PCR方法,并对其敏感性、重复性和特异性进行检验;分别采用单项和多重Real-time PCR方法,对临床收集的42份疑似病料进行检测,比较2种方法的符合率。【结果】特异性和灵敏度试验表明,建立的多重Real-time PCR检测方法具有高度特异性,与其他病原无明显交叉反应;检测灵敏度高,可检出1.0×101拷贝/μL的阳性质粒或1TCID50/mL的病毒样品。用多重Real-time PCR对42份临床疑似病料进行检测,其检测结果与单重Real-time PCR结果完全一致,表明多重Real-time PCR方法是可行的。【结论】建立了可同时检测PRV、PPV和PCV2的多重Real-time PCR方法,该法具有快速、灵敏、特异和重复性好等优点。
- 赵绪永马辉宁豫昌赵丽
- 关键词：猪伪狂犬病毒猪细小病毒
