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壳聚糖酶的分离纯化及性质研究被引量：1: 2013年; 利用芽孢杆菌(Bacillus sp.)Yg菌株发酵产壳聚糖酶,采用分段醇析法分离纯化发酵产物,通过不连续SDS-PAGE法测定壳聚糖酶相对分子质量。结果表明,发酵产物先用体积分数40%的乙醇初步醇析,离心去除沉淀,而后加乙醇至体积分数为60%再次醇析,所得沉淀冷冻干燥即为壳聚糖酶,所得酶的回收率和纯度均较高。所得壳聚糖酶的相对分子质量约为41.7 ku,最适反应温度为45℃,最佳反应pH为5.5。该酶在4℃条件下保存稳定性较好,在65℃及以上温度下短时间内即全部失活。; 袁建平侯晓强; 关键词：壳聚糖酶发酵纯化酶活力稳定性

国家自然科学基金资助菌根研究项目情况分析: 2015年; 菌根(Mycorrhiza)是土壤中的真菌与植物根系形成的一种共生体。国家自然科学基金资助项目能基本反映某一学科基础研究的动态及趋势。现从项目概况及所涉及的二级学科、依托单位、项目主持人和菌根项目研究内容等方面对1997—2014年国家自然科学基金资助的菌根项目情况进行分析。结果表明:国家自然科学基金资助的菌根项目数量及所涉及的经费总体呈上升趋势,特别是2009—2012年上升幅度最大;立项项目以生命科学部为主,尤以生态学和林学学科为主要领域,研究热点为AM菌根和外生菌根;项目依托单位以高等院校为主体,其中中国农业大学承担项目14项,项目数最多;所有项目主持人中,约1/5的负责人获得了2次及2次以上项目资助。研究结果对分析国内菌根的基础研究水平具有重大的意义,同时对菌根科研人员今后项目申报有一定的参考价值。; 付亚娟侯晓强; 关键词：国家自然科学基金菌根

珍稀濒危药用植物大花杓兰的研究现状被引量：4: 2015年; 大花杓兰是珍稀濒危药用植物,大花杓兰资源的保护和再生引起了国内外学者的广泛关注。为及时把握大花杓兰的研究现状和最新研究成果,以1997—2014年国内外关于大花杓兰的研究论文为基础,对其基础生物学、繁殖生物学、授粉生物学、植物菌根共生机制、濒危机制、保护策略等方面的研究成果进行总结与分析。; 付亚娟乔洁侯晓强; 关键词：大花杓兰人工繁殖

大花杓兰根际与非根际土壤真菌多样性的高通量测序分析被引量：17: 2019年; 采用Illumina Miseq高通量测序技术对大花杓兰根际与非根际土壤真菌群落组成进行对比分析。结果表明,大花杓兰根际土壤获得63 780条Clean tags,非根际土壤获得48 094条Clean tags。基于≥97%的相似度水平,通过聚类共获得1 223个OTUs,根际和非根际土壤真菌OTUs数量分别为1 004和945,二者共有726个OTUs。Chao1和Shannon指数揭示根际土壤真菌群落在丰富度和多样性上均高于其非根际土壤。与非根际土壤相比,在门、纲、目、科和属分类水平上丰度显著增加的根际土壤真菌类群分别为担子菌门(Basidiomycota)、伞菌纲(Agaricomycetes)、伞菌目(Agaricales)和鸡油菌目(Cantharellales)、小菇科(Mycen-aceae)和角担菌科(Ceratobasidiaceae)、小菇属(Mycena)和角担菌属(Ceratobasidium)。首次从分子水平上揭示大花杓兰根际与非根际土壤真菌群落的多样性对大花杓兰的保育具有重要意义。; 付亚娟张江丽张江丽; 关键词：大花杓兰根际土壤非根际土壤真菌多样性

大花杓兰根际土壤真菌及兰科菌根真菌多样性分析被引量：10: 2019年; 【目的】从分子水平上对兰科杓兰属大花杓兰根际土壤真菌群落组成及潜在兰科菌根真菌进行初步研究。【方法】采用克隆文库技术对大花杓兰根际土壤真菌的ITS片段进行PCR扩增、克隆测序及BLAST分析。【结果】共获得96个真菌克隆,其中44个克隆鉴定为未知真菌,52个真菌克隆基于97%的序列相似性被划分为24个操作分类单元(Operational Taxonomic Unit, OTU),属于5门6纲11目16科15属。被孢霉属Mortierella为大花杓兰根际土壤的主要真菌类群。综合兰科植物菌根真菌的研究报道,对24个OUTs进一步分析,发现4个OTUs为潜在的兰科菌根真菌,分别属于角担菌科Ceratobasidiaceae的丝核菌属Rhizoctonia(OTU1)和角担菌属Ceratobasidium(OTU2)及胶膜菌科Tulasnellaceae(OTU3和OTU4)。【结论】根际土壤真菌及潜在兰科菌根真菌类群的构成及多样性研究,对从土壤中分离筛选有效的大花杓兰菌根真菌及其野生种群的迁地保育均具有重要意义。; 付亚娟张剑张剑侯晓强; 关键词：大花杓兰根际土壤真菌多样性菌根真菌

壳聚糖酶的分离纯化及性质研究被引量：2: 2013年; 目的：分离纯化由Yg菌株生产的壳聚糖酶并对其性质进行研究。方法：分段醇析法分离纯化壳聚糖酶；不连续SDS—PAGE电泳法测定其相对分子质量；对其最适反应温度、pH值以及其热稳定性进行研究。结果：壳聚糖酶相对分子质量为41．7ku，最适反应温度为45℃，最佳反应pH为5．0～5．5。该酶4℃保存稳定性较好，65℃以上短时间内可以导致酶活性丧失。结论：分离纯化得到壳聚糖酶并对其性质进行了初步研究，为壳聚糖酶制剂的生产提供了理论依据。; 袁建平侯晓强; 关键词：壳聚糖酶纯化

固定化技术在壳聚糖酶生产中的应用被引量：2: 2013年; 以产酶活性与产酶稳定性为指标评价3种固定化细胞产壳聚糖酶(Chitosanase,EC3.2.1.99)方法,以酶比活力、酶结合效率、酶活力回收率及稳定性评价4种固定化壳聚糖酶方法,以筛选最优固定化方案应用于壳聚糖酶的生产。结果表明,海藻酸钠壳聚糖包埋法固定化细胞的产壳聚糖酶活性较高且稳定性好;海藻酸钠壳聚糖吸附包埋固定化壳聚糖酶的酶比活力、酶结合效率与酶活力回收率均为最高,且稳定性强。; 袁建平侯晓强; 关键词：壳聚糖海藻酸钠

铁皮石斛亲环蛋白基因DoCyP的克隆及表达分析被引量：5: 2020年; 采用RT-PCR技术克隆了铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)亲环蛋白基因(DoCyP),其大小为522 bp,编码173个氨基酸。生物信息学预测,DoCyP相对分子质量18.25 kD,理论等电点8.72,含肽脯氨酰顺反异构酶保守结构域,无跨膜结构域,是稳定的亲水性蛋白质。SOPMA预测DoCyP的二级结构主要由无规卷曲和延伸链构成。系统进化树揭示铁皮石斛DoCyP与深圳拟兰CyP聚为一支,亲缘关系较近。qRT-PCR分析表明,DoCyP在铁皮石斛组织中为组成型表达,在根中表达量最高,叶和茎中表达量较低。4℃胁迫12h,DoCyP在铁皮石斛根和茎中表现为上调表达,在叶中下调表达。推测DoCyP参与铁皮石斛对低温胁迫的应答。; 付亚娟陈霞婷乔洁乔洁李文静王晶; 关键词：铁皮石斛亲环蛋白 QRT-PCR 低温胁迫

20种石斛属植物根解剖结构特征与种间分类研究被引量：7: 2014年; 目的分析20种石斛属植物根的解剖结构特征,探讨石斛属种间分类的特征性根解剖结构。方法采用石蜡切片法制作石斛属植物根的横切片,显微观察根解剖结构特征,比较种间根解剖结构的差异。结果石斛属植物种间根解剖结构特征存在差异,根被最内层细胞壁V状加厚、纤维体、外皮层加厚形式、内皮层细胞形状、髓结构、中柱与皮层比例等特征可作为20种石斛属植物种间区分的依据。结论根的特征性解剖结构可用于石斛属植物的辅助鉴别。; 侯晓强郭顺星; 关键词：石斛

大花杓兰亲环素基因(CmCyP)的克隆及生物信息学分析被引量：1: 2019年; 亲环素是一个多基因家族,在植物生命活动中发挥着重要的作用。该研究以大花杓兰(Cypripedium macranthum)为材料,采用RT-PCR技术克隆到1个亲环素基因(CyP),并对其进行生物信息学分析。结果表明:大花杓兰CyP基因的开放阅读框序列为525 bp,命名为CmCyP(GenBank登录号为MH411125),编码174个氨基酸。预测CmCyP蛋白是一个位于细胞质、相对分子量约为18 kD、理论pI为8.73、无信号肽、跨膜结构域的亲水性蛋白质。磷酸化和糖基化位点预测分析发现,CmCyP蛋白存在18个潜在的磷酸化位点和2个潜在的糖基化位点。蛋白保守结构域预测分析发现,CmCyP蛋白包含一个高度保守的肽脯氨酰顺反异构酶结构域,属于单结构域亲环素。对二级结构进行预测分析发现,CmCyP蛋白中存在无规卷曲70个、延伸链56个、α-螺旋23个、β-折叠25个,这4种结构元件在三级结构中也有体现。系统进化树结果显示,大花杓兰CmCyP蛋白与铁皮石斛(Dendrobium catenatum)和万带兰(Vanda hybrid cultivar)的CyP蛋白的亲缘关系较近。该研究首次克隆了大花杓兰亲环素基因(CmCyP),为进一步探讨CmCyP基因的生物学功能奠定了基础。; 付亚娟张剑张剑侯晓强; 关键词：大花杓兰 RT-PCR 基因克隆系统发育树

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国家自然科学基金(31100314)

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