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CXCR4阳性Lewis肺癌细胞具有促发新生血管形成的特征被引量：5: 2009年; 目的研究CXCR4阳性Lewis肺癌细胞(LLC)在新生血管形成时的始动作用。方法激光共聚焦检测LLC细胞系中CXCR4抗原表达情况,观察小鼠移植瘤组织内CXCR4阳性LLC与新生血管的毗邻关系;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志,检测CXCR4阳性和阴性LLC中VEGF、MMP9 mRNA表达情况,同时免疫组化检测两亚群细胞移植瘤中VEGF、MMP9以及CD31表达情况。结果CXCR4阳性LLC多毗邻内皮细胞,周围形成血管样结构;CXCR4阳性LLC的VEGF mR-NA表达(0.439 8±0.059)明显高于CXCR4阴性LLC(0.289 9±0.003 1)(P<0.01);CXCR4阳性LLC的MMP9 mRNA表达(0.622 3±0.013 6)明显高于CXCR4阴性LLC(0.579 2±0.017 4)(P<0.05);CXCR4阳性LLC移植瘤组织MVD(56.87±4.83)明显高于CXCR4阴性LLC移植瘤(43.52±4.91)(P<0.01)。结论LLC中的CXCR4阳性亚群具有更强上调VEGF、MMP9表达的能力,具有促发新生血管形成的特征。; 辇伟奇陈芳琳敖绪军陈正堂; 关键词：LEWIS肺癌细胞 CXCR4 新生血管形成

CXCR4阳性Lewis肺癌细胞耐药实验研究: 2009年; 目的研究CXCR4阳性Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC)原发性耐药机制。方法激光共聚焦检测小鼠移植瘤组织内CXCR4阳性LLC;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志,应用CCK-8法检测CXCR4阳性和阴性LLC对顺铂的敏感性,RT-PCR检测两者ABCG2、IGF1RmRNA表达情况。结果小鼠移植瘤组织内散在分布胞膜呈红色荧光的CXCR4阳性LLC;CXCR4阳性与阴性LLC比较,具有更强的增顺铂抗拒性(P<0.05);CXCR4阳性LLC的ABCG2mRNA表达(0.5240±0.0078)明显高于CXCR4阴性LLC(0.3870±0.0066),相差显著(P<0.01);CXCR4阳性LLC的IGF1RmRNA表达(0.4209±0.0074)明显高于CXCR4阴性LLC(0.1848±0.0066),相差显著(P<0.01)。结论Lewis肺癌细胞中的CXCR4阳性亚群具有更强上调ABCG2、IGF1R表达的能力,具有顺铂抗拒性。; 辇伟奇敖绪军陈芳琳陈正堂; 关键词：LEWIS肺癌细胞 CXCR4 耐药机制

miR-223通过作用CDK2及ERK信号通路参与Lewis肺癌细胞周期调控: 2011年; 目的研究miR-223对Lewis肺癌细胞(LLC)周期调控作用及其分子机制。方法将miR-223真核表达载体转染至LLC细胞中,应用流式细胞仪检测其细胞周期分布变化,实时定量PCR、western blot检测对CDK2表达和ERK信号通路的影响。结果流式细胞周期检测显示miR-223过表达导致G0/G1细胞由53.8%减少到45.3%,G2细胞由4.29%增加到13.2%;实时定量PCR及western blot显示,miR-223过表达抑制CDK2 mRNA及蛋白表达,并下调ERK信号通路。结论 miR-223通过作用CDK2及ERK通路参与Lewis肺癌细胞周期调控。; 辇伟奇陈芳琳韩克强陈正堂; 关键词：CDK2 ERK信号通路细胞周期 LEWIS肺癌细胞

miR-223在CXCR4^+ Lewis肺癌细胞中的显著低表达及其靶基因预测被引量：2: 2009年; 目的分析miR-146a、miR-206、miR-223、let-7c-1等细胞分化相关miRNAs,在小鼠Lewis肺癌细胞株(theLewis lung cancer cell lines,LLC)CXCR4+与CXCR4-亚群间的差异表达。方法免疫磁珠分选CXCR4+和CXCR4-LLC细胞,Trizol法抽提细胞总RNA,实时荧光定量PCR(TaqMan探针)检测miRNAs表达,对表达差异最为显著的miRNAs进行潜在靶基因预测,应用免疫组化方法初步分析具有研究价值的关键分子在两个不同亚群小鼠种植瘤组织中的表达情况,并通过BLAST对其3′非翻译端(untranslated region,UTR)进行直向同源基因序列比对分析。结果CXCR4+与CXCR4-LLC比较,各检测mirna表达均较低,其中以miR-223差异最为显著(Fold Change=8.26),通过软件分析预测,miR-223与IGF1R、IGFBP5、Pik3cb、ELK-1和E2F1等基因均具有可能靶位点,免疫组化检测发现CXCR4+亚群种植瘤组织IGF1R表达显著高于CXCR4-亚群,IGF1R3′UTR的238～244nt和688～695nt两个结合位点具有高度的进化保守性。结论miR-223在CXCR4+LLC中显著低表达,可能与肺腺癌细胞IGF1R信号通路调控有关。; 辇伟奇陈芳琳敖绪军陈正堂; 关键词：CXCR4 LEWIS肺癌细胞

CXCR4阳性Lewis肺癌细胞的高致瘤性和高转移潜能被引量：1: 2010年; 目的从小鼠肺腺癌细胞株(lewis lung carcinoma,LLC)中分离并鉴定具有高转移潜能的肿瘤干细胞样细胞亚群。方法流式分析Sca1、CXCR4双阳性细胞比例,激光共聚焦检测小鼠肺癌组织中双阳性细胞表达情况;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志,检测分选前后细胞活性,观察分析CXCR4阳性亚群的恶性生物学行为。结果LLC细胞中Sca-1、CXCR4双阳性细胞比例为0.1%,CXCR4阳性细胞为0.18%,小鼠肺癌组织存在荧光双染色细胞;分选前细胞活性为(95.58±0.87)%,分选后活力为(94.96±0.76)%(P>0.05);CXCR4阳性亚群在无血清中呈球状生长,CXCR阴性亚群1×105即不可成瘤,CXCR4阳性亚群在7×103仍可成瘤;CXCR4阴性和阳性亚群分别以5×105、2×104密度各接种3只小鼠,前者无转移,而后者2只发生肺转移,1只发生耳转移。结论Lewis肺癌细胞中的CXCR4阳性亚群具有一定的自我更新和转移能力,具备癌转移性干细胞某些特性。; 辇伟奇敖绪军陈芳琳陈正堂; 关键词：肿瘤干细胞

系统生物学方法筛选人肺巨细胞癌细胞株转移相关miRNA的研究: 2012年; 目的:探讨人低转移肺巨细胞癌细胞株95C和人高转移肺巨细胞癌细胞株95D中微小RNA(microRNA,miR-NA)的差异性表达,分析差异表达miRNA在肺癌细胞转移调控网络中的作用。方法:常规培养95C和95D,分别提取总RNA并进行质检;应用微阵列芯片检测miRNAs的表达,并对其表达谱进行差异性分析;从系统生物学角度,应用生物信息学的研究方法,分析肺癌转移可能相关的异常表达miRNA与相应靶基因。结果:两者miRNA表达存在显著差异,与95C细胞相比,在95D中上调>1.5倍的miRNA有36条,下调>1.5倍的miRNA有19条;12条差异表达miR-NA及1 046个预测靶基因构成了肺癌转移相关调控网络。结论:获得了人低转移肺巨细胞癌细胞株95C和人高转移肺巨细胞癌细胞株95D的差异miRNA表达谱,初步构建了一个由差异miRNA及其靶基因组成的复杂肺癌转移相关调控网络,分析发现部分miRNA为调控网络的关键节点。; 辇伟奇陈锐陈芳琳张琨琨王东林; 关键词：肺肿瘤微小RNA 系统生物学

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国家自然科学基金(30901790)