教育部跨世纪优秀人才培养计划([2002]48)
- 作品数：73 被引量：520H指数：13
- 相关作者：肖志强陈主初易红张鹏飞李萃更多>>
- 相关机构：中南大学华南理工大学四川大学更多>>
- 发文基金：教育部跨世纪优秀人才培养计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信环境科学与工程更多>>
- 小细胞肺癌细胞系NCI-H446蛋白质表达谱的建立被引量：22
- 2004年
- 背景与目的:小细胞肺癌(smallcelllungcancer,SCLC)是一种侵袭性极强的恶性肿瘤,具有增长迅速、早期转移等特点。目前公开的数据库中尚未见到小细胞肺癌的双向电泳参考图谱及其蛋白表达谱。本研究目的是建立高分辨率的小细胞肺癌细胞系NCI-H446细胞双向凝胶电泳图谱,并初步分析其蛋白质表达情况。方法:用固相pH梯度双向凝胶电泳技术(IPG-DALT)分离NCI-H446细胞总蛋白,凝胶银染显色,ImageMaster2D图像分析系统分析,从凝胶中选取分离较好的蛋白质点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术和数据库搜索鉴定蛋白质。结果:获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,三块胶平均蛋白质点数为1506±74,匹配点数为1412±56,匹配率达93.4%,三块胶蛋白质点在位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在IEF方向偏差是(0.96±0.27)mm,在SDS-PAGE方向偏差是(1.24±0.41)mm。胶内酶解-肽质指纹图分析鉴定了58个蛋白质,其中有原癌蛋白、细胞周期调控和信号转导相关蛋白质。结论:建立了小细胞肺癌细胞系NCI-H446双向电泳参考图谱,并应用质谱技术鉴定了部分蛋白质点,为进一步构建其蛋白质表达数据库提供了基础。
- 李茂玉肖志强李萃吴晓英冯雪萍易红李建玲陈主初陈平梁宋平
- 关键词：NCI癌细胞系蛋白质表达谱双向凝胶电泳固相PH梯度MALDI-TOF
- 水中污染物扩散模型实验中的相似理论被引量：9
- 2004年
- 为了寻求天然河流中污染物扩散输移与室内模型试验的相似规律 ,文中以相似理论为基础 ,根据水中污染物扩散 -降解方程及一级动力学反应方程导出了污染物扩散 -降解模型实验中所需要遵循的相似准则 ,并以苯甲酸、对羟基苯甲酸、邻苯二甲酸和对氨基苯甲酸的实验数据为例 ,对此相似准则进行了验证 ,认为此相似准则可用于指导水中污染物扩散模型试验。
- 王美敬罗麟卢红伟蒋红
- 关键词：污染物扩散相似律
- 鼻咽癌细胞中p53相互作用蛋白质的分离和鉴定被引量：11
- 2004年
- 鼻咽癌中p5 3基因突变罕见 ,但绝大部分鼻咽癌中存在p5 3蛋白过表达 /聚集且功能失活 .然而 ,到目前为止p5 3蛋白失活的机制仍然不清楚 .为揭示鼻咽癌中p5 3蛋白功能失活的机制 ,采用免疫共沉淀技术分别富集鼻咽癌细胞系HNE1和HNE2的p5 3结合蛋白 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)对免疫沉淀复合物进行分离 ,从胶中切取p5 3结合蛋白条带 ,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱 (LC ESI MS/MS)分析 ,得到相应的肽序列标签 (peptidesequencetags ,PST) ,通过搜索数据库在鼻咽癌细胞系中鉴定了 9个p5 3结合蛋白 .分别是热休克蛋白 70 (HSP70 )家族成员GRP 78和GRP 75、HSP90家族成员GRP 94、核纤层蛋白A/C (LaminA/C)、α actinin 4、Ezrin/Cytovillin、DNA复制准许因子 /MCM3蛋白 (DNAreplicationlicensingfactor/minichromosomemaintenance 3protein ,MCM3)、CD98/ 4F2heavychain和蛋白激酶C (PKC) .并用免疫共沉淀和蛋白质印迹分析技术对HNE1细胞蛋白条带 3鉴定的p5 3相互作用蛋白之一HSP78进行了验证 .首次在鼻咽癌细胞中鉴定了 9个p5 3结合蛋白 ,为阐明鼻咽癌中p5 3蛋白聚集及失活的机制提供了重要依据和线索 .
- 胡巍肖志强陈主初李建玲张鹏飞冯雪萍易红余艳辉唐新科刘清萍梁宋平
- 关键词：P53鼻咽癌免疫共沉淀相互作用蛋白蛋白质印迹
- 未改性聚丙烯纤维的超临界染色研究进展被引量：1
- 2005年
- 综述了未改性聚丙烯纤维的超临界染色研究进展。在超临界二氧化碳中,染料可以扩散至纤维内部,与传统的方法相比,染色结果有很大的提高。超临界二氧化碳作为未改性聚丙烯纤维染色媒介是可行的。有25篇参考文献。
- 何亮张淑芬杨锦宗于立秋
- 关键词：聚丙烯纤维超临界二氧化碳染色
- 应用蛋白质组学和RNAi技术筛选鼻咽癌细胞中p53功能相关蛋白质被引量：5
- 2007年
- 为了阐明鼻咽癌中高表达的p53蛋白聚集与失活的机制,高通量地检测与p53功能相关的蛋白质,首先采用RNA干扰(RNAi)技术稳定沉默鼻咽癌细胞系CNE2的p53基因表达,然后用蛋白质组技术研究稳定沉默该基因对鼻咽癌蛋白质表达谱的影响.通过对稳定干扰p53基因后鼻咽癌细胞系CNE2的蛋白质表达谱改变的研究,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析和电喷雾串联质谱(ESI-Q-TOF-MS)验证鉴定了22个差异表达蛋白质.在这些差异表达蛋白质中,有些是已经报道的p53功能相关蛋白质,如热休克蛋白27(HSP27)、异质性胞核核糖核蛋白K(hnRNPK)、14-3-3σ等,其他可能是新的p53功能相关蛋白质,如eIF4B、TPT1、hnRNPH3、SFRS1等.部分差异表达蛋白质如HSP27、14-3-3σ和GRP75经蛋白质印迹分析技术进行了验证,同时pcDNA3.1-FLAG-p53质粒转染CNE2细胞引起了HSP27、14-3-3σ表达下调,GRP75表达上调.在鼻咽癌细胞中鉴定的22个差异表达蛋白质大致可以分为5类,包括信号传导相关蛋白质、分子伴侣、与转录和翻译相关蛋白质、代谢相关蛋白和细胞结构相关蛋白质,涉及到细胞周期的调控、分子基因表达调控、细胞黏附、细胞代谢等众多事件,它们可能作为p53功能相关蛋白质,为阐明鼻咽癌中p53蛋白聚集及失活的机制提供了重要依据和线索.
- 孙懿易红杨轶轩张鹏飞李茂玉李建玲杨芳肖志强陈主初
- 关键词：鼻咽癌蛋白质组学双向电泳MALDI-TOF-MS
- 一种新NLMS自适应滤波算法及其在多路回波消除中的应用被引量：7
- 2003年
- 提出一种NLMS改进算法并对其收敛性进行了证明。该算法计算复杂度低于Sankaran(1997)所提出的带有正交改正因子的归一化算法(NLMS-OCF)和仿射投影算法(APA),并具有易于实现等特点。仿真结果表明,以单路语音信号作输入时,新算法具有比NLMS-OCF算法更好的收敛速度和精度,而在收敛速度和精度相当的情况下,新算法比APA算法所占用的CPU时间少。将新算法扩展成两路算法后,扩展算法仍然保持了这些特点,与Sankaran(1999)两路NLMS-OCF及Benesty(1996)所提多路仿射算法(APA-MC)相比,新算法更适合于应用到多路回波消除等实时性要求高的场合。
- 周元建谢胜利
- 关键词：NLMS自适应滤波算法多路回波消除
- 一个基于多媒体短信息业务的变形动画生成机制
- 2003年
- 为了适应MMS(多媒体短信息业务)的发展,提出了一个基于图像扭曲的变形动画生成机制。该机制不仅能够实时地产生效果新奇、富于戏剧性的GIF动画,而且能够根据不同终端的特点实现图像的自适应处理,从而使在无线网络上传输丰富多彩的图像文件变得更为方便。
- 余庆军谢胜利
- 关键词：图像扭曲图像插值GIF动画
- NM23-H1、DJ1和TIM1在低分化鼻咽鳞癌组织和CNE2细胞株中共同表达被引量：6
- 2005年
- 鼻咽癌为一种好发于鼻咽项前壁及咽隐窝的头颈肿瘤,98%属低分化鳞癌.鼻咽癌就诊的患者中约75%已有颈淋巴结转移,颅神经受累(Ⅱ～Ⅵ,Ⅸ～Ⅻ)也较易发生.CNE2为一种低分化鼻咽鳞癌细胞系,其生物学行为具有低分化鼻咽鳞癌的一些共同特点.选择恶性程度高的鼻咽癌组织(Ⅳ期,低分化鼻咽鳞癌)和恶性程度高的低分化鼻咽鳞癌细胞株CNE2为研究样本,应用双向凝胶电泳技术获得了6例分辨率较高、重复性较好的低分化鼻咽鳞癌组织和CNE2细胞系双向凝胶电泳图谱,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,分析了145个蛋白质斑点(组织66个点,细胞株79个点),共鉴定出了74种蛋白质,其中瘤基因DJ1、转移相关基因NM23-H1和磷酸丙糖激酶异构酶1(TIM1)3种蛋白质,在CNE2细胞系和该6例低分化鼻咽鳞癌组织中均共同表达.并进一步应用RT-PCR法检测低分化鼻咽鳞癌细胞系CNE2和12例低分化鼻咽鳞癌组织三者mRNA的表达:在细胞系CNE2和3例Ⅳ期低分化鼻咽鳞癌病人的组织中三者全表达,3例Ⅲ期及6例Ⅱ期也各有1例为全表达,而在正常对照的6例慢性鼻咽炎组织中未检测到三者的同时表达且有一例为全阴性,NM23-H1、DJ1和TIM1三者的mRNA在Ⅲ、Ⅳ期低分化鼻咽鳞癌组织共同表达,与正常对照组织相比,发现两者有显著性差异(x2=10.214,P<0.005).NM23-H1、DJ1和TIM1三者的共同表达,可能与低分化鼻咽鳞癌的发生发展有关.
- 冯雪萍陈主初肖志强杨海燕诸葛勤朱果杨轶轩李明李萃李茂玉李峰张鹏飞肖健云
- 关键词：2-DE蛋白质组
- 巨噬细胞炎症因子1α对人脑微血管内皮细胞通透性的影响被引量：3
- 2007年
- 目的研究巨噬细胞炎症因子1α(MIP-1α)是否具有开通血脑屏障的作用。方法以重组人MIP-1α直接作用于人脑微血管内皮细胞(HBMEC),免疫荧光方法检测紧密连接蛋白ZO-1的分布变化、跨内皮细胞电阻、HRP穿过HBMEC单层的改变、HBMEC细胞CC趋化因子受体5(CCR5)的表达,以及MIP-1α中和抗体和分泌MIP-1α的模式细胞(6T-CEM)与HBMEC单层共同温育时ZO-1的分布变化。结果MIP-1α作用下,HBMEC单层紧密连接结构被破坏,通透性增加,引起HBMEC细胞CCR5受体的表达,MIP-1α中和抗体阻断6T-CEM细胞对HBMEC单层ZO-1分布的改变。结论MIP-1α可能通过CCR5改变HBMEC单层通透性促进T淋巴细胞穿过血脑屏障。
- 尚德淑马怡然赵伟东方文刚朱莉陈誉华
- 关键词：人脑微血管内皮细胞血脑屏障
- p53沉默对人鼻咽癌细胞株CNE2放射生物学特性的影响被引量：10
- 2008年
- 目的:研究p53沉默对鼻咽癌(NPC)细胞株CNE2放射敏感性的影响,探讨NPC中过表达的p53蛋白是否参与了放射诱导的细胞损伤和凋亡过程。方法:以稳定干扰p53基因表达的鼻咽癌细胞株CNE2sip53和对照细胞株CNE2/pSUPER为对象,采用集落存活分析法分析在不同放射剂量照射后的细胞存活分数(SF)并计算放射生物学参数D0,α,β和放射敏感比(SER);采用MTT法检测放射线对细胞生长的影响;采用流式细胞术检测放射线对细胞周期及凋亡的影响。结果:CNE2sip53细胞照射后的SF值高于CNE2/pSUPER细胞;与CNE2/pSUPER细胞相比,CNE2sip53细胞D0值和SF2值均增大,而α值,β值和SER均减小;放射线诱导CNE2sip53细胞凋亡及对细胞增殖的抑制作用弱于其对CNE2/pSUPER细胞的作用;放射线诱导CNE2/pSUPER细胞阻滞于G1期,而诱导CNE2sip53细胞阻滞于G2期。结论:稳定沉默鼻咽癌细胞中p53基因表达后,细胞对放射的敏感性降低,提示NPC细胞中过表达的p53蛋白参与了放疗诱导的NPC细胞损伤和凋亡过程。
- 石慧英孙懿易红冯雪萍陈主初肖志强
- 关键词：鼻咽癌放射生物学P53
