解放军总医院科技创新基金(06ZY31)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
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- 结核分枝杆菌Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂的治疗作用
- 2014年
- 目的 研究结核分枝杆菌Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂对结核的治疗作用.方法 用结核分枝杆菌H37Rv通过尾静脉注射60只BALB/c小鼠,分别用生理盐水、利福平、草分枝杆菌F.U.36注射液、佐剂77-1、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂治疗.免疫结束后2周杀鼠,观察肺和脾病理改变,称取重量,做菌落计数.结果 肺组织病理显示：生理盐水组肺组织病变严重、广泛,佐剂组比生理盐水组病变略轻,病变仍较重、广泛,草分枝杆菌F.U.36注射液组、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗组、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂组肺组织病变减轻、局限,3/5区域肺泡结构完整、清晰,利福平组肺组织无病变.与生理盐水组比较,利福平组、草分枝杆菌F.U.36注射液组、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂组肺脏菌落数分别减少2.11 log、0.76 log和0.57 log;肝脏菌落数分别减少2.11 log、0.74 log和0.44 log（t＞3.21,P＜0.01）.结论 Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂对小鼠结核病具有较好的治疗效果,与草分枝杆菌F.U.36注射液相当.
- 梁艳吴雪琼阳幼荣张俊仙
- 关键词：结核分枝杆菌AG85AAG85B
- 结核分枝杆菌Rv2190c DNA疫苗的构建及免疫原性研究
- 目的构建结核分枝杆菌Rv2190c DNA疫苗,并评价其免疫原性。方法以基因H_(37)Rv基因组为模板,PCR扩增Rv2190c基因,插入pGEM-T载体中,经酶切鉴定与序列测定证实后,再与真核表达载体pVAX1连接,...
- 梁艳张晓燕白雪娟肖漓高钰张俊仙阳幼荣王兰史迎昌吴雪琼
- 关键词：DNA疫苗AG85A免疫原性
- 文献传递
- 结核分枝杆菌重组Ag85A、Ag85B蛋白免疫原性的研究被引量：3
- 2011年
- 目的研究结核分枝杆菌重组Ag85A(rAg85A)和/或Ag85B(rAg85B)蛋白与母牛分枝杆菌菌苗(Mycobacteri-um vaccae,MV)联合免疫的免疫原性。方法 60只雌性BALB/c小鼠随机分为下列6组:(1)阴性对照组:磷酸盐缓冲液(PBS)组,(2)阳性对照组:卡介苗(BCG)组,(3)阳性对照组:MV组,(4)实验组:rAg85A-MV组,(5)实验组:rAg85B-MV组及(6)实验组:rAg85A-rAg85B-MV组。每2周免疫1次,共免疫3次。末次免疫结束后第14天杀鼠,用ELISA法检测血清中IgGI、gG1和IgG2a水平;ELISPOT检测脾脏分泌γ干扰素(IFN-γ)的T淋巴细胞斑点数;流式细胞术检测全血单个核细胞内Th1和Th2百分比。结果三个实验组小鼠血清抗体水平均明显高于三个对照组(P<0.001);三个实验组和两个阳性对照组小鼠的T淋巴细胞斑点数均明显高于阴性对照组(P<0.05);rAg85A-rAg85B-MV组小鼠Th1百分比明显高于其余五组(P<0.001),三个实验组Th1/Th2比值均明显高于三个对照组(P<0.05)。结论结核分枝杆菌rAg85A和rAg85B蛋白均具有很强的免疫原性,与MV联合免疫可增强其Th1型细胞免疫应答。
- 尹文东于庭梁艳阳幼荣肖漓王兰王莹史迎昌张俊仙吴雪琼
- 关键词：结核分枝杆菌AG85AAG85B母牛分枝杆菌疫苗
- 不同剂量结核病DNA疫苗的电转染免疫原性研究被引量：3
- 2014年
- 目的 研究不同剂量结核病DNA疫苗电转染后的免疫原性.方法 40只BALB/c小鼠通过随机数字表法分为8组,每组5只.其中4组分别用100 μl生理盐水和10 μg、50 μg、100 μg结核分枝杆菌Ag85A DNA肌内注射免疫小鼠;另4组用100 μl生理盐水和10 μg、50 μg、100 μgAg85ADNA肌内注射加电转染免疫小鼠.每2周免疫1次,共3次.最后1次免疫后2周杀死小鼠.用ELISA方法检测小鼠脾细胞培养上清液中γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素4（interleukin 4,IL-4）水平;用流式细胞术检测小鼠外周血单个核细胞（PBMC）分泌IFN-γ的辅助性T细胞（helper T cell,Th）1细胞百分比、分泌IL-4的Th2细胞百分比,以及Th1与Th2的细胞比值.用SAS 9.2软件处理数据,实验数据以“-x±s”表示,对有关数据进行两因素析因设计的方差分析,两两比较采用t检验,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 免疫结束后2周,小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平,50 μg[（646.05±342.53） pg/ml]和100 μgAg85ADNA肌内注射组[（738.61±372.68） pg/ml]显著高于生理盐水组[（1.73±3.88）pg/ml]（f值分别为4.065、4.647,P值均＜0.05）和10 μg Ag85A DNA组[（87.83±120.82）pg/ml]（t值分别为3.513、4.094,P值均＜0.05）;10 μg Ag85A DNA电转染组[（357.06±105.18） pg/ml]显著高于生理盐水组（t=2.247,P＜0.05）,高于100 μg Ag85ADNA电转染组[（86.08±135.73） pg/ml],但差异无统计学意义（t=1.706,P＞0.05）;50 μg Ag85ADNA电转染组[（648.60±439.41）pg/ml]显著高于生理盐水组（t=4.081,P＜0.05）和100 μg Ag85A DNA电转染组（t=3.539,P＜0.05）.与直接肌内注射组IFN-γ水平[（87.83±120.82） pg/ml]比较,10 μg Ag85A DNA电转染组增高3倍[（357.06 pg/ml）/（87.83 pg/ml）]; 50 μg Ag85A DNA肌内注射组[（646.05±342.53） pg/ml]与电转染组[（648.60±439.41）pg/ml]比较,差异无统计学意义（t=-0.016,P＞0.05）;100 μg Ag85A DNA电转染组[（86.08±135.73）pg/ml]较肌内注射组[（738.61
- 梁艳肖漓白雪娟高钰阳幼荣张晓燕陈丹王兰史迎昌张俊仙李忠明吴雪琼
- 关键词：电穿孔免疫
- 结核分枝杆菌Ag85A质粒DNA疫苗治疗小鼠耐药结核病的效果研究被引量：1
- 2008年
- 目的研究结核分枝杆菌Ag85A质粒DNA疫苗治疗小鼠耐药结核病的效果。方法用结核分枝杆菌高耐利福平低耐异烟肼临床分离株HB361尾静脉注射17—19g的6—8周龄雌性BALB／c小鼠后，将小鼠随机均匀地分为6组，感染后第3天开始，分别用生理盐水（A组）、pVAX1空载体（B组）、利福平（C组）、微卡菌苗（D组）、Ag85A质粒DNA疫苗（E组）、利福平和Ag85A质粒DNA疫苗（F组）治疗60d，每组10只小鼠。治疗结束后3周，分别取肺和脾观察病理改变，称取重量做菌落计数。结果治疗结束后3周，与对照组比较，D组、E组和F组肺脏病变有不同程度减轻，病变局限，病变范围分别为50％、20％、20％，2／3区域可见正常的肺泡结构，肺泡轮廓相对清晰，细胞分布均匀。与A组相比，D组、E组和F组肺脏菌落数分别减少了52％、68％、78％；脾脏菌落数依次减少了48％、65％、79％。结论与对照组相比，Ag85A质粒DNA疫苗单独应用或与利福平联合应用治疗小鼠耐药结核病均显示疗效。
- 梁艳吴雪琼张俊仙阳幼荣李宁余琦宋晶莹白雪娟刘成龙李忠明王兰史迎昌
- 关键词：DNA疫苗结核分枝杆菌
