温州市科技局资助项目(Y20090103)
- 作品数：3 被引量：21H指数：2
- 相关作者：张丽芳薛向阳李玲玲武文一沈贤更多>>
- 相关机构：温州医学院温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：温州市科技局资助项目浙江省自然科学基金浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HPV 16型L2全长原核融合蛋白的交叉反应特性研究
- 2010年
- 目的 研究HPV 16型L2全长蛋白在HPV6、11、16和18型别间的交叉反应特性.方法 收集108例尖锐湿疣患者、156例宫颈癌患者和100名健康对照者的血清标本,采用PCR法从宫颈癌患者组织DNA中扩增HPV16 L2全长基因,将其克隆至原核表达载体PGEX-4T-1中,构建重组质粒PGEX-4T-1-HPV16 L2,将鉴定正确的重组质粒转化至E.coli BL21（DE3）中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和WB鉴定;进一步通过WB检测HPV16 L2全长融合蛋白与HPV6、11、16和18型DNA检测阳性的患者血清的特异性结合能力.以镍螯合亲和层析柱（Nj-NTA Agarose）纯化HPV16 L2融合蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA法检测3组标本中的HPV血清特异性IgG抗体.结果 成功构建了重组质粒PGEX-4T-1-HPV16 L2,含有HPV16 L2的融合蛋白在原核表达体系中呈较高效表达,表达量为27.2%;SDS-PAGE和WB检测结果显示在约相对分子质量82 000处可见特异性阳性信号条带;以HPV6、11、16和18 DNA阳性患者血清为一抗的WB结果显示,HPV16 L2全长融合蛋白在相对分子质量82 000处均出现特异性阳性信号条带.ELISA结果显示,尖锐湿疣组、宫颈癌组和健康对照组血清抗体A值分别为0.825±0.409、0.808±0.376、0.128±0.15,阳性率分别为92.6%、92.3%和6.0%.3组间血清抗体A值及阳性率差异均具有统计学意义（H=207.292,x2=251.846,P均＜0.01）,而尖锐湿疣组与宫颈癌组之间的血清抗体均值（0.825和0.808）差异无统计学意义（H=0,P＞0.05）.结论 HPV16 L2全长原核融合蛋白具有较强的抗原性,与HPV6、11、16和18型别间具有交叉反应,可进一步用于HPV感染及其相关肿瘤ELISA血清学检测试剂的通用型靶抗原研究.
- 李玲玲刘建晓朱珊丽薛向阳陈俊张丽芳
- 关键词：人乳头瘤病毒
- miR-143在胃癌中的表达及其临床病理意义被引量：11
- 2010年
- 目的:分析miR-143在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:分别取胃癌手术标本32例及其癌旁组织,提取总RNA,采用茎环逆转录实时定量PCR方法检测miR-143在胃癌及其癌旁正常组织中的表达量,并分析其与临床病理特征关系。结果:与癌旁组织比较,miR-143在胃癌组织中表达显著下调(P<0.05);miR-143的表达与细胞分化程度(P<0.05)及淋巴结转移(P<0.05)相关,与性别、年龄、血型、肿块位置、肿块大小、肿块侵润深度及肿瘤淋巴结转移分期无关。低分化胃癌组织的miR-143表达明显低于中高分化的标本(P<0.05);有淋巴结转移胃癌组织的miR-143表达明显低于无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-143评价胃癌细胞分化程度的特异性和敏感性可达75.0%和79.2%。结论:miR-143表达下调可能与胃癌的发生发展有关,miR-143可作为评价低分化胃癌的辅助指标。
- 林巧爱李玲玲巩文辞武文一沈贤张丽芳薛向阳
- 关键词：MICRORNA胃肿瘤细胞分化
- miR-199a在宫颈癌及宫颈上皮内瘤样病变中的表达及意义被引量：10
- 2011年
- 目的探讨miR-199a在宫颈癌及宫颈上皮内瘤样病变(CIN)中的表达情况及与宫颈癌各种临床病理特征的关系。方法采用茎环Realtime RT-PCR方法检测48例宫颈癌、12例CIN及正常宫颈组织中miR-199a-3p和miR-199a-5p的表达,分析miR-199a-3p和miR-199a-5p表达与宫颈癌常见的临床病理特征的关系。结果用茎环Realtime RT-PCR方法检测miR-199a-3p和miR-199a-5p表达的敏感性和特异性良好;miR-199a-3p和miR-199a-5p在宫颈癌及CIN组织中的表达低于非肿瘤组织,差异性显著(P<0.05),miR-199a-5p/miR-199a-3p表达比值未见明显差异(P=0.219)。其中miR-199a-5p的表达与宫颈癌的组织分化程度存在一定相关性。小细胞型(Ⅲ级)宫颈癌的miR-199a-5p表达低于其他组织分化类型的标本(P=0.054))。miR-199a-3p和miR-199a-5p的表达与年龄、肿块大小、大体类型、病理类型及FIGO分期未见显著相关性(P>0.05)。结论 miR-199a-3p和miR-199a-5p在宫颈癌及CIN组织中的表达显著低于正常宫颈组织。miR-199a-5p的表达与肿瘤的分化程度存在一定相关性。miR-199a在宫颈癌组织中的异常表达,可能在宫颈癌的发生和发展过程中发挥重要作用,有望成为宫颈癌新的治疗靶点。
- 邹阮敏胡芝陈昊张丽芳张文淼薛向阳黄引平
- 关键词：MIRNA宫颈癌
