江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金(RC2007089)
- 作品数：8 被引量：18H指数：3
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- 白藜三醇对缺氧状态下人脐静脉内皮细胞增殖及HIF—1α表达的影响
- 2013年
- 摘要：目的研究白藜三醇（resveratrol，Res）对缺氧状态下人脐静脉内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcell，HUVEC）增殖及低氧诱导因子（hypoxia-induciblefactor1，HIF-1μ）表达的影响。方法自藜三醇预孵育HUVEC2h后，采用氯化钴（CoCl2）化学方法制作缺氧模型，实验分为3组进行：正常组（NC）、缺氧组（HY）、药物组（0．1、1、5、10、50μmoL／LRes）。应用CCK-8法检测各组HUVEC增殖情况，免疫细胞化学法和Westernblot检测各组细胞内HIF-1α的表达。结果①缺氧组及药物组（0．1、1、5、10μmol/L）与正常组相比细胞增殖增加（P〈0．01）；1、5μmoL／L药物组与缺氧组比较细胞增殖增加（P〈0．01），5μm0L／L药物组与其他各浓度组比较细胞增殖增加（P〈0．01）。②正常组HUVEC胞质内HIF-1α 仅微量表达；缺氧组胞质内HIF-1α阳性表达，较正常组增多，显色呈黄褐色；药物组（5μmol／L）胞质内HIF-1α强阳性表达，显色呈深黄褐色。③缺氧组与正常组相比HIF-1α 蛋白表达增加（P〈0．05），药物组（1、5μmol／L）与正常组相比HIF-1α蛋白表达增加（P〈0．01）；1μmol／L药物组与缺氧组相比HIF-1α蛋白表达增加（P〈0．05），5μmol／L药物组明显增加（P〈0．01）。结论白藜三醇可能通过促进HIF-1α 的表达而促进血管内皮细胞增殖，从而对新生血管的形成起到一定促进作用。
- 杨雪张超群徐晤张卓琦程明月王志荣
- 关键词：白藜三醇人脐静脉内皮细胞增殖
- 夹竹桃麻素对快速起搏离体兔心脏氧化应激损伤的保护作用被引量：1
- 2013年
- 目的研究还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶抑制剂夹竹桃麻素（APO）对快速起搏离体兔心脏氧化应激损伤的保护作用。方法采用离体兔心脏Langendorff灌注装置建立快速起掉右心房实验模型，离体兔心脏24只随机分成正常对照组、快速起搏组（RAP）和夹竹桃麻素预处理组（APO），每组8只。正常对照组用K—H液灌注离体兔心脏80min；RAP组离体灌流30min，电极快速起搏右心房50min；APO纰用夹竹桃麻素预处理30min，快速起搏50min。所有组灌流结束后，留取心房肌组织。H—E染色检测心房肌病理变化，免疫组化和Westernblot检测心房肌组织中蛋白表达并测定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的变化。结果①正常对照组心肌细胞排列整齐，结构正常；RAP组心肌细胞排列紊乱，大量心肌细胞溶解；APO组心肌细胞排列较RAP组整齐，可见部分心肌细胞溶解；②与正常对照组比，RAP组心房肌钙激活蛋白酶calpainl表达增加（P〈0．05），SOD蛋白和肌钙蛋白T（cTnT）表达减少（P〈0．05）；与RAP组比，APO组心房肌calpainl蛋白表达减少（P〈0．05），SOD蛋白和cTnT蛋白表达均增加（P〈0．05）；③与正常组比，RAP组心房肌MDA水平明显增加（P〈0．05），SOD水平明显减少（P〈0．05）；与RAP组比，APO组心房肌MDA水平减少（P〈0．05），SOD水平增加（P〈0．05）。结论夹竹桃麻素可以通过抑制氧化应激，减轻快速起搏离体兔心房导致的心肌氧化应激损伤。
- 胡晓芹孙红王志荣张卓琦张超群程明月
- 关键词：氧化应激快速起搏
- 白藜三醇对房颤所致猪心房组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的 研究白藜三醇对心房纤颤（简称房颤）猪心房组织基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）蛋白表达的影响,探讨白藜三醇抗心肌纤维化作用及可能机制.方法 18只小家猪通过起搏器植入法建立猪房颤模型,随机分为3组（每组6只）：对照组、房颤组、白藜三醇干预组（2.5 mg·kg^-1·d^-1）.苏木精-伊红染色、Masson染色法观察心房组织形态学和间质纤维化,Western blotting法检测心房组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平.结果 与对照组相比,房颤组MMP-1、MMP-9显著增加（P＜0.05）,而TIMP-1则显著降低（P＜0.05）;与房颤组相比,白藜三醇干预组MMP-1、MMP-9显著降低（P＜0.05）,而TIMP-1则显著增加（P＜0.05）.结论 白藜三醇可能通过调节心肌组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达而发挥抗心肌纤维化的作用.
- 王燕张超群徐晤张卓琦王志荣
- 关键词：心房纤颤心肌纤维化白藜三醇基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶抑制剂
- 快速心房起搏引起猪心房颤动时心房结构的变化及替米沙坦的预防作用被引量：3
- 2012年
- 目的建立猪实验性心房颤动(atrial fibrillation,AF)模型,观察心房结构重构的变化和替米沙坦(TMST)干预的作用,测定血管紧张素转化酶2(ACE2)和胶原蛋白-Ⅰ的变化。方法将18头猪按随机数字表分为对照组(NC组)、快速心房起搏组(RAP组)、RAP+TMST组。闭胸法建立猪的持续性AF模型,超声测量实验前、后心室收缩末期左、右心房面积(LAESA、RAESA)变化;应用程序刺激检测AF的诱发率和持续时间;通过伊红(HE)染色、Masson染色和蛋白印迹法(Western blot)检测ACE2和胶原蛋白-Ⅰ的变化。结果与RAP组相比,RAP+TMST组LAESA、RAESA扩大减轻,AF诱发率降低、持续时间缩短,胶原蛋白-Ⅰ减少,而ACE2表达明显增加。RAESA与胶原蛋白-Ⅰ呈正相关关系(r1=0.956,P<0.01),RAESE与ACE2、ACE2与胶原蛋白-Ⅰ均呈负相关关系(r2=-0.966,r3=-0.948,P<0.01)。结论猪AF模型心房肌出现结构重构的病理表现,ACE2表达失衡与AF结构重构密切相关;TMST可降低AF的发生率及持续时间,明显改善心房结构重构。
- 徐晤王志荣李思召张超群李飞周召峰张卓琦
- 关键词：心房颤动心房重构肽基二肽酶A替米沙坦
- 猪实验性心房颤动模型心房重构及替米沙坦干预的影响被引量：4
- 2013年
- 目的:观察猪实验性心房颤动时心房结构重构的变化和替米沙坦干预的影响以及血管紧张素转换酶2(ACE2)、胶原蛋白-I的变化。方法:18只猪随机分为正常对照组、快速起搏组和替米沙坦组,每组6只。闭胸法建立猪的持续性心房颤动模型,超声测量实验前、后心室收缩末期左、右心房的面积(LAESA、RAESA)变化;应用程序刺激检测心房颤动的诱发率和持续时间;通过苏木素伊红染色、马松染色和蛋白质印迹法检测ACE2和胶原蛋白-I的变化。结果:与快速起搏组相比,替米沙坦组LAESA、RAESA扩大减轻,心房颤动诱发率降低、持续时间缩短,胶原蛋白-I减少(P<0.05),而ACE2含量明显增加(P<0.05)。RAESA与胶原蛋白-I呈正相关(r=0.956,P<0.01),RAESA与ACE2、ACE2与胶原蛋白-I均呈负相关(r=-0.966,r=-0.948,P<0.01),差异均有统计学意义。结论:猪心房颤动模型心房肌出现结构重构的病理表现,ACE2表达失衡与心房颤动结构重构密切相关;替米沙坦可降低心房颤动的发生率及持续时间,明显改善心房结构重构。
- 徐晤王志荣李思召张超群李飞周召峰张卓琦
- 关键词：心房颤动心房重构血管紧张素转换酶2替米沙坦
- 替米沙坦对猪心动过速性心肌病心肌细胞Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白的影响
- 2012年
- 目的 研究替米沙坦对猪心动过速性心肌病（tachycardiomyopathy,TCM）心肌细胞Fas/FasL、Fas相关死亡结构域（Fas-associated death domain,FADD）、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白的影响,探讨替米沙坦对心肌细胞的保护作用及其作用机制.方法 18头家猪随机分为3组（每组n=6）：快速右心房起搏组（TCM组）,实验猪植入永久起搏器,起搏频率500次/min;快速右心房起搏加替米沙坦组（TCM＋TS组）,起搏器植入前3天至起搏2周后,每日给予替米沙坦（1.5 mg·kg-1·d-1）混于饲料中喂服;对照组,实验猪未植入起搏器也未服药.每周记录1次心电图,实验前后经胸心脏超声观测猪左心室舒张末期内径（LVEDD）和左心室射血分数（LVEF）.2周后处死动物,取左心室组织,Western blot技术检测Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白含量,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测fas、caspase-3 mRNA转录水平.结果 TCM组较对照组左心室心肌细胞Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白表达量均明显增高（P〈0.05）,TCM＋TS组较TCM组Fas/FasL、FADD、Bcl-2/Bax、caspase-3蛋白表达量均明显降低（P〈0.05）.TCM组较对照组左心室心肌细胞fas及caspase-3 mRNA表达明显增高（P〈0.05）,TCM＋TS组较TCM组fas及caspase-3 mRNA表达明显降低（P〈0.05）.Fas与caspase-3蛋白表达呈明显正相关（r=0.987,P〈0.01）;fas与caspase-3 mRNA表达呈明显正相关（r=0.950,P〈0.01）.结论 替米沙坦通过抑制Fas/FasL通路相关蛋白的表达,进而减少细胞凋亡,延缓TCM病情进展.
- 郑俊晨陆远张卓琦徐晤郝湛军张辉王志荣
- 关键词：心动过速性心肌病替米沙坦FAS/FASLBCL-2/BAX
- 白藜三醇对人脐静脉内皮细胞增殖及NO表达的影响
- 2014年
- 目的观察白藜三醇对正常状态下人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HU—VECs）磷酸化蛋白激酶B（P—Akt）、磷酸化内皮型一氧化氮合酶（P-NOS）及一氧化氮（NO）表达的调节作用，探讨白藜三醇对HUVECs增殖的影响及可能机制。方法实验分组：DMEM高糖（〈4．5mg／L）培养基培养组（正常组）、白藜三醇组（分为0．2、1、5、10、20μmol／L5个剂量亚组）、白藜三醇＋LY294002组、LY294002组（阻断剂组）。其中LY294002为磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，P13-K）抑制剂。应用CCK-8法检测细胞增殖情况；Westernblot检测各组细胞内蛋白激酶B（Akt）、P—Akt、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、P-eNOS蛋白的表达；硝酸还原酶法检测细胞培养液中NO的浓度。结果①白藜三醇组1、5μmol／L2个剂量亚组与正常组相比细胞增殖增加（P〈0．01），5μmol／L亚组与0．2、10、20μmol／L亚组相比细胞增殖增加（P〈0．01）；白藜三醇20μmol／L对细胞增殖有抑制作用（P〈0．01）。②与对照组比较，白藜三醇组P-Akt（P〈0．01）、P-eNOS（P〈0．05）蛋白表达增加；与白藜三醇组比较，白藜三醇＋LY294002组P-Akt、P-eNOS蛋白表达降低（P〈0．01）。③与对照组比较，白藜三醇组NO表达增加（P〈0．05）；与白藜三醇组比较，白藜三醇＋LY294002组NO表达降低（P〈0．01）。结论白藜三醇可能通过P13-K／Akt／eNOS信号通路诱导正常状态下内皮细胞NO表达的增加，从而促进内皮细胞增殖。
- 史彤彤程明月张超群张卓琦王志荣
- 关键词：白藜三醇人脐静脉内皮细胞一氧化氮增殖
- 阿托伐他汀通过SIRT1/NADPH氧化酶对抗高糖诱导的人脐静脉内皮细胞的氧化损伤作用被引量：7
- 2014年
- 目的:探讨阿托伐他汀(atorvastatin,Atv)通过SIRT2沉默信息调节因子家族成员之一的SIRT1/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的作用。方法:人脐静脉内皮细胞株低糖(5.6 mmol/L)培养贴壁后随机分为正常组、渗透压对照组、高糖组、高糖+(0.1、1.0、10.0μmol/L)阿托伐他汀组、高糖+SIRT1抑制剂(sirtinol)组及高糖+NOX4抑制剂(apocynin)组,继续培养24 h后应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)的水平,蛋白免疫印迹法检测细胞中SIRTl及NADPH氧化酶4(NOX4)的蛋白水平。结果:1与正常组相比,高糖各组细胞增殖减低,阿托伐他汀组均可改善高糖对HUVECs增值的抑制作用,呈浓度依赖性。2高糖环境下,细胞内ROS水平显著增加,NADPH氧化酶4的蛋白表达显著上调,SIRTl的蛋白表达明显降低。3阿托伐他汀可以上调高糖环境下SIRTl的表达,降低ROS、NADPH氧化酶4的表达,具有浓度依赖性。4高糖环境下,SIRTl抑制剂sirtinol可以降低SIRTl的表达,增加NADPH氧化酶4的表达,NADPH氧化酶4抑制剂apocynin可降低NADPH氧化酶4的表达,但对SIRT1的表达无明显影响。结论:阿托伐他汀可以对抗高糖诱导的HUVECs的氧化损伤,其可能的机制与升高内皮细胞SIRT1的表达有关,且SIRT1在NADPH氧化酶的上游发挥对抗高糖诱导的氧化损伤作用。
- 曹娜葛力萁程明月张卓琦王志荣
- 关键词：高糖阿托伐他汀人脐静脉内皮细胞SIRT1NADPH氧化酶
