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多花黑麦草斑驳病毒基因组克隆与序列分析被引量：1: 2006年; 多花黑麦草斑驳病毒(Ryeg rass mottle virus,RGM oV)属南方菜豆花叶病毒属,是牧草病毒病的重要病原。利用反转录技术合成和扩增了RGM oV RNA的cDNA。将cDNA克隆在载体pUC18上,对RGM oV的基因组RNA作序列分析。RGM oV RNA是一个正义单链RNA分子,全长4 210个核苷酸,包含4个开放阅读框架5′非翻译区包含99个核苷酸,3′非翻译区有198个核苷酸。RGM oV ORF的结构和南方菜豆花叶病毒以及水稻黄斑病毒的结构一样。ORF1编码1个14.6 kD的蛋白质,这个蛋白质的功能还不清楚;ORF2的产物由947个氨基酸组成,分子量为103.6 kD;ORF3编码1个19.8 kD的蛋白质;ORF4编码1个25.6 kD的蛋白质,通过N末端氨基酸分析,确认ORF4为病毒外壳蛋白。RGM oV RNA的全序列以及染色体结构已被GenBank登录,登录号分别为AB040446和NC_003747。; 张飞云鸟山重光

鸭茅斑驳病毒CP基因克隆、序列分析及原核表达被引量：1: 2007年; 通过RT-PCR技术从鸭茅斑驳病毒(CfMV)总RNA中获得了外被蛋白(CP)基因,并将其连接到含有编码GST基因的表达载体pGEX-4T-1后,得到重组质粒pGEXCfMV-JANCP,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLys后,用IPTG诱导其基因表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析后证明:CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,获得的融合蛋白分子质量约为56．0 ku．; 董志张海龙张飞云; 关键词：原核表达 WESTERN印迹

侵染万寿菊的黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与序列分析被引量：4: 2007年; 应用ELISA的方法检测到感染了黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的万寿菊。根据已报道的CMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计并合成引物,提取万寿菊叶片总RNA为模板,进行cDNA合成和PCR扩增,得到约875bp的片断,与预期片断大小相符。序列分析显示:该分离物CMV-WSJ CP基因全长657bp,编码218个氨基酸,其核苷酸和氨基酸序列与CMV亚组Ⅱ的分离物有很高的同源率,分别达到98.33%～99.24%和98.63%～100%;与CMV亚组I分离物的同源率分别仅为74.43%～76.26%和77.17%～78.99%。因此,从万寿菊叶片上检测出的黄瓜花叶病毒分离物CMV-WSJ应归属于亚组Ⅱ。; 李晶晶邓召花曾静张金方张飞云; 关键词：万寿菊黄瓜花叶病毒外壳蛋白

四种广普性植物病毒高效mPCR检测方法的建立被引量：5: 2007年; 本研究建立了能同时检测出烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)的多重RT-PCR体系。TMV、CMV、PVX、PVY是四种广普性植物病毒,寄主范围广泛,并且常常发生复合侵染。本研究以上述四种病毒的CP基因部分序列设计引物,以反转录的cDNA为模板,建立多重RT-PCR反应体系,分别扩增出211～417bp的不同长度的基因片断,并通过序列测定来确认扩增序列的特异性。将反转录合成的cDNA进行浓度稀释,来对多重RT-PCR与单重RT-PCR的灵敏度进行比较,结果证明,多重RT-PCR体系能够同时快速检测这四种病毒,并且有很高的灵敏度。; 曾静张飞云李晶晶于银霞王法军; 关键词：多重RT-PCR 烟草花叶病毒黄瓜花叶病毒马铃薯X病毒

多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达: 根据已报道的多花黑麦草斑驳病毒(RMotV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,用RT-PCR的方法获得外壳蛋白基因后,再将其克隆至pGEX-4T-1中,SDS-PAGE和斑点杂交(Dot-blotting)表明:...; 张海龙田兆丰董志张晏如张飞云; 关键词：外壳蛋白原核表达包涵体; 文献传递

濒危植物翅果油树的研究进展及其开发前景被引量：14: 2005年; 翅果油树为我国特有的濒危植物,已列为国家二级重点保护树种.本文比较系统地综述了翅果油树的种质资源、生态学特性、植物生物学和生物化学以及资源开发和应用前景.同时对翅果油树濒危的可能原因进行了分析,并提出了保护措施.; 董志张飞云闫桂琴; 关键词：濒危植物翅果油树

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教育部科学技术研究重点项目(204006)