World Health Organization(991051)
- 作品数：6 被引量：33H指数：4
- 相关作者：朱荫昌徐明王晓婷许永良司进更多>>
- 相关机构：江苏省血吸虫病防治研究所哈佛大学南京医科大学更多>>
- 发文基金：World Health Organization国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 免疫刺激序列增强日本血吸虫DNA疫苗的免疫保护作用被引量：9
- 2005年
- 目的 探讨免疫刺激序列在日本血吸虫Mr 2 3 0 0 0膜蛋白 (SjC2 3 )DNA疫苗诱导BALB/c小鼠抗血吸虫感染中的作用。 方法 将SjC2 3基因片段克隆到增加了免疫刺激序列的真核表达质粒 pcDNA3 1 CpG中 ,构建pcDNA3 1 SjC2 3 /CpG。 40只雌性BALB/c小鼠随机分为 4组 ,① pcDNA3 1对照组 ;②pcDNA3 1 SjC2 3组 ;③ pcD NA3 1 CpG组 ;④ pcDNA3 1 SjC2 3 /CpG组。每鼠经两侧股四头肌注射质粒DNA共 10 0 μg ,隔 2周加强免疫 1次 ,共 3次。末次免疫后 4周经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴 45条 /鼠 ,45d后计数成虫及肝脏虫卵数。首次免疫前和感染前 2d分别经尾静脉采血 ,检测IgG及IgG1、IgG2a。末次免疫后 3周取小鼠脾细胞 ,检测经伴刀豆球蛋白和SjC2 3重组蛋白刺激后小鼠白细胞介素 2 (IL 2 )、白细胞介素 4(IL 4)和γ干扰素 (IFN γ)。用51Cr释放法检测经SjC2 3重组蛋白刺激后脾细胞对小鼠淋巴瘤细胞的杀伤作用。 结果 ②组和④组减虫率分别为 2 8 1%和 3 5 1% ,减卵率分别为 2 1 6%和 2 6 5 %。④组减虫率显著高于②组 (P <0 0 5 )。这两组均检测到特异性IgG ,IgG2a/IgG1比值分别为 10 1和 12 2。脾细胞经伴刀豆球蛋白和SjC2 3重组蛋白刺激后的IL 2水平 ,②组较①组、④组较③组均有升高。②组脾?
- 赵松朱荫昌D.A.Harn司进任建功殷旭仁何伟梁幼生徐明许永良
- 关键词：免疫刺激序列PCDNA3DNA疫苗日本血吸虫免疫保护作用
- 日本血吸虫TPI DNA疫苗基因密码子优化增强免疫保护作用的研究(英文)被引量：4
- 2009年
- 目的研究日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶基因(TPI基因)密码子优化后的DNA疫苗增强免疫保护作用的效果。方法60只BALB/c雌性小鼠随机均分为A(pcDNA3.1空质粒对照组)、B(pcDNA3.1-TPI组)、C(pcDNA3.1-TPI-mHSP70组)、D(pcDNA3.1-TPI.opt组)、E(pcDNA3.1-TPI.opt-mHSP70组)等5组。每鼠肌肉注射相应的纯化质粒DNA100μg,每隔3周免疫1次,共3次。末次免疫后4周,每鼠经腹部皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴(40±1)条,42d后剖杀,计数成虫及肝脏虫卵数。首次免疫前2d及感染前2d经尾静脉采血,检测IgG及IgG1、IgG2a的水平。攻击感染前2d取脾脏,制备单个脾细胞,用流式细胞仪检测白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-5、γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子(TNF)的水平。结果B、C、D、E组小鼠血清均检测到特异性IgG及IgG2a与IgG1抗体,IgG2a/IgG1的比值分别为1.73、2.06、2.44、3.09。D、E组的IL-2、IFN-γ、TNF含量较B、C组均有不同程度地升高。D、E组减虫率分别为36.03%、39.03%,减卵率分别为41.71%、46.85%,均显著高于B、C组(P<0.01)。结论TPI基因密码子优化后的DNA疫苗相对于未优化TPIDNA疫苗能诱导小鼠产生较高的免疫保护作用,且诱导宿主产生较强的,及以Th1为主的免疫应答。
- 鲁飞朱荫昌戴洋王晓婷唐建霞张纯
- 关键词：日本血吸虫密码子优化免疫保护
- 体内电穿孔增强日本血吸虫核酸疫苗免疫保护作用的研究
- 2008年
- 目的探讨体内电穿孔技术增强日本血吸虫核酸疫苗的免疫保护效果。方法分别大量制备质粒pcDNA3.1-SjC23、pcDNA3.1-SjCTPI、pcDNA3.1-(CDR3)6和重组蛋白SjC23-HD、SjCT-PI与NP30。上述3种质粒DNA以等量混合后即为鸡尾酒式DNA疫苗,3种蛋白以等量混合后即为鸡尾酒式蛋白疫苗。70只BALB/c小鼠随机分为A、B、C、D、E5组,每组14只。A组为自然感染组;B组(电脉冲空质粒对照组)每只小鼠分别在第0、3、6周经股四头肌注射100μlpcDNA3.1,每次注射时辅以体内电穿孔;C组(电脉冲空质粒+混合蛋白对照组)空质粒免疫及体内电穿孔同B组,但于第9周每鼠经背部皮下多点注射100μl混合蛋白疫苗+100μl福氏完全佐剂(FCA);D组(电脉冲混合DNA组)每只小鼠分别在第0、3、6周经股四头肌注射100μl混合DNA疫苗,每次免疫时辅以体内电穿孔;E组(电脉冲混合DNA+混合蛋白组)混合DNA免疫及体内电穿孔同D组,但于第9周每鼠经背部皮下多点注射100μl混合蛋白疫苗+100μlFCA。DNA免疫组末次免疫后4周,蛋白加强组末次免疫后2周,所有小鼠同时经腹部皮肤感染(40±1)条尾蚴。攻击感染后42d剖杀小鼠,计数成虫及肝脏虫卵数。首次免疫前2d及感染前2d分别经尾静脉采血,分离血清检测IgG抗体水平、抗体亚类IgG1及IgG2a,并取小鼠脾脏制备单个脾细胞,检测细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的水平。结果C、D组和E组的减虫率分别为18.09%、45.00%和57.09%,D组和E组的减虫率均显著高于C组(P均<0.01),且E组的减虫率高于D组(P<0.05);C、D组和E组的减卵率分别为12.49%、50.88%和59.26%,D组和E组的减卵率均显著高于C组(P均<0.01),且E组的减卵率高于D组(P<0.05)。C、D、E3组小鼠血清都检测到特异性IgG抗体,抗体亚类IgG2a/IgG1比值分别为0.394、3.518、0.914。D、E2组小鼠IL-2、IFN-γ含量较对照组均有明显升高,IL-4则无明显差异。结论体内电穿孔技术可显著提高日本血吸虫核酸疫
- 戴洋朱荫昌唐建霞王晓婷鲁飞章辉徐明许永良管晓虹
- 关键词：日本血吸虫联合免疫
- 日本血吸虫多价DNA疫苗免疫保护作用的研究被引量：11
- 2006年
- 目的研究日本血吸虫多价DNA疫苗诱导BALB/c小鼠的免疫保护作用。方法65只BALB/c雌性小鼠随机分为5组,各组小鼠分别肌肉注射纯化的质粒DNApcDNA3.1(对照组)、pcDNA3.1-TPI(TPI)、pcDNA3.1-(CDR3)6[(CDR3)6]、pcDNA3.1-TPI-linker-(CDR3)6(TLC)和pcDNA3.1-(CDR3)6-linker-TPI(CLT),每鼠100μg。每隔2周加强免疫1次,共3次。末次免疫后4周每鼠经腹部皮肤攻击感染(45±1)条日本血吸虫尾蚴,45d后剖杀,计数成虫及肝脏虫卵数。首次免疫前2天及感染前2天经尾静脉采血检测IgG抗体水平、抗体亚类IgG1、IgG2a。末次免疫后2周取小鼠脾脏制备单个脾细胞,检测细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的水平。结果TPI、TLC组和CLT组小鼠血清都检测到特异性IgG抗体,抗体亚类IgG2a/IgG1的比值分别为1.71、2.71和4.70,而其他两组则未检测到特异性IgG抗体;TPI、TLC组和CLT组小鼠的IL-2、IFN-γ较对照组均有不同程度的升高,IL-4则无明显差异。多价DNA疫苗TLC组和CLT组减虫率分别达到37.30%、39.09%,减卵率分别为41.61%、49.54%,均显著高于TPI组和(CDR3)6组(P均<0.05)。结论多价DNA疫苗相对于单价DNA疫苗能诱导小鼠产生较高的免疫保护作用,且诱导宿主产生较高的以Th1为主的免疫应答。
- 王晓婷朱荫昌管晓虹D.A.Harn司进赵松徐明殷旭仁梁幼生何伟
- 关键词：日本血吸虫多价DNA疫苗免疫保护作用
- 日本血吸虫SjC23 DNA疫苗基因枪免疫小鼠诱导免疫保护作用的研究被引量：4
- 2004年
- 目的 研究日本血吸虫中国大陆株 2 3k Da膜蛋白 DNA疫苗基因枪免疫诱导 BAL B/ c小鼠产生的抗血吸虫感染作用。方法 6 0只雌性 BAL B/ c小鼠随机分为 6组 :pc DNA3.1组 (对照组 ) ,每只小鼠用基因枪经腹部皮肤免疫 pc DNA3.1质粒 DNA2次 ,共 2 μg;Sj C2 3基因枪 (gg)组 ,每鼠用基因枪免疫 pc DNA3.1- Sj C2 3质粒 DNA2 μg;Sj C2 3肌注 (im)组 ,每鼠肌注 10 0 μg pc DNA3.1- Sj C2 3质粒 DNA;Sj C2 3/ Cp G(gg)组 ,每鼠用基因枪免疫 pc DNA3.1- Sj C2 3/ Cp G质粒 DNA2 μg;Sj C2 3/Cp G(im)组 ,每鼠肌注 10 0 μg pc DNA3.1- Sj C2 3/ Cp G质粒 DNA;联合免疫组 ,每只小鼠先肌注 10 0μg pc DNA3.1- Sj C2 3/ Cp G质粒 DNA,第 2天用基因枪免疫 2 μg。各组小鼠隔 2周加强免疫 1次 ,共 3次。末次免疫后 4周每鼠经腹部皮肤攻击感染 (45± 1)条日本血吸虫尾蚴 ,4 5 d后剖杀 ,计数成虫及肝脏虫卵数。首次免疫前 2天及感染前 2天经尾静脉采血检测 Ig G抗体水平及抗体亚类 Ig G1 、Ig G2 a。末次免疫后 3周检测脾细胞经 Con A和 r Sj C2 3- HD刺激后培养上清中鼠 IL- 2、IL- 4和 IFN- γ的水平。结果 Sj C2 3(gg)组、Sj C2 3/ Cp G(gg)组及联合免疫组小鼠所检成虫数均低于对照组 (P均 <0 .0 1) 。
- 赵松朱荫昌D.A.Harn司进任建功殷旭仁何伟梁幼生徐明许永良
- 关键词：日本血吸虫免疫刺激序列DNA疫苗基因枪
- 日本血吸虫鸡尾酒式DNA疫苗与蛋白疫苗联合应用增强免疫保护作用的研究被引量：12
- 2008年
- 目的探讨日本血吸虫鸡尾酒式DNA疫苗与蛋白疫苗联合应用以增强免疫保护作用的效果。方法分别大量制备质粒DNA:pcDNA3.1-SjC23、pcDNA3.1-SjCTPI、pcDNA3.1-(CDR3)6和重组蛋白SjC23-HD、SjCTPI、NP30。pcDNA3.1-SjC23、pcDNA3.1-SjCTPI、pcDNA3.1-(CDR3)6等量混合后即为鸡尾酒式的混合DNA疫苗,重组蛋白SjC23-HD、SjCTPI、NP30等量混合后即为鸡尾酒式的混合蛋白疫苗。70只BALB/c小鼠随机分为A、B、C、D、E5组,每组14只。A组为自然感染组;B组(空质粒对照组)每只小鼠分别在第0、3、6周经股四头肌注射100μlpcDNA3.1;C组(空质粒+混合蛋白对照组)每只小鼠分别在第0、3、6周经股四头肌注射100μlpcDNA3.1,第9周每鼠经背部皮下多点注射100μl混合蛋白疫苗+100μl福氏完全佐剂(FCA);D组(混合DNA组)每只小鼠分别在第0、3、6周经股四头肌注射100μl混合DNA疫苗;E组(混合DNA+混合蛋白组)每只小鼠分别在第0、3、6周经股四头肌注射100μl混合DNA疫苗,第9周每鼠经背部皮下多点注射100μl混合蛋白疫苗+100μlFCA。DNA免疫组末次免疫后4周,蛋白加强组末次免疫后2周,所有小鼠同时经腹部皮肤感染(40±1)条尾蚴。攻击感染后42d剖杀小鼠,计数成虫及肝脏虫卵数。首次免疫前2d及感染前2d分别经尾静脉采血,分离血清检测IgG抗体水平、抗体亚类IgG1及IgG2a,并取小鼠脾脏制备单个脾细胞,检测细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的水平。结果C、D组和E组的减虫率分别为17.70%、32.88%和45.35%,D组和E组的减虫率均显著高于C组(P均<0.01),且E组的减虫率显著高于D组(P<0.01);C、D组和E组的减卵率分别为9.39%、36.20%和48.54%,D组和E组的减卵率均显著高于C组(P均<0.01),且E组的减虫率也显著高于D组(P<0.05)。C、D、E3组小鼠血清都检测到特异性IgG抗体,抗体亚类IgG2a/IgG1比值分别为0.525、1.829、0.712。D、E两组小鼠IL-2、IFN-γ含量较空质粒对照组均有明显升高,IL-4则无明显差异
- 戴洋朱荫昌王晓婷唐建霞鲁飞徐明许永良管晓虹
- 关键词：日本血吸虫联合免疫
