国家自然科学基金(81070563)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：重庆医科大学成都市妇女儿童中心医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 白细胞介素-17对系膜细胞功能的影响及其分子机制被引量：3
- 2014年
- 目的研究白细胞介素(IL)-17对系膜细胞增殖及分泌功能的影响,并探讨其可能的分子机制。方法四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测IL-17对系膜细胞增殖的影响;酶联免疫法(ELISA)检测IL-17对系膜细胞分泌IL-1β的影响;免疫细胞化学法检测系膜细胞NF-κB的表达。结果不同浓度IL-17在不同时间点对系膜细胞增殖的影响均无统计学意义(P>0.05);IL-17可促进系膜细胞分泌IL-1β,且呈浓度时间依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);同时IL-17诱导组NF-κB的表达高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-17可能部分通过NF-κB途径引起系膜细胞分泌炎症因子IL-1β,加重肾脏局部的炎症状态,导致肾脏损伤。
- 王莉李秋李秋李翠萃阳海平王莉佳
- 关键词：白细胞介素17系膜细胞白细胞介素-1Β
- 小鼠白细胞介素-17及其shRNA重组表达质粒的构建
- 2013年
- 目的构建小鼠白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)及其shRNA重组表达质粒。方法以小鼠脾脏细胞总RNA为模板,PCR扩增IL-17基因,并亚克隆至质粒pLVX-IRES-ZsGreen1,构建重组表达质粒pLVX-IL-17-IRESZsGreen1;设计并合成3对针对IL-17基因的shRNA序列和1对阴性对照shRNA序列,分别插入质粒pLVX-shRNA,构建重组干扰质粒pLVX-shRNA1、pLVX-shRNA2、pLVX-shRNA3和阴性对照质粒shRNAC,进行测序;用脂质体法将各重组干扰质粒分别与表达质粒共转染293T细胞,分为空白对照组、过表达组、shRNA1组、shRNA2组、shRNA3组和shRNAC组,经荧光定量PCR和ELISA法分别检测各组细胞中IL-17基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平。结果 PCR扩增获得500 bp的目的基因,IL-17重组表达质粒及其shRNA重组质粒经酶切及测序鉴定证明构建正确;重组表达质粒转染293T细胞48 h后可见绿色荧光表达;过表达组IL-17基因mRNA及蛋白表达水平均明显高于空白对照组(P均<0.05),shRNA1组、shRNA2组和shRNA3组IL-17基因mRNA和蛋白表达水平均明显低于shRNAC组(P均<0.05)。结论成功构建了小鼠IL-17基因重组表达质粒及其特异性shRNA表达质粒,并筛选出shRNA1,其对IL-17的表达具有最佳的抑制效应。
- 万俊丽李秋刘玮阳海平崔晶晶施静
- 关键词：白细胞介素-17短发夹RNA原发性肾病综合征
- 白细胞介素-17对足细胞相关分子和凋亡的影响及其分子机制研究
- 2017年
- 目的研究白细胞介素（interleukin，IL）-17对足细胞相关分子及其凋亡的影响，并探讨可能的分子机制。方法以体外培养的足细胞作为研究对象，流式细胞仪检测不同浓度（1、10、50、100nm／ml）和不同作用时间（12、24、48、72h）IL-17对足细胞凋亡的影响；将足细胞分为空白对照组及100ng／ml IL-17诱导组，Real-timeRTPCR法检测IL-17对足细胞相关分子Nephrin、WT1、Synaptopodin及阴离子蛋白Podocylaxin、凋亡受体Fas和FasLmRNA表达的影响；流式细胞仪检测足细胞Fas和FasL蛋白的表达；免疫细胞化学法检测足细胞、WT1、Caspase8、Caspase3蛋白的表达。结果（1）IL-17可促进足细胞凋亡，呈时间、剂量依赖性；同时IL—17可增加足细胞凋亡受体Fas的表达（P〈0．01），并且增加其下游分子Caspase8、Caspase3的表达（P〈0．01）；（2）IL-17减低足细胞阴离子蛋白Podocylaxin的表达（P〈0．05），对Nephrin、WT1、Synaptopodin的表达无影响（P〉0．05）。结论IL-17可能通过抑制足细胞阴离子蛋白Podocylaxin表达，引起足细胞凋亡的方式来发挥对肾脏的损伤作用。
- 王莉李秋王莉佳阳海平李翠翠冯仕品
- 关键词：白细胞介素-17足细胞凋亡FAS
