国家自然科学基金(3087326)
- 作品数：10 被引量：89H指数：6
- 相关作者：马静南亚昀马亮王宗仁刘镘利更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学解放军第302医院更多>>
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- 菟丝子提取物对肾阳虚大鼠睾丸P450arom、CYP19表达及性激素和精子的影响被引量：15
- 2012年
- 目的:观察菟丝子提取物作用于腺嘌呤诱导的肾阳虚不育大鼠睾丸中P450arom、CYP19的表达、激素含量及精子数量的变化,探讨肾虚引起的雄性不育的病理机制及菟丝子提取物的作用。方法:30只雄性大鼠随机分为3组:正常对照组、模型组、治疗组,每组10只。用腺嘌呤150mg/(kg.d),分别给模型组及治疗组大鼠灌胃30天,诱导肾阳虚不育模型。诱导模型成功后,模型组用生理盐水灌胃30天;用菟丝子提取物200mg/(kg.d)给治疗组灌胃30天;用免疫组化法和Western-blot检测P450arom及CYP19在大鼠睾丸中的表达;用扫描电镜及透射电镜观察曲细精管中精子数量的变化;精子自动检测仪扫描观察精子的密度;放射免疫的方法检测FSH、LH、T、E2含量。结果:CYP19在大鼠睾丸的间质细胞、长形精子细胞中均有表达,其免疫阳性物质位于间质细胞质和长形精子细胞的头、尾部;P450arom表达于睾丸间质细胞的细胞质中。模型组大鼠睾丸CYP19、P450arom则明显低于正常对照组(P<0.05),治疗组CYP19、P450arom的表达明显高于模型组(P<0.05),正常对照组与治疗组之间无显著差异(P>0.05);正常对照组及治疗组曲细精管中的精子数量及FSH、LH、T和E2的含量明显高于模型组,正常对照组与治疗组之间无显著差异(P>0.05)。结论:P450arom及CYP19在睾丸表达的异常可能与肾虚引起的雄性大鼠不育有关,菟丝子提取物能够增加肾虚大鼠睾丸中P450arom、CYP19的表达,提高精子的数量及FSH、T、E2含量,为进一步探讨P450arom及CYP19在雄性肾虚不育模型大鼠精子生成和成熟中的作用及菟丝子提取物的作用机制提供了实验依据。
- 南亚昀王宗仁卢兹凡刘镘丽马亮李蕊马静
- 关键词：肾阳虚精子数量激素含量P450AROMCYP19
- 金匮肾气丸对肾阳虚大鼠睾丸中TGF-β_1表达、精子数量及活率的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:观察金匮肾气丸作用于腺嘌呤诱导的肾阳虚不育大鼠睾丸中精子密度、精子活率的变化以及TGF-β1的表达。方法:雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组和治疗组。诱导肾阳虚不育模型成功后,模型组灌胃生理盐水,治疗组灌胃金匮肾气丸浓缩剂,称重造模后观察各组大鼠体质量、检测大鼠睾丸中TGF-β1的表达水平、检测精子密度及活率。结果:造模后模型组大鼠体质量与对照组比较明显减轻(P<0.05),精子密度显著降低(P<0.05),精子活率显著减弱(P<0.05),大鼠睾丸TGF-β1表达显著高于对照组(P<0.05),正常对照组与治疗组比较无显著性差异(P>0.05);与模型组相比,治疗组大鼠体质量逐渐恢复(P<0.05),精子密度显著提高(P<0.05),精子活率明显增强(P<0.05),TGF-β1表达与对照组比较显著下调(P<0.05),正常对照组与治疗组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:金匮肾气丸能够显著增加肾阳虚大鼠的体质量、精子密度与活率,降低肾阳虚大鼠睾丸中TGF-β1表达。
- 陈艳秋南亚昀张玉芬王南丁马亮马静
- 关键词：金匮肾气丸肾阳虚精子密度精子活率
- TGF-β1对大鼠睾丸Leydig细胞间连接蛋白43介导缝隙连接通讯功能的影响被引量：10
- 2012年
- 目的:观察转化生长因子TGF-β1对成年大鼠睾丸Leydig细胞间连接蛋白Cx43表达以及由Cx43介导的缝隙连接细胞间通讯(GJIC)功能的影响,旨在探讨TGF-β1对Leydig细胞的影响是否与其改变细胞间GJIC功能相关。方法:将原代培养纯化的Leydig细胞分为6组:实验组分别以1、2、5、10 ng/ml的TGF-β1处理细胞20 h,空白对照组以含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液处理细胞,部分实验中以GJIC抑制剂甘珀酸(Carbenox-olone)处理细胞作为阳性对照组。采用免疫荧光法和Western印迹观察Cx43在细胞中的定位和表达变化,用荧光漂白恢复实验(FRAP)检测细胞间GJIC功能的改变。结果:Cx43表达呈斑点状散在分布于Leydig细胞的胞质和胞膜中,TGF-β1处理20 h后,Cx43在胞质中的表达强度随着TGF-β1浓度的增加较空白对照组明显增强,而其在胞膜中的表达则无明显改变。Western印迹结果显示磷酸化状态的Cx43随着TGF-β1浓度增加表现出较空白对照明显增强的趋势(P<0.05),而非磷酸化状态则无显著差异。FRAP结果显示经5 ng/ml TGF-β1作用20 h后细胞内荧光强度较空白对照明显减弱,具有显著性差异(P<0.01),且其平均荧光恢复率仅为(43.58±1.87)%。结论:TGF-β1可显著下调Leydig细胞间的GJIC功能,这种抑制作用可能通过增加其连接蛋白Cx43在细胞质中的表达,提高其磷酸化水平来实现。
- 刘镘利张志红王宗仁马静
- 关键词：LEYDIG细胞连接蛋白43缝隙连接细胞间通讯
- 温阳生精汤含药血清对肾阳虚大鼠睾丸间质细胞中雌激素分泌的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察温阳生精汤含药血清对腺嘌呤致雄性肾阳虚不育大鼠睾丸间质细胞中雌二醇(es-tradiol,E2)合成以及影响其合成的芳香化酶(cytochrome P450aromatase,P450arom)活性、其编码基因CYP19表达的影响,从蛋白和mRNA水平探讨温阳生精汤含药血清治疗肾阳虚不育的机制。方法将实验大鼠随机分为4组,每组5只,即正常组及温阳生精汤高、中、低浓度组。各组大鼠分别以生理盐水和高、中、低浓度中药连续灌胃10天。末次灌胃给药2h后,心脏采血,离心后分离血清。从肾阳虚大鼠体内分别分离并纯化睾丸间质细胞,经鉴定后原代培养,随机分为5组,即空白对照组,模型组,中药高、中、低浓度(1.2、1.0、0.8g/mL)组,用放射免疫法测定细胞培养液中E2含量,氚水释放实验检测P450arom在细胞中的活性,同时用Western blot法和荧光定量PCR法分别测定CYP19蛋白和mRNA表达。结果与空白对照组比较,模型组中间质细胞上清中E2的含量明显减少,同时伴随P450arom活性抑制,以及CYP19蛋白和mRNA表达的显著减少(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,经温阳生精汤含药血清干预后可显著增加间质细胞中E2合成量,上调P450arom活性,同时在蛋白和mRNA水平上调细胞中CYP19表达,并具有部分剂量依赖性(P<0.01,P<0.05)。结论温阳生精汤含药血清可以有效提高肾阳虚大鼠睾丸间质细胞中E2的合成,并可能部分通过上调P450arom活性,提高CYP19基因表达实现,这可能是其治疗男性肾阳虚不育的机制之一。
- 刘镘利王宗仁南亚昀马亮马静
- 关键词：中药含药血清间质细胞芳香化酶CYP19基因肾阳虚
- 缬沙坦联合吲达帕胺治疗高血压的效果观察被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨缬沙坦和吲达帕胺治疗高血压的临床效果,为临床治疗提供可借鉴的方法。方法:选取2012年4月-2014年1月在我院接受治疗的87例高血压患者的临床资料,根据治疗方式的不同将所选患者分为缬沙坦组、吲达帕胺组和联合用药组,每组27例。缬沙坦组患者采用口服缬沙坦单药治疗,吲达帕胺组患者采用口服吲达帕胺单药治疗,联合用药组采用缬沙坦+吲达帕胺缓释片治疗。观察三组患者治疗前后的血压变化、治疗总有效率及不良反应的发生情况。结果:治疗后,三组患者的血压均不同程度降低(P<0.05);联合用药组患者血压下降幅度明显高于缬沙坦单药治疗组和吲达帕胺单药治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05)。联合用药组患者治疗的总有效率明显高于缬沙坦单药治疗组和吲达帕胺单药治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05)。三组患者不良反应的发生率无显著差异(P>0.05)。结论:缬沙坦胶囊与吲哒帕胺缓释片联合应用治疗高血压具有显著的临床意义,能够有效的控制患者的血压,值得推广采用。
- 周大伟杨兰师小娟周琳刘逸宁郭晓东
- 关键词：高血压吲达帕胺
- 金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育模型大鼠精子质量与性激素含量的影响被引量：6
- 2011年
- 目的:观察金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育大鼠精子质量及性激素含量的影响。方法:30只SD大鼠随机分为空白对照组、腺嘌呤组、金匮肾气丸组。应用自动精子质量分析仪检测实验大鼠的精子质量(精子密度、活率及活动度);同时应用放射免疫法测定血清睾酮(T)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的含量;透射电镜观察实验大鼠睾丸组织精子鞭毛密度,支持细胞、精原细胞、初级精母细胞等结构。结果:与腺嘌呤组比较,金匮肾气丸组大鼠肾阳虚症状显著改善,精子密度、活率及活动度明显提高(P<0.05);金匮肾气丸组大鼠血清T含量明显提高(P<0.05),LH、FSH含量降低(P<0.05);电镜下金匮肾气丸组大鼠精子数量明显增多,大鼠睾丸组织受损的支持细胞明显改善。结论:金匮肾气丸可提高腺嘌呤致不育模型大鼠的精子质量,其机制之一可能是通过提高血清中T的含量及保护受损的支持细胞这一间接作用实现的。
- 马亮贾敏南亚昀刘镘利王宗仁马静
- 关键词：金匮肾气丸腺嘌呤不育肾阳虚精子
- 不同剂量腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠模型实验研究被引量：19
- 2010年
- 目的探讨不同剂量腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠模型的量效关系。方法将20只成年雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组,腺嘌呤低(每日100 mg/kg)、中(每日150 mg/kg)、高(每日200 mg/kg)剂量组,每组5只。用腺嘌呤给予大鼠灌胃30 d,诱导肾阳虚不育模型。观察大鼠体征、血清性激素水平、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serumcreatinine,SCr)及睾丸、肾脏的形态学变化。结果与正常对照组相比,腺嘌呤各剂量组睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)显著降低(P<0.05),卵泡刺激素(follicle sti mulating hormone,FSH)、促黄体激素(luteotrophic hormone,LH)水平无显著性变化(P>0.05),SCr、BUN水平显著升高(P<0.05)。腺嘌呤各剂量组大鼠睾丸均出现生精小管中生精细胞排列紊乱,细胞疏松,精曲小管之间的结缔组织增多,间质细胞数量明显减少,管腔内生殖上皮变薄,精子数目减少,大部分管腔中可见脱落的精子细胞;肾小管内有大量结晶物沉着,且有异物肉芽肿形成,占据整个管腔,肾小管上皮肿胀、坏死、脱落,肾小管显著扩张成囊状,皮质、髓质间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,可见纤维素样坏死。结论低剂量腺嘌呤可导致大鼠睾丸形态学改变,而且肾脏的损害程度较轻,可成功地诱导肾阳虚不育模型。
- 李蕊刘曼丽田心马亮南亚昀周大伟李臻马静
- 关键词：不育症肾阳虚腺嘌呤睾丸
- 动态增强磁共振扫描与超声弹性成像对乳腺癌的诊断价值探讨被引量：20
- 2014年
- 目的:探讨动态增强磁共振成像扫描与超声弹性成像对乳腺癌良恶性肿瘤的诊断价值,为临床诊断提供影像学依据。方法:回顾性分析2009年10月至2013年5月在我院经穿刺或手术病理证实为乳腺癌的59例患者的临床资料,患者术前均行超声与动态增强MR检查。依据病理组织活检和临床随访分别评价动态增强MR和UE对乳腺癌诊断的准确性。结果:DCE-MRI检测共发现病灶59个,55个初步诊断乳腺恶性肿瘤(BI-RADS 4-5),4个诊断为良性(BI-RADS 3),诊断准确率为93.22%(55/59)。UE对59个病灶进行评分,54个评分为乳腺恶性肿瘤,5个评分为良性,诊断率为91.53%(54/59)。UE检测乳腺癌的敏感性明显低于DCE-MRI及DCE-MRI+UE,DCE-MRI检测乳腺癌的特异性明显低于UE及DCE-MRI+UE,差异具有统计学意义(P<0.05)。DCE-MRI+UE诊断乳腺癌的准确率为96.61%(57/59),明显高于DCE-MRI或UE单独检测的准确率(P<0.05)。结论:动态增强MR诊断乳腺癌的敏感性较高,而超声弹性成像的特异性较好,两者联合可提高诊断准确率,对乳腺癌的早期诊断具有重要的临床应用价值。
- 谢雁黄敏华左拥军郭晓东
- 关键词：乳腺癌动态增强磁共振超声弹性成像
- P450arom、CYP19及TGF-β1在雄性肾阳虚不育大鼠睾丸中的表达被引量：5
- 2010年
- [目的]观察限速酶芳香化酶(P450arom)、芳香化酶基因(CYP19)和转化生长因子(TGF-β1)在腺嘌呤诱导的雄性肾阳虚不育大鼠睾丸中的表达,探讨肾虚引起的雄性不育的病理机制。[方法]20只雄性大鼠随机分为4组:正常对照组,模型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,5只/组。用腺嘌呤100、150、200mg(/kg·d),分别给模型Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组大鼠灌胃30d,诱导肾阳虚不育模型。用免疫组化浓缩型免疫组化染色法(SABC法),测定P450arom、CYP19和TGF-β1在实验大鼠睾丸中的表达。[结果]CYP19在大鼠睾丸的间质细胞、长形精子细胞中均有表达;P450arom和TGF-β1在睾丸的间质细胞有表达;其免疫阳性物质均位于细胞质内。模型组大鼠睾丸中TGF-β1的表达明显高于正常对照组(P<0.05),而CYP19、P450arom的表达明显低于正常对照组(P<0.05);各模型组之间,TGF-β1、CYP19、P450arom的表达无显著性差异(P>0.05)。[结论]P450arom、CYP19及TGF-β1在睾丸表达的异常可能与肾虚引起的雄性大鼠不育有关。
- 李蕊刘曼丽田心谢娟周大伟李臻马静
- 关键词：肾阳虚睾丸P450AROMCYP19TGF-Β1
- 金匮肾气丸对腺嘌呤致不育大鼠精子质量与肾脏功能的影响被引量：11
- 2011年
- 目的:观察金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育大鼠精子质量及肾功能的影响。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、金匮肾气丸组。应用自动精子质量分析仪检测实验大鼠的精子质量(精子密度、活率及活动度);应用放射免疫法测定血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)含量;自动生化分析仪分析血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)含量;HE染色、光镜观察肾脏组织变化,透射电镜观察实验大鼠睾丸中精子鞭毛密度。结果:金匮肾气丸能明显增加大鼠精子密度、活率及活动度,提高大鼠血清T含量,降低E2,LH,FSH含量;降低血清BUN和Scr含量。结论:金匮肾气丸可提高模型大鼠的精子质量,改善肾功能。其提高精子质量可能是通过刺激间质细胞产生T及降低异常升高的E2这一间接作用实现的。
- 马亮刘华剑南亚昀刘镘利王南丁陈艳秋王宗仁马静
- 关键词：腺嘌呤不育金匮肾气丸精子
