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海藻糖水替代机制对冻干红细胞保护作用的探讨被引量：4: 2018年; 目的探讨海藻糖对冻干红细胞复水回收率和残余水含量的影响及其对红细胞膜的保护机制。方法将红细胞分别与100、200、400、600、800、1 000 mmol/L海藻糖负载溶液孵育,共6组,并设置对照组,用海藻糖检测试剂盒特异性检测红细胞中海藻糖加载量;用冷冻干燥机对红细胞做冷冻干燥,Karl-Fisher滴定法结合卡式炉法测定冻干红细胞中残余水含量;细胞计数仪检测复水后红细胞数目。结果随着负载海藻糖溶液浓度的上升,冻干红细胞复水回收率先平稳后上升,当负载溶液浓度达到800 mmol/L时回收率最高;残余水含量先保持不变,然后下降,当负载溶液浓度达到800和1 000 mmol/L时,残余水含量（%）3.47±0.21和2.43±0.18。此外,冻干红细胞组与冻干血影细胞组残余水相同。结论初步证实了海藻糖通过水替代作用保护红细胞膜。; 李文慧王珏李玲宋宁刘忠; 关键词：海藻糖

红细胞储存损伤对于大肠杆菌感染大鼠输注效果的影响: 2017年; 目的探讨红细胞(RBCs)储存损伤对大肠杆菌感染的免疫力低下大鼠输血后死亡率的影响。方法将69只SPF级SD大鼠,根据是否使用免疫抑制剂(环磷酰胺和地塞米松)和输注RBCs的储存时间不同,随机分成3个实验组:免疫抑制+9 d RBCs组、免疫抑制+1 d RBCs组和免疫抑制+生理盐水(NS)组(18只/组);1个正常对照组:单纯NS组,含15只大鼠。每只大鼠经股静脉放出全身20%血液后,分别输注与失血量相同的储存9或1 d的浓缩RBCs及等量NS,随后植入大肠杆菌溶液0.5 mL,并连续观察7 d。术后24 h,取尾静脉血浆用亚铁嗪微板法测定血清铁,并以LB培养基血细菌培养15 h,用紫外分光光度仪测定OD600;术后24 h处死各免疫抑制组大鼠3只/组,取组织做病理检查。结果 3个免疫抑制组和对照组分别输注9、1 d RBCs和NS后的大鼠死亡率分别为10/15,11/15和9/15(P>0.05),死亡大鼠的平均生存时间(h)分别为55.6±21.3,38±16.6和28.3±15.0(P<0.05);24 h血清铁离子浓度(μmol/L)分别为34.1±9.8,28±10.2,26.8±9.0和22.4±5.9(P>0.05);血细菌培养的结果(OD_(600))分别为0.510±0.340,0.790±0.281,0.427±0.107和0.349±0.069(P<0.05);24 h回肠组织细菌计数(个/1 000倍视野)分别为44±9,101±7和27±8(P<0.05)。结论输注不同储存时间的RBCs对于大肠杆菌感染的免疫力低下大鼠的死亡率没有明显影响;但是相比储存时间长的RBCs,新鲜RBCs输注后明显促进了免疫力低下大鼠体内大肠杆菌的增值并加速了感染大鼠的死亡。; 王向明焦伯海王珏尹湧华宋宁田力李玲孔玉洁欧国进于浩刘忠; 关键词：输血红细胞大肠杆菌免疫抑制 SD大鼠

不同渗透压对红细胞体积和溶血影响研究被引量：1: 2015年; 目的探讨不同渗透压下红细胞体积和溶血情况的变化,为优化人红细胞保护剂的添加和洗涤方案、冷冻干燥程序设定等方面提供参考依据。方法以梯度浓度的氯化钠溶液提供不同的渗透压环境,加入储存4周的全血,离心法测红细胞压积(Hct)、显微镜下记录红细胞形态和直径、用冰点渗透压仪测定上清的渗透压、测定上清血红蛋白(Hb)含量,经计算得到不同渗透压下的红细胞体积及溶血率差异。结果在低渗环境下,当渗透压(m Osm/kg)为148、154、158、171、191和236时,溶血率(%)分别为87.3±4.3、79.4±6.7、68.5±6.6、30.2±2.8、6.6±1.0和2.5±0.8,红细胞平均体积(MCV)(f L)分别为184.1±32.7、216.4±62.9、185.2±27.3、151.8±6.8、122.4±3.7和109.3±2.4;在高渗环境下,当渗透压(m Osm/kg)为810、1 073、2 460和3 033时,溶血率(%)分别为2.1±0.7、2.5±0.6、25.2±8.7和55.8±13.8,MCV(f L)分别为58.1±1.9、60.6±2.8、74.5±4.8和80.1±13.9;在等渗环境,溶血率为(1.9±0.8)%、MCV为(94.9±1.08)f L。结论渗透压从低渗到高渗变化过程中,红细胞的体积逐渐减小,溶血率先降低后升高,当渗透压为160 m Osm/kg时,红细胞体积达到上限160 f L,溶血率增加至68%;当渗透压为800 m Osm/kg时,红细胞体积达到下限为60 f L,溶血率为2%。为了降低细胞溶血率,红细胞体积变化宜<1.68倍、>0.68倍原体积。; 张莹张嵘洪树青王珏宋宁田力陈强高华方刘忠; 关键词：渗透压红细胞体积溶血红细胞压积

人红细胞冻干保护剂的研究进展被引量：7: 2015年; 冷冻干燥法是实现红细胞长期保存的方法之一,要实现冻干,首要解决的问题是维持细胞膜的完整性和功能。低温和干燥是对膜产生损伤的主要因素,通过添加保护剂,优化降温速率及冻干程序、复水方法等,可以缓解冻干过程对膜的损伤。其中冻干保护剂的作用是保持细胞膜结构和减少渗透性损伤,其构成主要为碳水化合物(糖类)、聚合物、蛋白类和其他一些成分。本文对目前常用的冻干保护剂的种类、作用机制、研究进展和存在的问题,进行了分析和总结,并对未来研究及发展方向进行了展望。; 陈奕冰田力宋宁陈强刘忠; 关键词：人红细胞冷冻干燥冻干保护剂海藻糖脂质体

甘油浓度对红细胞冻干保存效果的影响被引量：5: 2015年; 目的探讨甘油浓度浓度对红细胞冷冻干燥保存的回收率、溶血率及残余水含量的关系。方法以甘油浓度分别为3%、6%、9%、12%、15%、18%、21%(w/v)的冻干保护剂处理红细胞,冻干,用显微镜观察细胞形态、血细胞计数仪检测细胞数、分光光度计测定游离血红蛋白量,分析细胞复水后红细胞计数、溶血情况。用热重法测定冻干红细胞水分含量,分析不同保护剂组红细胞的水分含量变化情况。结果复水后红细胞形态正常,甘油浓度为9%、12%、15%时,红细胞回收率分别为(77.08±9.41)%、(84.37±3.42)%、(80.21±9.20)%,红细胞溶血率分别为(19.82±2.23)%、(17.66±1.17)%、(15.86±2.23)%,相应的冻干红细胞残余水分含量为(19.43±1.36)%、(22.89±1.57)%、(26.17±1.09)%。结论保护剂中甘油浓度影响红细胞冻干保存的效果;甘油浓度为(9-15)%时对冻干保存的红细胞损伤较小;冻干红细胞残余水分含量随保护剂中甘油浓度的增高而增高。; 陈奕冰张莹田力宋宁张嵘陈强刘忠; 关键词：红细胞红细胞形态红细胞回收率

安徽省汉族人群Miltenberger血型调查分析被引量：7: 2014年; 目的调查安徽省Miltenberger血型的分布情况,为建立红细胞库奠定基础。方法随机采集安徽省血液中心2 660例非血缘关系汉族无偿志愿献血者外周血样乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血标本,并提取DNA。采用序列特异性引物PCR(PCR-SSP)方法对Miltenberger血型系统进行检测,并通过血清学及测序方法验证。结果 2 660例献血者中有24例PCR-SSP阳性,经血清学及测序确认均为GP.Mur表型。结论在安徽省汉族人群中,GP.Mur表型的频率为0.9%。目前还未发现Miltenberger血型系统的其他表型。; 周娟吕蓉朱帮强韩婷婷刘忠; 关键词：血型

一种适合中国地区HBV流行特征的荧光定量PCR检测方法的初探被引量：2: 2016年; 目的设计1套适合中国地区HBV流行特征的高灵敏度、高特异性的HBV引物探针,建立HBV荧光定量检测的方法。方法在NCBI的Nucletide中输入HBV、China、complete genome等关键词找到中国地区的HBV序列,经比对后在保守序列设计引物探针,引物扩增的PCR产物经PMD-19载体连接制备成质粒标准品并测序验证序列,计算质粒拷贝数,将质粒标准品稀释成不同浓度的质粒标准品,用第三方标准品对质粒标准品做校正,绘制HBV标准曲线,并用Probit分析计算检测下限,验证灵敏度、特异性等。将所建立的HBV荧光定量检测方法检测100例标本,并与罗氏cobasTaq Screen MPX Test,version 2.0检测试剂盒检测结果做相关性分析。结果引物探针特异性好,质粒测序结果与目的产物完全吻合,质粒标准品曲线R^2>0.999,扩增效率为95.43%,线性范围(2×10~2-2.5×10~9)IU/m L,95%检测下限为16.2 IU/m L,批内重复变异系数为0.15%-1.11%,批间变异系数为0.91%-4.67%。与罗氏检测结果相关性高(R=0.96)。结论成功设计出1对适合中国HBV流行特征的引物探针,所建立的HBV荧光定量检测的方法灵敏度高、特异性好、重复性好,为在对中国地区开展血液HBV DNA载量检测及监控提供了技术支撑。; 刘晓欧国进李玲王珏刘忠; 关键词：荧光定量PCR

冻干红细胞残余水的测定及其分布研究被引量：1: 2017年; 目的建立并比较冻干红细胞残余水含量测定方法,探讨冻干红细胞残余水的分布情况。方法一次性冻干等量(500μL)的含保护剂(主要成分12%甘油)的红细胞、无保护剂的红细胞,含保护剂(同前)的血影细胞、无保护剂的血影细胞及保护剂,用热重分析法及Karl-Fisher滴定法结合卡式炉法测定其残余水含量,同时用含水量固定的标准品(水分含量4.9%-5.2%)做检验,每组样品重复测量6次;分析各组之间的差异,比较冻干血影细胞及冻干红细胞残余水含量。结果热重分析法测定残余水含量(%):冻干红细胞、无保护剂冻干红细胞、冻干血影细胞、无保护剂冻干血影细胞、单纯冻干保护剂、标准品分别为19.01±2.18、4.60±0.78、18.95±1.89、4.87±1.01、16.12±1.04、5.28±0.16;冻干保护剂及含保护剂冻干红细胞的热重(TG)曲线走势接近,无保护剂冻干红细胞与前二者曲线走势差异明显;Karl-Fisher法测定残余水含量(%):冻干红细胞、无保护剂冻干红细胞、冻干血影细胞、无保护剂冻干血影细胞、单纯冻干保护剂、标准品分别为3.21±0.23、1.22±0.09、3.16±0.26、1.25±0.07、2.63±0.41、5.14±0.13。结论热重分析法测定含保护剂的冻干品残余水含量时的结果偏高,Karl-Fisher滴定法结合卡式炉法能够准确反映冻干红细胞的残余水含量;初步判断冻干红细胞残余水主要分布于细胞膜。; 洪树青宋宁李文慧孔玉洁尹湧华陶芳标刘忠; 关键词：红细胞保存冷冻干燥残余水保护剂热重分析法

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国家自然科学基金(81370669)

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