公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-8

全选清除导出

排序方式：

人溶菌酶N端与Exendin-4嵌合蛋白的基因克隆及原核表达被引量：1: 2009年; 目的:克隆嵌合多肽人溶菌酶N端-Exendin-4基因并进行原核表达和纯化。方法:通过重组PCR技术将人溶菌酶N端74个氨基酸的基因序列与Exendin-4多肽基因序列相连接,其间引入一段由凝血酶和二肽基肽酶识别位点组成的连接序列。以嵌合基因hLYZ(N74)-Ex4与质粒pET-32a(+)构建原核表达体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。表达蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化、Western blotting鉴定;透析复性后,以肠激酶切割并回收目的多肽。结果:重组质粒pET-32a/hLYZ(N74)-Ex4构建正确,目的蛋白主要以包涵体形式存在,37℃诱导4h、IPTG浓度为0.6 mmol/L时表达量最高,约占菌体蛋白总量的30%。Western blotting检测显示重组蛋白为单一清晰条带。重组蛋白经肠激酶切割后,回收得到高纯度的嵌合多肽。结论:成功构建hLYZ(N74)-Ex4嵌合基因的原核表达质粒,高效原核表达并获得高纯度目的蛋白。; 王明刘宇婷潘霞明曾可静朱元昌周羽竝刘誉; 关键词：人溶菌酶原核表达

miRNA-21反义核酸对人淋巴瘤Raji细胞的生长抑制作用研究被引量：1: 2009年; 为研究以miRNA-21为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)对淋巴瘤Raji细胞的生长抑制作用,使用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染Raji细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率;实时定量PCR技术检测细胞miRNA-21水平改变;PI和Annexin V双染,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果显示转染Raji细胞48～72h,反义核酸组细胞生长受到明显抑制,反义核酸抑制细胞活性的最佳浓度是0.4μmol/L;细胞内miRNA-21的表达水平明显下调;细胞凋亡明显增加;此外,反义组细胞中抑癌基因Pdcd4的mRNA和蛋白质呈高水平表达.提示以miRNA-21为靶标的反义核酸是人淋巴瘤Raji细胞生长的有效抑制剂和凋亡诱导剂.miRNA-21可能是淋巴瘤治疗的潜在靶标,其通过下调抑癌基因Pdcd4的表达水平发挥抗肿瘤作用.; 李育敏董大伟唐杰坷霍毅民王丽鹏费嘉; 关键词：MIRNA-21 反义核酸 RAJI细胞细胞凋亡

以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对人白血病K562细胞的抑制作用被引量：11: 2009年; 目的:探讨以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对白血病K562细胞的生长抑制效应及可能的作用机制。方法:依据与microRNA-21序列互补的原理,设计反义寡核苷酸,人工合成并全硫代修饰,在Lipo-fectamineTM2000介导下,转染K562细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选最佳作用浓度,台盼蓝拒染法检测其对细胞生长抑制的作用,姬姆萨染色观察细胞的形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的变化。利用荧光定量PCR技术检测反义寡核苷酸作用后细胞内microRNA-21表达水平的改变。结果:MTT结果显示反义寡核苷酸有效抑制细胞生长,分别与随机组、空白对照组进行比较有显著差异(P<0.05),反义寡核苷酸作用的最佳浓度是0.6μmol/L。台盼蓝拒染法结果显示从转染K562细胞24 h开始,反义寡核苷酸组细胞生长明显受到抑制,抑制效应持续到72 h。姬姆萨染色显示反义寡核苷酸作用K562细胞24 h后,可在细胞中见凋亡小体。流式细胞仪检测结果显示反义寡核苷酸组出现明显的亚二倍体峰,细胞周期无发生明显变化。荧光定量PCR结果显示,反义寡核苷酸可有效抑制细胞内microRNA-21的表达水平。结论:以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸可有效抑制人白血病K562细胞的生长,并显著促进细胞凋亡。; 郭敏李育敏费嘉张洹; 关键词：寡核苷酸类反义 K562细胞

MicroRNA与血液系统肿瘤发生、诊断和治疗: ＜正＞动植物中广泛存在着一种大小约19-24个碱基的非编码单链小分子RNA,即microRNA（miRNA）,随着生物信息学和基因克隆技术的迅猛发展,现已在人类发现541个miRNA,记录于miRNA数据库（http:/...; 李育敏费嘉; 关键词：MICRORNA 血液肿瘤; 文献传递

糖尿病合并脑梗塞患者糖化血红蛋白和血液流变学联合检测的意义被引量：38: 2010年; 目的:探讨糖尿病合并脑梗塞患者糖化血红蛋白(HbA1c)和血液流变学5项指标的联合应用的价值。方法:选择65例糖尿病合并脑梗塞患者与40例正常人的HbA1c和血液流变学5项进行比较分析。应用糖化血红蛋白自动分析仪测定HbA1c,全自动血液流变仪(LBR-NBC)测定血液流变学5项指标,包括全血高切黏度、全血低切黏度、刚性指数、聚集指数和纤维蛋白原浓度(Fib)。结果:糖尿病合并脑梗塞患者HbA1c含量和5项血液流变学指标均高于正常对照组,两组的血液流变学指标差异有显著性意义(P<0.01),且HbA1c与血液流变学的5项指标之间呈正相关。结论:联合应用HbA1c和血液流变学5项指标,有助于监测糖尿病合并脑梗塞患者的病情变化和预后分析。; 尹更生李菊香邱霞刘誉; 关键词：糖尿病脑梗塞血液流变学糖化血红蛋白

线粒体病的分子生物学机制被引量：2: 2011年; 线粒体病是一种少见的能量代谢病,病情复杂多样,从单一组织损伤或无明显临床症状到多系统发病乃致患者早期死亡,在临床上容易误诊或漏诊,甚至延误治疗。由于线粒体的结构与功能受核基因组(nDNA)与线粒体基因组(m tDNA)双重调控,其中大多数线粒体酶、结构蛋白和各种蛋白因子由nDNA编码,因而多数原发性线粒体病是nDNA突变所致,符合孟德尔遗传定律,少数则由于m tDNA缺陷造成,属于母系遗传,两种DNA突变所引起的分子病理机制和临床表型特征有所不同。本文综述线粒体病的遗传模式、分类、分子生物学特点及其分子机制的研究进展。; 刘誉韦建鸽吴彬彬兰菲菲; 关键词：线粒体病母系遗传

靶向抑制微小RNA-21提高白血病细胞对三氧化二砷的敏感性研究被引量：2: 2010年; 目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-miR-21、As2O3以及两者联合使用对细胞增殖的抑制作用,并计算抑制率和IC50;PI单染检测细胞周期及凋亡;实时定量PCR检测miRNA-21表达水平的改变;免疫荧光法检测miRNA-21候选靶基因PDCD4蛋白表达的改变。结果AMO-miR-21与As2O3联合使用后,IC50从2.10μmol/L降低到1.23μmol/L,敏感性提高到单用As2O3的1.78倍;AMO-miR-21联合As2O3组细胞凋亡明显增加(P<0.05);单独转染AMO-miR-21可显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.01),同时抑癌基因PDCD4蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论AMO-miR-21与As2O3联合使用可提高K562细胞对As2O3的敏感性,为白血病的治疗提供了新的方法。AMO-miR-21通过靶向抑制miRNA-21,进而上调抑癌基因PDCD4的表达而发挥抗肿瘤作用。; 李育敏谷景义朱雪娇陈万群郭敏姚君琳林春燕费嘉; 关键词：微小RNA-21 反义寡核苷酸三氧化二砷白血病化疗敏感性

MicroRNA与血液系统肿瘤发生、诊断和治疗被引量：8: 2009年; MicroRNA (miRNA) is a family of 19-24 nucleotides small non-coding RNA in eukaryotic organisms,which can regulate genes at the post-transcriptional level. miRNA has been shown to be involved in a variety of cellular processes such as development,proliferation,differentiation,apoptosis etc,and is closely related to the oncogenesis. Recent study indicates that several miRNAs play an important role in initiation and progression of hematological malignancies. miRNA expression profiling has identified signatures associated with diagnoses,prognoses and therapy of hematological malignancies. The review discusses miRNA and its biogenesis,functional mechanisms and potential role in the diagnosis,prognoses and therapy of hematological malignancies.; 李育敏费嘉; 关键词：MICRORNA 血液肿瘤

全选清除导出

共1页<1>

广东省科技计划工业攻关项目(2006B35502010)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

广东省科技计划工业攻关项目(2006B35502010)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈