国家自然科学基金(30770857)
- 作品数：9 被引量：26H指数：4
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- 载脂蛋白A-Ⅰ模拟肽对RAW264.7巨噬细胞胆固醇流出的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:观察载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)模拟肽D-4F对RAW264.7巨噬细胞胆固醇流出的影响,并探讨其机制。方法:巨噬细胞种植于24孔板,用1.85×107Bq/孔3H-胆固醇和含50μg/mL氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共同孵育24h后,给予不同浓度的D-4F(0～100μg/mL)干预24h,收集细胞用液体闪烁计数法检测胆固醇流出。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞内环磷酸腺苷(cAMP)含量,采用实时荧光定量PCR及Western印迹检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的mRNA及蛋白表达。结果:D-4F呈浓度依赖及时间依赖性促进巨噬细胞内胆固醇流出,增加细胞内cAMP水平,上调ABCA1mRNA和蛋白表达。8-Br-cAMP显著增加D-4F介导的胆固醇流出和ABCA1表达,而蛋白激酶A(PKA)抑制剂虽然对基础胆固醇流出及ABCA1表达几乎无作用,却可以抑制8-Br-cAMP对胆固醇流出和ABCA1表达的促进作用。结论:D-4F促进巨噬细胞胆固醇流出,cAMP释放及ABCA1表达,可能与激活cAMP-PKA-ABCA1通路有关。
- 谢琼赵水平
- 关键词：胆固醇流出巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1环磷酸腺苷
- 载脂蛋白嵌合模拟肽通过NF-κB途径抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞炎症反应被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨载脂蛋白嵌合模拟肽Ac-hE-18A-NH2对氧化型低密度脂蛋白(oxidized LDL,ox-LDL)刺激下巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响及其作用机制.方法:Ox-LDL刺激RAW264.7巨噬细胞,给予不同浓度的模拟肽Ac-hE-18A-NH2(1～100μg/mL)干预,收集细胞,测定巨噬细胞TNF-α的分泌和mRN表达水平.Western印迹检测ATP结合盒转运蛋白A1 (ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)及P-IκB蛋白浓度.EMSA检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活性.结果:Ox-LDL刺激使RAW264.7巨噬细胞TNF-α分泌和mRNA表达明显增强,细胞内胆固醇蓄积,促进IκB磷酸化,并激活NF-κB.Ac-hE-18A-NH2浓度依赖性地降低TNF-α分泌及mRNA表达,上调ABCA1 mRNA和蛋白的表达,减少细胞内胆固醇含量,抑制NF-κB活化,并抑制IκB磷酸化.相同的实验条件下及作用浓度,D-4F对于TNF-α分泌的抑制作用不如Ac-hE-18A-NH2.结论:Ac-hE-18A-NH2能抑制ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞TNF-α分泌和mRNA表达,IκB/NF-κB-TNF-α信号通路是其中作用途径之一.Ac-hE-18A-NH2的抗炎作用优于apoA-I模拟肽D-4F.
- 谢琼李峰赵水平
- 关键词：炎症肿瘤坏死因子-Α氧化型低密度脂蛋白巨噬细胞
- 他汀升高大鼠载脂蛋白A5降低甘油三酯的机制被引量：5
- 2010年
- 目的 明确他汀降低甘油三酯（TG）作用是否与载脂蛋白A5（ApoA5）有关,探讨他汀调节ApoA5的机制.方法 24只Sprague-Dawley大鼠随机分为3组：（1）对照组（n=8）：正常普通饮食喂养;（2）高甘油三酯血症（HTG）组（n=8）：10%果糖水喂养2周建立HTG大鼠模型,并继续喂养4周;（3）他汀组（n=8）：HTG大鼠建模后,加予阿托伐他汀（10 mg·kg^-1·d^-1）干预4周.测定空腹血脂及肝脏ApoA5和过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）表达.体外观察阿托伐他汀对HepG2细胞TG、ApoA5和PPARα的影响,并检测PPARα抑制剂是否影响他汀的上述效应.结果 （1）6周后,HTG组大鼠TG显著高于对照组,而他汀组TG则显著低于HTG组（P均〈0.05）.（2）HTG组大鼠ApoA5表达显著低于对照组,而他汀组的ApoA5表达则显著高于HTG组（P均〈0.05）.（3）HTG组大鼠PPARα的mRNA表达显著低于对照组,而他汀组PPARα mRNA表达显著高于HTG组（P均〈0.05）.结论 他汀显著升高肝细胞ApoA5和PPARα表达,降低细胞TG含量,但PPARα抑制剂可以显著抑制他汀的上述效应.他汀通过PPARα通路,上调ApoA5表达,降低TG.
- 黄贤圣赵水平柏林张骞胡敏赵旺
- 关键词：载脂蛋白A类甘油三酯类PPARΑ他汀类药物
- 吸烟对小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制
- 2009年
- 目的:探讨吸烟对小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制。方法:14只C57BL/6小鼠随机分为对照组和吸烟组。吸烟组小鼠被动吸烟8周后,检测血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)和丙二醛(MDA)浓度。采用液体闪烁计数法分别检测对照组小鼠血清、吸烟组小鼠血清、吸烟组小鼠血清+N-乙酰半胱氨酸(NAC,2mM)介导的细胞胆固醇流出效率。结果:与对照组相比,吸烟组小鼠血清中HDL-C显著降低,TG显著升高,TC和LDL-C无显著差别,并且吸烟组小鼠血清中MDA水平也显著升高。吸烟组小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出效率明显降低,给予抗氧化剂NAC共同孵育可以显著增加吸烟组小鼠血清胆固醇流出效率。结论:吸烟显著降低小鼠血清介导的巨噬细胞胆固醇流出效率,其机制可能与吸烟降低HDL-C水平以及促进HDL脂质过氧化有关。
- 彭振宇赵水平何白梅彭道泉胡敏
- 关键词：吸烟巨噬细胞胆固醇流出高密度脂蛋白
- 他汀类药物通过激活PPARα和升高大鼠载脂蛋白A5降低甘油三酯被引量：5
- 2010年
- 目的 明确他汀类药物降低甘油三酯（TG）作用是否与载脂蛋白A5（ApoA5）有关,探讨他汀调节ApoA5的机制.方法 24只Sprague-Dawley大鼠分为3组：（1）对照组：正常普通饮食喂养;（2）高甘油三酯血症（HTG）组：10%果糖水喂养2周建立HTG大鼠模型,并继续喂养4周;（3）他汀组：HTG大鼠建模后,以阿托伐他汀（10 mg·kg-1·d-1）干预4周.测定空腹血脂及肝脏ApoA5和PPARα表达.体外观察阿托伐他汀对HepG2细胞TG、ApoA5和PPARα的影响.结果 （1）HTG组大鼠TG显著高于对照组,而阿托伐他汀干预可以显著降低HTG大鼠的TG（均P＜0.05）.（2）HTG组大鼠ApoA5表达显著低于对照组,而他汀组的ApoA5表达显著高于HTG组.（3）HTG组大鼠PPARα的mRNA表达显著低于对照组,而他汀组PPARα mRNA表达显著高于HTG组.（4）他汀显著升高肝细胞ApoA5和PPARα表达,降低细胞TG,但PPARα抑制剂可以显著抑制他汀的上述效应.结论他汀通过PPARα通路,上调ApoA5表达,降低TG.
- 黄贤圣赵水平柏林张骞胡敏赵旺
- 关键词：载脂蛋白A类甘油三酯类PPARΑ他汀类药物
- 载脂蛋白嵌合模拟肽对低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察模拟肽Ac-hE-18A-NH2对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的RAW264.7巨噬细胞凋亡的影响。方法50 mg.L-1oxLDL处理RAW 264.7细胞48 h后加入不同浓度的Ac-hE-18A-NH2(1、10、50、100 mg.L-1)和β-环糊精(β-CD)或布雷菲得菌素(BFA)共同孵育24 h。通过流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒检测caspase-3活性及细胞内胆固醇含量,Western blot检测细胞bcl-2蛋白的表达,液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出。结果 oxLDL诱导的RAW 264.7巨噬细胞的凋亡率随着oxLDL浓度的增加和处理时间的延长而明显提高。Ac-hE-18A-NH2(1、10、50、100mg.L-1)干预后细胞凋亡率以浓度依赖的方式减少。Ac-hE-18A-NH2呈浓度依赖性的促进细胞内胆固醇流出和降低细胞内的胆固醇含量,降低caspase-3的活性,上调bcl-2的蛋白表达。β-CD与Ac-hE-18A-NH2共同作用后胆固醇流出明显增加,细胞凋亡率相应减少。而BFA作用相反。结论Ac-hE-18A-NH2明显抑制oxLDL诱导的巨噬细胞凋亡,其作用可能与促进细胞胆固醇流出、减少细胞内胆固醇蓄积有关。
- 谢琼李峰赵水平
- 关键词：氧化低密度脂蛋白巨噬细胞胆固醇流出高密度脂蛋白
- DDAH/ADMA通路在HDL促进内皮细胞NO生成中的作用
- 2009年
- 目的:观察高密度脂蛋白(HDL)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抑制内皮细胞一氧化氮(NO)生成的保护作用,并探讨其与二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)/非对称性二甲基精氨酸(ADMA)通路的关系。方法:Ox-LDL(100μg/ml)孵育人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24小时或不同浓度的HDL(10、50、100μg/ml)预处理HUVECs细胞1小时,再与ox-LDL(100μg/ml)共孵育细胞24小时,收集细胞培养上清液检测NO、ADMA的浓度,收集内皮细胞检测DDAH-Ⅱ的mRNA和蛋白表达以及DDAH的活性。结果:Ox-LDL(100μg/ml)孵育HUVECs24小时后,细胞培养上清液中NO的浓度显著降低,ADMA水平显著增高,细胞内DDAH-Ⅱ的mRNA和蛋白表达以及DDAH的活性均显著降低。HDL(10、50、100μg/ml)可以拮抗ox-LDL(100μg/ml)的上述作用。结论:HDL能显著抑制ox-LDL诱导的内皮细胞NO产生减少,其保护作用与其调节DDAH/ADMA通路有关。
- 彭振宇赵水平何白梅彭道泉
- 关键词：内皮细胞二甲基精氨酸二甲胺水解酶非对称性二甲基精氨酸
- 急性冠状动脉综合征患者载脂蛋白A5检测及其意义被引量：10
- 2009年
- 目的探讨血清载脂蛋白A5（ApoA5）水平与急性冠状动脉综合征（ACS）患者血脂谱及高敏性C反应蛋白（hs—CRP）的关系。方法入选587例受试对象，分为对照组（n=232）、稳定性心绞痛（SA）组（n=127）、不稳定性心绞痛（UA）组（n=116）和急性心肌梗死（AMI）组（n=112）。抽血分离血清，分别采用ELISA法和免疫比浊法测定血清ApoA5以及hs—CRP，并测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）。比较各组ApoA5、hs—CRP和血脂的血清浓度差异，分析三者之间的相互关系。结果UA组[（340．6±63．5）μg/L]和AMI组[（373．2±73．8）μg／L]的ApoA5浓度明显高于对照组[（108．7±23．2）μg/L]和sA组[（78．3±20．2）μg/L]（均P〈0．05）。UA组和AMI组的ApoA5与TG（r=0．63和0．67，P〈0．05）和hs—CRP（r=0．57和0．55，P〈0．05）呈正相关，而ApoA5与TC、HDL-C和LDL—C无明显相关（P〉0．05）。结论ACS患者中血清ApoA5浓度显著升高，与血清TG或hs—CRP浓度显著正相关，提示ApoA5的代谢和生理功能在ACS期间均发生了变化，这可能与炎症反应增强有关。
- 黄贤圣赵水平张骞柏林胡敏赵旺
- 关键词：载脂蛋白A类甘油三酯类C反应蛋白质
- 载脂蛋白嵌合模拟肽对巨噬细胞胆固醇流出的影响被引量：5
- 2010年
- 目的观察载脂蛋白嵌合模拟肽Ac-hE-18A-NH2对RAW264.7巨噬细胞胆固醇流出的影响,并探讨其机制。方法 RAW264.7巨噬细胞种植于24孔板,用0.5μCi/孔3H-胆固醇和含50mg·mL-1氧化低密度脂蛋白共同孵育24h之后,给予不同浓度的Ac-hE-18A-NH2(0～100mg·mL-1)干预24h,收集细胞用液体闪烁计数法检测胆固醇流出。采用ELISA测定细胞内cAMP含量,采用实时荧光定量PCR及Westernblot检测ABCA1、LXRα和PPARγ的mRNA及蛋白表达。结果 Ac-hE-18A-NH2以浓度依赖方式介导胆固醇流出;50mg·mL-1Ac-hE-18A-NH2干预不同时间,其介导的胆固醇流出率分别为(10.86±1.46)%(6h),(13.43±1.55)%(12h),(20.58±1.34)%(18h),和(26.93±4.37)%(24h)。同时,Ac-hE-18A-NH2还以浓度依赖方式增加细胞内cAMP水平,上调ABCA1、LXRα和PPARγmR-NA和蛋白表达。加用cAMP刺激剂8-Br-cAMP,Ac-hE-18A-NH2介导的胆固醇流出率由26.93±4.37增加至35.81±2.73,ABCA1mRNA表达增加了66.67%。而加用PPARγ特异性抑制剂预处理细胞后,PPARγ的表达几乎完全抑制,ABCA1和LXRα的表达也受到一定程度抑制,Ac-hE-18A-NH2介导的胆固醇流出率明显减少。结论模拟肽Ac-hE-18A-NH2可以明显促进巨噬细胞胆固醇流出,其机制可能与cAMP-ABCA1和PPARγ-LXRα-ABCA1两种途径有关。
- 谢琼李峰赵水平
- 关键词：胆固醇流出巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1环磷酸腺苷肝X受体Α过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
