辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(2008862)
- 作品数：11 被引量：17H指数：3
- 相关作者：刘岿然张淑兰赵敏杨雨冯天达更多>>
- 相关机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ARHI和环氧化酶-2蛋白在子宫颈腺癌组织中的表达及其意义被引量：2
- 2012年
- 目的探讨ARHI蛋白和环氧化酶-2（COX-2）蛋白在子宫颈腺癌发生中的作用及其相互关系。方法采用免疫组织化学法检测40例子宫颈腺癌及30例慢性子宫颈炎组织中。ARHI蛋白及COX-2蛋白的表达情况。结果ARHI在40例子宫颈腺癌组织阳性率为50．0％（20／40），低于慢性子宫颈炎患者子宫颈组织阳性率90．0％（27／30），差异有统计学意义（X^2=12．43，P〈0．05）；COX-2在40例子宫颈腺癌组织阳性率82．5％（33／40），高于慢性子宫颈炎患者子宫颈组织阳性率0（0／30），差异有统计学意义（x^2=46．16，P〈0．05）；ARHI蛋白阳性表达率与子宫颈腺癌临床分期（x^2=3．96，P〈0．05）及组织分化程度高低有关（x^2=7．04，P〈0．05）。COX-2蛋白与子宫颈腺癌组织分化程度有关（x^2=7．04，P〈0．05），与临床分期无关（P〉0．05）；ARHI蛋白和COX-2蛋白与淋巴结有无转移均无关（P均〉0．05）；ARHI蛋白和COX．2蛋白表达有关联（r=0．31，P〈0．05）。结论子宫颈腺癌的发生与ARHI基因失活和COX-2蛋白表达异常有关，两者可能协同作用参与子宫颈腺癌的发生。
- 赵敏刘岿然
- 关键词：COX-2蛋白子宫颈腺癌免疫组织化学
- NF-κB在Caski细胞DEK基因沉默中的作用研究
- 2011年
- 目的研究NF-κB在宫颈癌DEK基因沉默中作用。方法实验分转染psiRNA-hHDEK组、转染psiRNA-hH1neo组及未转染组,采用免疫细胞化学染色和western blot方法,观察三组细胞NF-κB的表达情况。结果 psiRNA-hHDEK转染组CaSki细胞NF-κB蛋白表达明显增加;经显微图像分析测定转染psiRNA-hHDEK组阳性细胞百分率明显高于未转染组[(74.2±8.1)%vs(11.7±2.6)%]和转染psiRNA-hH1neo组[(74.2±8.1)%vs(21.6±3.9)%]。结论 DEK基因沉默后CaSki细胞内NF-κB表达上调,DEK负性调控宫颈癌细胞中NF-κB表达,从而发挥其衰老抑制基因及凋亡抑制基因的作用。
- 刘岿然王昌霆张淑兰
- 关键词：NF-ΚB基因沉默
- 针对DEK原癌基因的siRNA真核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的以 DEK基因为靶基因,针对其特定核苷酸序列,构建psiRNA-hHDEK表达载体,转染宫颈癌CaSki细胞,观察DEK siRNA对DEK基因mRNA转录水平和蛋白表达水平的靶向沉默效应。方法根据DEK核苷酸序列,利用软件设计出针对DEK位点的特异性小干扰RNA,克隆至siRNA真核表达载体psiR-NA-hHl neo中,构建能在真核细胞中表达的靶向DEK基因的siRNA重组质粒;应用脂质体介导重组质粒转染宫颈癌CaSki细胞株,用RT-PCR和Western Blot检测转染后DEK mRNA和蛋白表达。结果筛选出阳性克隆,抽提质粒,经限制性内切酶AseI酶切鉴定及测序分析证实合成的siRNA序列正确,并已准确克隆入psiRNA-hHl neo载体中。DEK特异性siRNA载体构建成功。经RT-PCR和Western Blot测定分析,转染质粒psiRNA-hHDEK CaSki细胞组DEK mRNA和蛋白的表达明显减少。结论成功构建了DEK特异性siRNA表达载体。设计构建的真核表达载体可以特异性干扰DEK原癌基因的表达,为进一步研究DEK基因的功能奠定了基础。
- 刘岿然杨雨冯天达张淑兰
- 关键词：宫颈癌DEKRNA干扰转染
- DEK基因沉默对宫颈癌CaSki细胞增殖和凋亡影响的研究被引量：5
- 2011年
- 目的:通过观察DEK基因沉默后对CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡影响,探讨DEK原癌基因siRNA对宫颈癌细胞的影响和机制。方法:将DEK siRNA真核表达载体转入CaSki细胞,转染48 h后,采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期改变情况。结果:与对照组和未转染组相比,转染psiRNA-hHDEK组CaSki细胞增殖的抑制率和凋亡率均增高,分别为53.2%和(13.84±3.19)%,P值分别为0.038和0.002;psiRNA-hHDEK转染组G0/G1期细胞比率(82.65±5.23)较对照组(74.36±7.49)和未转染组(70.25±5.11)增多,差异有统计学意义,P=0.003;psiRNA-hH-DEK转染组细胞增殖指数(17.35%)明显低于未转染组(29.75%)和对照组细胞(25.64%),差异有统计学意义,P=0.02。结论:DEK基因抑制可能诱导CaSki细胞凋亡,并能影响肿瘤细胞内DNA的复制和合成,抑制细胞的正常分裂,从而抑制细胞增殖。
- 刘岿然赵敏张淑兰
- 关键词：宫颈肿瘤CASKI细胞比色法
- 染色体遗传不稳定性在宫颈癌病因中的研究被引量：1
- 2010年
- 目的分析宫颈癌组织3号染色体的杂合性丢失(LOH)、微卫星不稳定性(MI)及其与临床病理参数之间的关系,探讨遗传不稳定性在宫颈癌发生发展中的作用。方法选择D3S1234、D3S1300、D3S1481三个微卫星位点,应用PCR-聚丙烯酰胺-银染技术对67例宫颈癌组织进行杂合性缺失和微卫星不稳定性分析。结果 67例宫颈癌中有48例(71.6%)至少有一个位点LOH阳性,有25例(37.1%)至少有一个位点MI阳性;LOH阳性率Ⅲ、Ⅳ期大于Ⅰ、Ⅱ期,鳞癌明显高于腺癌,差异均有统计学意义(P<0.05),在高、中、低分化癌中差异无统计学意义(P>0.05);MI阳性率Ⅲ、Ⅳ期大于Ⅰ、Ⅱ期,腺癌高于鳞癌,差异有统计学意义(P<0.05),低分化癌高于中、高分化癌,差异有统计学意义(P<0.05)。MI阳性者均为LOH阳性。结论 3号染色体短臂可能存在宫颈癌相关抑癌基因,LOH及MI是宫颈癌发生发展中的重要事件。
- 刘岿然赵敏张淑兰
- 关键词：宫颈肿瘤杂合子丢失微卫星不稳定性
- DEK基因沉默对宫颈癌CaSki细胞衰老的影响
- 2011年
- 目的通过DEK基因沉默对CaSki细胞生长、衰老的影响,探讨DEK原癌基因在宫颈癌发生中的作用。方法将DEKsiRNA真核表达载体转入CaSki细胞,观察转染后48 h细胞形态学变化,测定细胞生长曲线、SA-β-半乳糖苷酶细胞化学染色鉴定细胞衰老。结果与未转染和转染psiRNA-hH1neo组相比,转染psiRNA-hHDEK组CaSki细胞的生长速度明显降低;psiRNA-hHDEK转染组SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞百分率(83.2±9.46)%高于转染psiRNA-hH1neo组(18.9±6.46)%和未转染CaSki组(23.1±7.28)%,结果具有统计学意义(P<0.05)。结论 DEK基因沉默后CaSki细胞发生衰老,证明DEK基因在宫颈癌中是衰老抑制基因。
- 刘岿然赵敏王昌霆张淑兰
- 关键词：基因沉默细胞衰老
- psiRNA—hHDEK的构建及其对CasKi细胞生物学特性影响的研究
- 2011年
- 目的观察DEK基因沉默对宫颈癌CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡、衰老的影响，为探索防治人类宫颈癌的新方法提供依据。方法根据siRNA设计原则和Genebank中DEK核苷酸序列，利用软件设计出针对DEK位点的特异性小干扰RNA，克隆至siRNA真核表达载体psiRNA-hHlneo中，应用脂质体介导重组质粒转染宫颈癌CaSki细胞株，用RT-PCR和Western blot检测转染后DEKmRNA和蛋白表达，转染后48hMTr法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期改变、SA-β-半乳糖苷酶细胞化学染色鉴定细胞衰老。结果转染质粒psiRNA—hHDEK组DEKm RNA及蛋白的表达明显减少（0．28±0．02），DEK基因沉默后CaSki细胞增殖能力下降，细胞周期阻抑，细胞凋亡率增加，衰老细胞增多。结论成功构建表达DEK siRNA的真核表达质粒psiRNA-hHDEK，并能够有效沉默CaSki细胞中DEK基因表达。DEK基因沉默后能够诱导CaSki细胞凋亡和细胞衰老。DEK基因在宫颈癌发生和演变中发挥重要作用，其既是衰老抑制基因，又是凋亡抑制基因。
- 刘岿然杨雨赵敏张淑兰
- 关键词：癌基因基因沉默RNA干扰
- COX-2 mRNA在宫颈腺癌组织中的表达及临床意义被引量：2
- 2010年
- 目的 检测COX-2 mRNA在正常宫颈及宫颈腺癌组织中的表达情况,探讨其在宫颈腺癌发病机制中的作用.方法 采用RT-PCR方法,检测COX-2在36例宫颈腺癌组织及15例正常宫颈组织中的表达.结果 宫颈腺癌组织中COX-2-mRNA的阳性检出率为55.6%,明显高于正常宫颈组织20.0%,差异有统计学意义（P＜0.05）,COX-2 mRNA的表达随宫颈腺癌期别及病理分级的升高而增加,但各期别和各病理分级之间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 宫颈腺癌组织中存在COX-2过表达,COX-2的过表达与宫颈腺癌的发生有关.
- 刘岿然赵敏张淑兰
- 宫颈癌组织中Hpa与DEK基因表达的相关性研究被引量：3
- 2011年
- 目的研究DEK与Hpa基因在宫颈癌组织中的表达及二者的相关性。方法采用免疫组织化学方法对宫颈癌石蜡标本45例、宫颈上皮内瘤样病变（CIN）45例、正常宫颈组织10例进行Hpa及DEK基因检测。结果（1）DEK在宫颈癌组织、CIN、正常宫颈组织中阳性表达率分别为88．9％、24．4％、10．0％。宫颈癌组织中DEK阳性表达率高于CIN组织和正常组织（X2=38．05，P〈0．01；）（2=5．77，P〈0．05）；Hpa基因在宫颈癌组织、CIN及正常宫颈组织中的阳性表达率分别为75．6％、24．4％和10．0％，宫颈癌组织中Hpa阳性表达率高于CIN组织和正常组织（x2=31．69，12．94，P〈0．01）。（2）在宫颈癌组织中DEK基因表达与Hpa基因表达呈正相关（r=0．617，P=0．001）。结论宫颈癌组织及CIN组织中DEK、Hpa的表达共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生和发展。
- 刘岿然杨雨张淑兰
- DEK原癌基因在宫颈癌组织中的作用研究被引量：3
- 2010年
- 目的从mRNA及蛋白水平检测DEK在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌组织中的表达情况,探讨其在宫颈癌发病机制中的作用。方法采用RT-PCR及western-blot方法,检测DEK在35例宫颈癌组织、30例宫颈上皮内瘤变(CIN)及20例正常宫颈组织中的表达。结果宫颈癌组织中DEK mRNA和蛋白的阳性检出率分别为65.7%和71.4%,明显高于宫颈上皮内瘤变(分别为10.0%和16.7%)和正常宫颈组织(分别为5.0%和10.0%),差异具有显著性(P<0.05)。结论宫颈癌组织中存在着DEK原癌基因的激活,DEK基因激活和宫颈癌发生有关。
- 刘岿然赵敏冯天达张淑兰
- 关键词：蛋白质印迹宫颈癌
