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JWA基因启动子-76G→C多态性和膀胱癌易感性关系的配对研究被引量：4: 2005年; 目的检测JWA启动子单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),探讨其对基因转录活性的影响和与膀胱癌遗传易感性的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性和DNA测序的方法,检测了155例膀胱癌病例和155例非肿瘤对照人群的JWA基因启动子多态性位点;构建启动子多态性片段氯霉素乙酰转移酶报告基因重组质粒,瞬时转染NIH-3T3细胞,检测启动子多态性片段对基因转录活性的影响。结果检测到一个新SNP-76G→C;C等位基因和GC基因型频率在膀胱癌病例组为10·00%、20.00%,比正常对照组(5.16%、10.32%)高,差异有统计学意义(P<0.05);与GG基因型相比,GC基因型启动子的转录活性显著降低(P<0.01)。Logistic多元回归分析结果(P<0.05,OR=2.05)显示这一多态性可能是形成膀胱癌新的独立危险因素。结论JWA基因启动子-76G→C多态性可能影响JWA基因转录和表达,从而增加膀胱癌易感性。; 吴为李春平陈瑞曹兴江李爱萍王玉杨克虎钱立新刘起展李芝兰周建伟; 关键词：JWA基因膀胱癌聚合酶链反应-单链构象多态性

JWA基因在HL-60细胞定向分化中的表达及意义被引量：5: 2005年; 为了研究JWA基因在HL60细胞定向分化中的表达规律,探讨其在白血病细胞分化和凋亡中的意义及可能的作用机制,应用FCM检测HL60细胞经ATRA(10-6mol/L)、AraC(10ng/ml)、TPA(10-8mol/L)作用后2、4、6、8天CD13、CD14、CD15、CD11b改变及细胞周期变化;应用半定量RT-PCR及蛋白印迹技术检测JWA基因在HL60细胞定向分化中的表达趋势以及相关凋亡因子Bcl2、HSP27和HSP70的表达。结果表明:经上述药物分别处理HL60细胞后,不同时段FCM相关指标检测结果证明其分别向粒、单核、巨噬细胞样分化。JWA基因表达呈时间依赖性升高;Bcl2则呈时间依赖性下降;HSP70在ATRA及TPA组与JWA表达呈正相关,与Bcl2呈负相关,而各组HSP27并无表达。ATRA处理HL60细胞后JWA基因表达趋势与原代细胞相反,且不需要ATRA诱导分化作为前提。分别以AraC10ng/ml和AraC20ng/ml处理HL60细胞后,JWA基因的表达呈反向变化,即前者呈时间依赖性增加,而后者则下降。结论:JWA基因在实现ATRA及TPA诱导白血病细胞分化和凋亡中可能具有双重调节作用;JWA基因表达的高低与AraC诱导分化作用及细胞毒作用有关;HL60细胞与原代白血病细胞在诱导分化机制方面可能不尽相同。; 沈群周建伟盛瑞兰朱光荣曹海霞陆化; 关键词：JWA基因 HL-60细胞 ARA-C TPA 定向分化

JWA基因通过NFI结合位点特异性应答氧化应激所致的DNA损伤: ＜正＞目的众多研究已证明氧化应激造成的DNA损伤与多种重要疾病包括癌症的发生有关。JWA基因不仅与多种化学药物诱导白血病细胞定向分化有关,且可活跃地应答多种环境因素的刺激,如热休克、氧化应激等,JWA 可能是一个新的重要...; 周建伟; 关键词：JWA 氧化应激信号转导; 文献传递

JWA在N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍诱导的人支气管上皮细胞凋亡中的作用被引量：5: 2006年; 目的探讨JWA在化学致突变物烷化剂N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导人支气管上皮(HBE)细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Western blot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检测JWA基因近端启动子的结合蛋白。结果MNNG处理HBE细胞24 h均可诱导细胞发生凋亡,并呈现明显的剂量-效应关系；MNNG诱导HBE细胞凋亡过程中伴随着JWA蛋白表达升高。进一步用2．0μg/ml MNNG处理HBE细胞24h后,用Southwestern方法从HBE细胞核蛋白中检测出一与JWA近端启动子能特异性结合的转录因子。结论MNNG激活HBE细胞中核转录因子与JWA近端启动子结合后可能激活了细胞内凋亡的信号通路。; 徐艳琼李爱萍陈瑞周建伟; 关键词：细胞凋亡烷化剂转录因子

氯化高铁血红素和热应激对JWA基因表达的影响被引量：2: 2006年; 目的探讨JWA基因在氯化高铁血红素(hemin)和热应激单独或联合作用下的表达规律。方法用Western blot方法检测JWA蛋白表达；用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测JWA mRNA表达变化；用氯霉素乙酰转移酶-酶联免疫吸附试验(CAT-ELISA)方法检测hemin和热应激对JWA基因近端启动子转录活性的影响。结果50μmol/L hemin处理K 562细胞1周可使JWA蛋白表达增高(3,23±0．57)倍；而30μmol/L hemin处理K 562细胞48 h可使JWA mRNA表达增加(1．37±0．06)倍。42℃处理K 562细胞2 h可使JWA蛋白表达增高(8．00±1．73)倍；42℃处理K 562细胞30 min可使JWA mRNA表达明显升高(1．87±0．13)倍。hemin和热应激联合作用于K 562细胞后,JWA蛋白和mRNA的表达均低于单独处理。CAT-ELISA结果显示hemin及热应激单独处理可上调各自反应元件的应答,但二者联合作用后反应元件的应答似乎呈现一种部分拮抗的作用。结论hemin和热应激可能分别通过JWA近端启动子上各自的反应元件而调节JWA基因的表达。; 赵明陈瑞李爱萍周建伟; 关键词：氯化血红素热应激基因表达

JWA编码区PKC磷酸化位点突变对佛波酯诱导MCF-7细胞分化的影响被引量：2: 2007年; 目的探讨JWA蛋白PKC磷酸化位点对TPA诱导的MCF-7细胞分化的影响。方法利用连续PCR引入点突变技术构建JWA编码区PKC磷酸化位点1、2以及两位点同时突变的三种pEGFP-N1载体,脂质体稳定转染获得相应的三种MCF-7细胞株,油红O染色观察细胞分化状态。结果20μmol/L TPA处理MCF-7-N1(稳定转染pEGFP-N1载体的MCF-7细胞)、MCF-7-JWA(稳定转染pEGFP-N1-JWA载体的MCF-7细胞)、MCF-7-JWA-1、MCF-7-JWA-2、MCF-7-JWA-1+2细胞2d后,油红O染色阳性细胞百分比分别为48%、67%、69%、67%、70%。与MCF-7-N1相比,TPA诱导MCF-7- JWA、MCF-7-JWA-1、MCF-7-JWA-2、MCF-7-JWA-1+2细胞分化率(油红O染色阳性细胞百分比)显著升高(P<0.05),但MCF-7-JWA、MCF-7-JWA-1、MCF-7-JWA-2、MCF-7-JWA-1+2细胞分化率,差异无统计学意义(P>0.05)。结论稳定转染JWA能增强TPA诱导的MCF-7细胞分化;JWA编码区PKC磷酸化位点突变并不影响TPA诱导MCF-7细胞分化,可能存在其他的分子机制。; 叶健李爱萍秋雯周进红周建伟; 关键词：JWA PKC 细胞分化

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国家自然科学基金(30471430)