国家自然科学基金(39770177)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
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- 相关机构：徐州医学院大连医科大学更多>>
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- 脑缺血/再灌对海马磷酸酪氨酸蛋白含量的影响及其机制的研究被引量：1
- 2001年
- 目的和方法 :采用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎 (BCAO)前脑缺血模型 ,研究N 甲基D 门冬氨酸 (NMDA)受体 (NR)非竞争性拮抗剂氯胺酮 (ketamine,KT)、L 型电压门控钙离于通道 (L typevoltagegatedcalciumchannel,L型VGCC)拮抗剂硝苯吡啶 (NifedipineND)及非NR拮抗剂 6 ,7 二硝基喹恶啉上卫四 (6 ,7 dinitroquinoxaline 2 ,3dioneDNQX)对沙土鼠脑缺血及缺血 /再灌海马可溶性 (S3)、突触体 (P2 )和颗粒性 (P3)部分中磷酸酪氨酸蛋白 (p tyr pr)含量变化的影响。 结果 :①缺血 15min ,三部分 (P2 ,P3,S3) p tyr pr含量均下降 ,而S3 部分 p tyr pr含量下降更明显 ;随着脑缺血再灌时间的延长 ,三部分P tyr Pr含量均逐渐升高。S3 部分恢复快 ,P2 与P3 部分相比 ,升高的速度较慢 ,但升高的幅度较大 ,且再灌后期变化不大 ;②脑缺血前腹腔注射KT或ND ,均可部分地拮抗缺血再灌引起的p tyr pr含量的升高 ,而DNQX对此无影响。 结论 :缺血 /再灌引起的p tyr pr变化与NR通道及L型VGCC有关 。
- 裴林李勇张光毅崔肇春朱正美
- 关键词：脑缺血KT海马
- 抗磷酸酪氨酸抗体的制备、纯化和应用被引量：1
- 2000年
- 目的 制备抗磷酸酪氨酸多克隆抗体 ,利用此抗体研究缺血再灌注对海马磷酸酪氨酸蛋白 (p -tyr -pr)免疫反应性的影响。方法 以偶联磷酸化酪氨酸的牛血清白蛋白 (BSA)作为免疫原免疫兔获得抗血清。将磷酸酪氨酸偶联到溴化氰活化的sepharose 4B上。抗血清经磷酸酪氨酸 -sepharose 4B亲和柱纯化 ,所得抗体专一性强 ,并经dotblot鉴定。结果 抗体仅对酪氨酸磷酸化的蛋白质包括酪氨酸磷酸化的血清白蛋白、溶菌酶、卵清蛋白起抗原抗体反应 ,而不识别非酪氨酸磷酸化的溶菌酶、卵清蛋白 ;不识别作为免疫原的骨架成分BSA ,也不识别丝氨酸磷酸化的卵清蛋白和苏氨酸磷酸化的卵清蛋白 ;缺血 /再灌注 6h海马各区p -ty -pr免疫反应性明显增强 ,氯胺酮或硝苯吡啶对此有拮抗作用。结论 亲和纯化后的抗体是高度特异性的。缺血 /再灌注后p -tyr-pr免疫反应性增强与N -甲基 -D -天冬氨酸 (NMDA)
- 裴林李勇王德广张光毅崔肇春朱正美
- 关键词：抗体多克隆抗体
- 脑缺血再灌注对海马NMDA受体2A亚基酪氨酸磷酸化的影响被引量：6
- 2000年
- 目的 研究海马NMDA受体 2A亚基 (NR2A)在脑缺血 再灌注过程中酪氨酸磷酸化水平的变化。方法采用SD大鼠四动脉结扎建立前脑缺血模型。用抗磷酸酪氨酸单抗或抗NR2A抗体以免疫沉淀法和免疫印迹法检测海马NR2A酪氨酸磷酸化水平。结果 缺血海马NR2A酪氨酸磷酸化水平下降 ,再灌注后升高 ,再灌注 6h达最高 ,其后又下降。缺血再灌注后NR2A含量逐渐下降。结论 脑缺血
- 刘永高灿张光毅
- 关键词：脑缺血酪氨酸磷酸化
- 矾酸钠和染料木黄酮对脑缺血／再灌注诱导海马神经元损伤的作用及分子机制被引量：1
- 2003年
- 目的研究矾酸钠和染料木黄酮对脑缺血／再灌注后海马神经元损伤的作用及其分子机制。方法采用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎诱导的短暂(15min)前脑缺血模型，用底物γ^-32P掺入法测定酪氨酸蛋白激酶(PIK)的活性，免疫印迹法分析NMDA受体2B亚基(NR2B)的酪氨酸磷酸化变化；采用体外孵育的大鼠海马脑片模拟缺血模型，测定海马神经元细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)的漏出量作为神经元损伤的指标。结果沙土鼠缺血／再灌6h，海马突触体总PIK活性显著升高，缺血前20min腹腔注射染料木黄酮对PIK总活性有明显的降低作用，而矾酸钠对其却无明显作用；短暂前脑缺血／再灌注6h后，NR2B的酪氨酸磷酸化显著增加，矾酸钠与染料木黄酮可分别增加、减少这种磷酸化的增加，而对NR2B的蛋白表达无明显作用；大鼠海马脑片“缺血”30min／再灌1h，细胞LDH的漏出量明显增加，“缺血”前15min，在海马脑片孵育液中加入矾酸钠与染料木黄酮可分别增加、减少LDH的漏出量。结论PIK和酪氨酸蛋白磷酸酶(PTP)共同参与缺血性脑损伤的调节，而PIK起着更为重要的作用。
- 颜景芝张光毅裴林李勇刘永侯筱宇
- 关键词：脑缺血再灌注酪氨酸磷酸化染料木黄酮
