国家高技术研究发展计划(2001AA241104)
- 作品数：16 被引量：101H指数：6
- 相关作者：王茂林赵云李浩杰蒋梁材蒲晓斌更多>>
- 相关机构：四川大学四川省农业科学院湖南农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划四川省“十一五”农作物及畜禽育种攻关项目引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 甘蓝型油菜ADP-核糖基化因子基因全长cDNA克隆及表达分析被引量：2
- 2008年
- 【目的】克隆甘蓝型油菜(Brassica napus L.)矮化突变体"NDF-1"和野生型近等基因系亲本"3529"中ADP-核糖基化因子(ADP-ribosylation factor,ARF)基因全长cDNA,分析矮化突变体中该基因在不同组织中的表达水平,探讨矮化突变体中该基因在甘蓝型油菜茎杆发育过程中的作用。【方法】采用SSH(suppression subtractive hybridization)、RACE(rapid-amplification of cDNA ends)和RT-PCR技术,克隆甘蓝型油菜矮化突变体"NDF-1"和野生型"3529"中的ARF基因的全长cDNA序列。分别采集甘蓝型油菜野生型和矮化突变型苗期子叶、薹期根、茎尖和真叶,采用相对定量PCR方法检测矮化突变体中该基因的表达。【结果】获得了甘蓝型油菜矮化突变体"NDF-1"和野生型"3529"的ARF基因的全长cDNA,分别命名为BnARF和BnARF-h。序列分析表明:这两个基因长度分别为837和802 bp,都含有546 bp的完整开放阅读框(ORF),编码181个氨基酸,与其它植物、动物和酵母的ARF基因有很高的相似性。BnARF基因在野生型和矮化突变体的根、子叶、茎尖和真叶中均有表达,其中在子叶中表达量最高,真叶中次之,根和茎尖中的表达量最少。同时BnARF在矮化突变体的根、子叶和茎尖中的表达量都显著低于野生型,但在真叶中表达量相近。【结论】克隆了甘蓝型油菜矮化突变体"NDF-1"和野生型"3529"中ADP-核糖基化因子基因的全长cDNA,这两个ARF基因的序列上有两处碱基存在差异,其中一处是错义突变,推测这一突变可能与植株矮化有关。而BnARF基因在野生型和矮化突变体的根、子叶和茎尖的表达存在显著性差异,可能参与了甘蓝型油菜的矮秆发育过程。
- 刘薇赵云安金玲王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜
- 利用SCAR-PCR检测杂交油菜“蜀杂9号”的杂种纯度被引量：2
- 2006年
- 用两个分别能在“蜀杂9号”父、母本之间稳定产生多态性的随机引物S18和S31,对父、母本DNA样品进行RAPD扩增,将得到的特异标记片段S18750和S31550进行回收、克隆和测序。根据测序结果设计序列特异性扩增(SCAR)引物SZ9SP1和SZ9SP2,将“蜀杂9号”的亲本RAPD标记转化为序列特异的SCAR标记。当用两对引物分别扩增杂种F1代单株总DNA时,能分别获得父、母本特异序列扩增带,表明获得的SCAR标记能可靠地用于“蜀杂9号”杂种纯度的检测。
- 张帆李江李熠毅李小艳刘璐王茂林赵云
- 关键词：杂交油菜杂种纯度分子标记RAPDSCAR
- 甘蓝型油菜高产双低三系杂交种川油33的选育
- 2005年
- 川油33为甘蓝型油菜细胞质雄性不育(CMS)高产双低杂交新品种,原品种代号为杂-9,不育系为JA8,保持系为JB8,恢复系为JR8.川油33杂交优势强,综合性状好,双低品质优,丰产性突出,产量高,含油量高,熟期适中,适应性广,抗(耐)病性强.在四川省油菜新品种区域试验中,2003年8个试验点平均产量2350.5kg/hm2,比对照蜀杂6号增产12.58%(极显著);2004年9个试验点平均产量2314.5kg/hm2,比对照蜀杂6号增产9.98%(极显著).在2003～2004年度组织五点(成都、绵阳、什邡、南充和内江)生产试验,平均产量2200.5kg/hm2,比对照蜀杂6号增产16.2%(极显著).杂交种子芥酸0.1%,硫甙22.89μmol/g饼,含油率(干基)40.81%.商品菜籽芥酸1.02%,硫甙27.82μmol/g饼,含油率(干基)39.0%.中抗病毒病和菌核病.平均全生育日数215d,比CK蜀杂6号早熟1～2d.2004年10月通过四川省农作物品种审定委员会审定,并被列为四川省主推品种.
- 蒲晓斌蒋梁材张锦芳李浩杰张启行
- 关键词：三系杂交种选育生育日数试验点MOL
- 油菜矮秆突变WRKY转录因子cDNA克隆及表达分析被引量：8
- 2008年
- 以甘蓝型油菜为材料,利用已建立的抑制性消减文库(SSH),采用RACE技术克隆到1个植物WRKY转录因子相关基因,命名为BnD11,其cDNA全长1034 bp,含有810 bp的完整开放阅读框,编码269个氨基酸。该基因编码的氨基酸序列与拟南芥WRKY40氨基酸序列相似性为79%,与拟南芥中编码WRKY-DNA结合蛋白40基因的氨基酸序列相似性达78%,与其它多种植物的WRKY转录因子的氨基酸序列也有较高的相似性。半定量RT-PCR对BnD11进行组织特异性表达分析显示:在正常生长条件下,BnD11在野生型和矮秆油菜的各个组织中均有表达,但在矮秆突变的根、茎、茎尖的相对表达量明显高于野生型。研究表明,BnD11功能区段具有很高的保守性,可能参与了油菜的茎秆发育。
- 薛华张红岩李小艳赵云王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜WRKY转录因子RT-PCR矮秆
- 甘蓝型油菜矮化突变体抑制消减cDNA文库的构建及初步分析被引量：14
- 2006年
- 采用抑制性消减杂交（suppressionsubtraetivehybridization，SSH）技术，以甘蓝型油菜矮化突变体“NDF—1”为实验方（tester），野生型“3529”为驱动方（driver）构建植株差异表达的抑制消减cDNA文库。所建eDNA文库的插入片段大小主要集中在100-1000bp之间。斑点杂交筛选得到了32个阳性克隆，序列测定和同源性对比分析表明，其中的12个克隆功能未知，其余涉及到激素信号转导、第二信使、光合作用、脂肪酸代谢及衰老等多个方面。还对部分差异表达基因的功能进行了分析。为进一步认识油菜植株矮化的机理奠定了基础。
- 李小艳赵云周云涛李熠毅王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜抑制消减杂交CDNA文库
- 油菜一个WRKY基因对盐胁迫和干旱胁迫的表达响应被引量：9
- 2010年
- 以抗性不同的3个油菜品系为材料,半定量RT-RCR方法检测油菜叶片WRKY转录因子家族的BnD11基因在高盐和干旱胁迫下的表达情况.高盐和干旱胁迫6 h后BnD11基因表达量即有明显调高,在抗性最强的‘862’品系中表达量增加幅度最高,而在抗性最弱的‘1821’品系中表达量增加幅度最少.结果表明BnD11基因表达量与油菜品系抗性强度具有明显正相关性,可能在油菜抗(耐)盐和干旱的生理过程中具有重要作用.
- 王景娜高勇安金玲王志君王茂林
- 关键词：油菜WRKY基因半定量RT-PCR丙二醛
- 甘蓝型高产杂交油菜新品种川油23选育被引量：2
- 2004年
- 川油23为甘蓝型油菜细胞质雄性不育(CMS)杂交新品种,不育系为JA3,保持系为JB3,恢复系为JR6。川油23杂交优势强,综合性状好,丰产性突出,产量高,含油量高,熟期适中,适应性广,抗(耐)病性强。在四川省油菜新品种区域试验中,2000年8个试验点平均产量2439kg/hm2,比对照蓉油4号增产9 57%(极显著);2001年8个试验点平均产量2569 5kg/hm2,比对照蓉油4号增产9 81%(极显著)。在2000～2001年度组织5点(成都、绵竹、大竹、峨嵋和宜宾)生产试验,平均产量2376kg/hm2,比对照蓉油4号增产10 4%(极显著)。种子含油率(干基)39 45%,比对照蓉油4号高2 79个百分点。中抗病毒病和菌核病。平均全生育日数218d,与CK蓉油4号相同。2002年通过四川省农作物品种审定委员会审定。
- 蒋梁材蒲晓斌张锦芳李浩杰张启行
- 关键词：杂交油菜高产育种细胞质雄性不育
- 甘蓝型油菜半胱氨酸蛋白酶cDNA的克隆及组织特异性表达分析被引量：6
- 2008年
- 采用SSH(Suppression subtractive hybridization)和Race-PCR(Rapid-amplification of cDNA ends)技术克隆得到来自甘蓝型油菜(Brassica napus L.)矮化突变体‘NDF-1’的一个差异表达基因编码区的全长cDNA序列,命名为Bncp5.该基因全长1224bp,含有1080bp的完整开放阅读框,编码359个氨基酸.该基因编码区与甘蓝中一个与衰老相关的半胱氨酸蛋白酶基因(登录号AF454960)同源性达97%,氨基酸序列同源性达到100%.Bncp5编码的蛋白相对分子质量为39.5×103,等电点为5.57.对其活性位点的分析表明其具备真核生物半胱氨酸蛋白酶的活性中心,且有很高的功能区段保守性,推测为一跨膜蛋白.相对定量PCR的检测结果表明,Bncp5在野生型和矮化突变体的根、茎、子叶和真叶中都有表达,但是表达量存在显著性差异.在野生型高秆油菜中,根的表达量最低,在真叶的表达量最高;在矮化突变体中,根、茎中的表达明显高于野生型,而在子叶和真叶中的表达量与野生型油菜的表达量基本一致.
- 张红岩薛华马欣荣赵云王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜矮化突变体半胱氨酸蛋白酶衰老
- 优质“三系”杂交油菜“川大319”选育报告
- 2008年
- "川大319"为四川大学生命科学学院育成的甘蓝型油菜细胞质雄性不育"三系"中熟杂交种,比对照种"蜀杂6号"增产8%～15%。品质优良,芥酸含量为0.20%,F2种子硫甙(含吲哚硫代葡萄糖甙)小于25μmol/g,芥酸为0.18%,生育期为220天左右。含油率(干基)为43.20%。2005年通过四川省农作物品种审定委员会审定。
- 王茂林赵云
- 关键词：甘蓝型油菜双低
- 油菜矮化突变体茎段伸长初期茎尖差异表达基因的初步分析被引量：2
- 2007年
- 采用抑制性消减杂交技术,以甘蓝型油菜矮化突变体"NDF-1"及野生型"3529"为材料构建与植株高矮性状关系最为密切的茎尖差异表达抑制消减cDNA文库。所建cDNA文库插入片段大小主要集中在100～500 bp之间。斑点杂交筛选得到30个阳性克隆,序列测定和同源性对比分析表明,所得克隆功能涉及到第二信使、转录因子、激素代谢、蛋白质降解及转运等多个方面。并对其中几个差异表达基因的功能进行了初步分析,为进一步认识油菜植株矮化机理奠定了基础。
- 周增光周云涛高勇王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜抑制消减杂交CDNA文库矮化
