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国家高技术研究发展计划(2006AA022420)
作品数:
1
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相关作者:
雒彧
宋楠楠
姜雯雯
张颖
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2009
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结核分枝杆菌抗原Ag85B-Mpt64 190-198-HspX融合蛋白免疫原性的初步观察
被引量:2
2009年
目的为了建立对潜伏感染细菌的保护性免疫应答,本研究选择结核分枝杆菌休眠期、对数生长期最重要的保护性抗原HspX、Mpt64的190~198位的氨基酸多肽(CD8^+T细胞表位)及Ag85B,构建融合蛋白Ag85B-Mpt64 190-198-HspX(AMH),并对其免疫原性进行研究。方法PCR分别扩增Ag85B、Mpt64 190-198-HspX基因,并依次插入pET-28a质粒中,在大肠杆菌BL21中表达纯化AMH蛋白。将该蛋白和佐剂二甲基三十六烷基铵和卡介苗多糖核酸(DDA+BCG—PSN)混合构建亚单位疫苗,分别于1、4、7周皮下免疫C57BL/6小鼠3次,最后一次免疫5周后检测体液免疫与细胞免疫反应。结果该融合蛋白以包涵体形式能在大肠杆菌中稳定表达,经Ni—NTA层析柱纯化得到纯度较高的蛋白;构建的亚单位疫苗免疫动物能产生针对结核杆菌特定抗原(PPD、Ag85B、Mpt64 190-198和HspX)的特异性的细胞免疫和体液免疫应答,具有较强的免疫原性。结论融合蛋白AMH作为结核亚单位疫苗候选的融合蛋白抗原有必要进一步研究。
李青
姜雯雯
雒彧
于红娟
宋楠楠
王秉翔
刘昕
张颖
祝秉东
关键词:
结核分枝杆菌
亚单位疫苗
融合蛋白
AG85B
HSPX
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