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国家自然科学基金(30471309)

作品数：18 被引量：94H指数：6
相关作者：沈卫德李兵王东赵华强许雅香更多>>
相关机构：苏州大学东京农工大学江苏大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>

文献类型

  • 18篇中文期刊文章

领域

  • 13篇农业科学
  • 8篇生物学
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 11篇野桑蚕
  • 11篇桑蚕
  • 7篇家蚕
  • 5篇基因
  • 4篇克隆
  • 2篇原核表达
  • 2篇中国野桑蚕
  • 2篇饲料
  • 2篇人工饲料
  • 2篇人工饲料育
  • 2篇羧酸酯酶
  • 2篇酯酶
  • 2篇线粒体
  • 2篇酶基因
  • 2篇克隆与序列分...
  • 2篇MTDNA
  • 1篇敌敌畏
  • 1篇毒力
  • 1篇毒力比较
  • 1篇性状

机构

  • 17篇苏州大学
  • 3篇东京农工大学
  • 2篇江苏大学

作者

  • 17篇沈卫德
  • 16篇李兵
  • 8篇王东
  • 6篇赵华强
  • 5篇许雅香
  • 4篇宋宏图
  • 3篇陈玉华
  • 3篇卫正国
  • 2篇王文兵
  • 2篇马晓英
  • 2篇贡成良
  • 1篇刘衬丽
  • 1篇周君
  • 1篇管京敏
  • 1篇陆小平
  • 1篇陈正凯
  • 1篇査宏贤
  • 1篇吴玉丹
  • 1篇盛家镛
  • 1篇包立军

传媒

  • 7篇蚕业科学
  • 3篇昆虫学报
  • 3篇江苏蚕业
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇安徽农业科学
  • 1篇江苏农业科学
  • 1篇丝绸
  • 1篇Agricu...

年份

  • 1篇2009
  • 4篇2008
  • 6篇2007
  • 7篇2006
共 18 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
家蚕丝绵含油率测定方法的研究被引量：7
2008年
为了准确测定家蚕丝绵含油率,采用索氏萃取法,研究水浴温度、丝绵取样干重对丝绵含油率测定结果的影响。实验结果表明,水浴温度在72～73℃、丝绵取样干重在(3.004±0.003)g时,测得的含油率较其他条件下的测定值高。
李兵盛家镛史常春沈卫德
关键词：蚕丝被
家蚕溶茧酶基因的克隆、序列分析及原核表达被引量：1
2008年
【目的】获得家蚕溶茧酶基因的全长序列,实现溶茧酶基因在大肠杆菌中的融合表达。【方法】利用cDNA末端扩增技术(RLM-RACE)克隆了家蚕溶茧酶基因cDNA序列(GenBank登录号:EF428980)。【结果】家蚕溶茧酶基因cDNA序列全长1047bp,其中780bp的蛋白质编码区可编码260个氨基酸,预测蛋白质分子量为27.6kD,等电点(pI)为8.89。家蚕溶茧酶基因包含4个内含子。用Signal P3.0Server程序分析家蚕溶茧酶基因,预测其从第1～22位为信号肽序列。SMART分析结果预测其第34～254位氨基酸序列具有类胰蛋白的丝氨酸蛋白酶活性。重组质粒pET-32a-Cocoonase转化E.coli BL21进行原核表达,SDS-PAGE分析结果表明,家蚕溶茧酶基因以融合蛋白形式表达,相对分子量为48kD。【结论】本研究成功地克隆、表达了家蚕溶茧酶基因,分析和预测了它的结构和功能,为其进一步的生物学功能研究及其应用奠定了基础。
吴玉丹王文兵李兵王东沈卫德
关键词：家蚕原核表达
A Study on Artificial Hatching of Chinese Bombyx mandarina Moore
2008年
Diapause eggs of Bombyx mandarina Moore from Wujiang, Jiangsu Province, China, were used to study the artificial hatching of B. mandarina Moore. The results showed that the highest hatchability was obtained by instant treatment with hydrochloric acid （HC1, specific gravity 1.065-1.075） for 5 rain under 46℃. After the B. mandarina eggs were cold stored at 5℃ for 40 days, the highest hatchability was obtained by treatment with HC1 （specific gravity 1.092） for 6 minutes under 47.8℃. For the B. mandarina eggs that were stored at 25℃ for 28 d and then cold-stored at 5℃ for 0-100 days, the highest hatchability was obtained by treatment with HCI （specific gravity 1.092） for 6 rain at 47.8℃. The longer the cold storage period, the higher was the hatchability. Acid treatment on diapause eggs of B. mandarina for 6 rains at 47.8℃ with hydrochloric acid （specific gravity 1.092） before hatching in spring could obviously shorten the hatching stage and increase the hatchability.
ZHAO Hua-qiangXU Ya-xiangWANG DongLI BingWEI Zheng-guoCHEN Yu-huaSHEN Wei-de
家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-6的克隆、序列分析和组织表达被引量：14
2009年
本文利用RT-PCR和RACE方法,获得了家蚕Bombyxmori丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(serpin)的开放读码框(ORF)和5′UTR序列。根据该基因与其他昆虫serpin的同源性关系将其命名为家蚕serpin-6基因,GenBank登录号EU159447。为了研究serpin-6与家蚕免疫反应的相关机理,对serpin-6基因的组织表达和免疫刺激反应进行了研究。结果表明该基因在家蚕的头部和生殖腺中mRNA表达量非常高,在中肠,脂肪体,丝腺和血淋巴表达量较低。用脂多糖(LPS)刺激5龄第3d家蚕后,serpin-6基因在脂肪体和血淋巴中都被显著诱导表达,且都在刺激6h后表达量最高。推测该基因在家蚕细胞免疫反应中起着一定的作用。
刘衬丽王东李兵管京敏俞燕芳査宏贤査宏贤许雅香
关键词：家蚕基因克隆半定量RT-PCR免疫反应
野桑蚕羧酸酯酶基因cDNA片段的克隆及序列分析被引量：6
2007年
利用反转录-多聚酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术克隆了野桑蚕羧酸酯酶基因cDNA片段,片段长427 bp,共编码142个氨基酸残基;对来自同一发育时期的不同组织分别进行PCR扩增。结果显示:除了丝腺外其他组织均有目的条带。经与其他昆虫酯酶氨基酸同源性比较发现:野桑蚕羧酸酯酶与家蚕羧酸酯酶同源性最高,达98.6%;与赤拟谷盗同源性较低,为23.4%～30.7%。
宋宏图李兵王东赵华强王文兵沈卫德
关键词：野桑蚕羧酸酯酶克隆RT-PCR
野桑蚕GST-Omega1基因在草地贪夜蛾Sf9细胞中的表达被引量：2
2007年
谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases,GSTs)是昆虫的重要解毒酶之一。为了研究野桑蚕Bombyxmandarina中谷胱甘肽S-转移酶在真核表达系统中的表达情况。本研究通过RT-PCR从野桑蚕中肠中获得GST-Omega1基因的cDNA序列,该基因的开放读码框为771bp,编码256个氨基酸。对推导的氨基酸序列用NCBI的蛋白质Conserved Domains工具进行在线分析,结果显示GST-Omega1的氨基酸序列中具有Cys38和8个GSH结合位点的Omega类基因保守序列。对所获得的基因克隆进表达载体pFastBacHT b中获得pFast-GST-Omega1,将其转化DH10Bac感受态细胞,获得Bac-GST-Omega1重组病毒DNA,用脂质体法转染草地贪夜蛾Sf9细胞,获得重组病毒。对表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析,能检测到一条分子量约为33kD的特异性条带,与推导的融合蛋白大小相符,该目的蛋白的表达量占总蛋白的14.4%。目的蛋白经His.Bind树脂纯化,用Lineweaver-Burk作图法测定其K和V,结果显示其K为2.81μmol/L,V为2.70μmol/(mg.min)。
马晓英李兵贡成良沈卫德
关键词：野桑蚕克隆杆状病毒表达系统SF9细胞
野桑蚕CYP305B1V1基因的克隆与序列分析被引量：9
2006年
对野桑蚕CYP305B1V1基因进行克隆和序列分析的结果显示,野桑蚕CYP305B1V1基因的ORF为1 464nt,编码487 aa;同源性分析表明,在DNA水平上野桑蚕CYP305B1V1基因与家蚕CYP305B1基因的同源性达99%,与推导的氨基酸序列完全一致。通过和NCB I中家蚕基因组数据比对和拼接,预测野桑蚕CYP305B1V1基因结构中至少含有6个内含子,且内含子与外显子之间的连接符合GT-AT法则。
陈玉华卫正国李兵王东赵华强沈卫德
关键词：野桑蚕克隆
中日野桑蚕杂交后代线粒体的遗传初探被引量：3
2006年
为了研究线粒体在中国野桑蚕和日本野桑蚕的杂交后代中的遗传规律,将经D IG-RFLP检测线粒体多态性不同的中国野桑蚕和日本野桑蚕进行杂交,用Southern杂交检测母本、父本、F1、BF1的线粒体多态性。结果表明,F1和BF1的线粒体多态性与母本相同,没有出现父本线粒体的信号。揭示了实验采用的中国野桑蚕和日本野桑蚕的线粒体遗传遵循母性遗传的规律。
李兵浜野国胜蜷木理原和二郎沈卫德
关键词：野桑蚕线粒体母性遗传
中国野桑蚕和日本家蚕杂交后代的性状调查被引量：2
2006年
为了研究野桑蚕和家蚕杂交后代的相关性状,以中国野桑蚕为母本,日本家蚕为父本进行了杂交,调查了F1和BF1的相关性状。结果表明,F1的幼虫发育经过和母本相近,而蛹期的发育经过和父本相近;F1、BF1的全茧量和父本家蚕相近,雌性个体和母本相比增加1倍左右,雄性个体增加2倍以上;F1、BF1的产卵数均多于两亲本,差异达1%显著水平。
李兵浜野国胜蜷木理原和二郎沈卫德
关键词：野桑蚕发育经过茧质产卵数
野桑蚕泛素基因的克隆及原核表达被引量：5
2007年
泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway)是具有高度选择性的蛋白质降解途径,该途径对细胞内蛋白的选择性降解起着重要作用。设计一对特异引物,从野桑蚕体壁细胞中克隆了单体泛素基因的编码区,其GenBank登录号DQ839401。序列分析表明,该编码区的长度为231 bp,编码76个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量约为8.6 kD,等电点为5.73。同源性比较发现,野桑蚕泛素基因与其他真核生物泛素基因在核苷酸水平上有83%同源性,在氨基酸水平上具有94%以上的相似性。将野桑蚕泛素基因片段与pGEX-4T-2连接,构建原核表达载体pGEX-4T-2/ubi,重组载体转化大肠杆菌BL21后在37℃及30℃的培养条件下,泛素基因得到高效表达。
陈正凯周君包立军徐剑沈卫德陆小平
关键词：野桑蚕泛素原核表达
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