国家自然科学基金(30960501)
- 作品数：3 被引量：12H指数：3
- 相关作者：钱子刚谢晖郑妍研赵爽刘家佳更多>>
- 相关机构：云南中医学院复旦大学云南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 金铁锁β-香树素合酶cDNA的克隆、原核表达和功能鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的克隆金铁锁Psammosilene tunicoides三萜皂苷生物合成途径中的关建酶基因——β-香树素合酶全长cDNA,并对其进行表达和分析,为研究其在三萜皂苷合成途径的关键作用及次生代谢产物工程技术在金铁锁上的应用奠定基础。方法应用RT-PCR和RACE等方法,克隆金铁锁β-香树素合成酶基因全长,将目的片段转化大肠杆菌表达菌株BL21中,IPTG诱导表达,以2,3-氧化鲨烯为底物进行体外酶促,采用HPLC法鉴定产物。结果克隆得到金铁锁β-香树素合成酶基因,全长2 882 bp,ORF长2 284 bp,编码760个氨基酸。表达产物具有催化2,3-氧化鲨烯生成β-香树素合酶的活性。结论克隆所得的全长cDNA通过大肠杆菌表达β-香树素合酶,并能催化2,3-氧化鲨烯生成β-香树素,为金铁锁次生代谢工程研究提供了重要的基础。
- 刘家佳谢晖陈海丰钱子刚
- 关键词：金铁锁三萜化合物基因克隆原核表达
- 金铁锁毛状根诱导的初步研究被引量：6
- 2012年
- 目的:建立金铁锁毛状根诱导体系。方法:用发根农杆菌A4和C58C1菌株分别诱导金铁锁外植体获得毛状根,并对毛状根诱导过程中的多个因素进行优化。结果:金铁锁毛状根诱导的最佳条件为选择幼嫩茎段和幼嫩叶片作为外植体,在培养基1/2MS+AS 100μmoL/L上预培养2 d,用OD600=0.6的农杆菌浓度侵染15 min,在培养基1/2MS+AS 100μmoL/L上共培养3 d,转接至抑菌培养基1/2MS+Cef 300 mg/L进行毛状根的诱导。结论:已建立起金铁锁毛状根诱导体系,为后续金铁锁有效成分的提高及金铁锁基因工程的研究积累材料。
- 赵爽郑妍研谢晖钱子刚
- 关键词：金铁锁毛状根
- 濒危药用植物金铁锁的传粉生物学研究被引量：3
- 2012年
- 目的:揭示金铁锁开花规律与传粉特征,确定其繁育系统类型,为金铁锁引种繁育和濒危原因探寻提供基础依据。方法:开花动态的观察、杂交指数估算法、繁育系统检测法、种子萌发率和访花昆虫及其访花行为的观察。结果:杂交指数检测与繁育系统检测结果一致,金铁锁的繁育系统为同株自花传粉、同株异花传粉、异株异花传粉。金铁锁的花在结构上具有与异花授粉相适应的结构和机制,也有虫媒花的特征。金铁锁的盛花期在雨季,其访花昆虫在雨季少见或不传粉,从而直接影响了结实率。结论:金铁锁为混合交配繁育系统,为虫媒异交植物,同时可以自花授粉,其繁殖方式为近交繁殖。
- 尹子丽刘小莉李安华钱子刚张洁
- 关键词：金铁锁传粉
