国家自然科学基金(3067156330700597)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：张杰刘永生孙德惠路伟才学鹏更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
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- 人、牛和羊叠朊基因的表达及牛叠朊蛋白抗血清的制备
- 2008年
- 叠朊(Dpl)是朊蛋白(PrP)的横向同源物,两者的功能密切相关。本研究旨在制备能够特异检测重组表达的或者动物组织中Dpl的抗血清,以用于研究Dpl的功能及其与PrP的关系。根据已克隆的汉族人、中国黄牛、甘肃土种羊的Dpl基因,将其Dpl成熟蛋白编码区分别定向克隆到表达载体pET-30a(+)上,将重组表达载体转入E.coliBL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。将表达并纯化的牛重组Dpl免疫4只青紫蓝兔,制备牛Dpl的抗血清,SDS-PAGE分析表明人、牛和羊的重组Dpl在E.coli中获得了高效表达。用Ni-NTA树脂亲和层析和胶洗脱法纯化了上述表达产物,ELISA和West-blot分析表明,制备的牛Dpl抗血清与重组人、牛和羊的Dpl以及牛和羊睾丸组织的Dpl发生了特异性反应,却不与重组人、牛和羊的PrP发生反应。上述结果表明制备的Dpl抗血清可以作为人、牛和羊Dpl的检测试剂和研究材料。
- 刘永生唐江山路伟陈豪泰孙德惠才学鹏张杰
- 关键词：传染性海绵状脑病朊蛋白基因表达抗血清
- 反向遗传技术在猪繁殖与呼吸综合征研究中的应用
- 2011年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,严重危害全世界养猪业。PRRSV与宿主细胞的相互作用、致病机理,其基因组及蛋白质对致病性的影响等仍是未解之谜。反向遗传技术为研究PRRSV提供了技术支撑。现基于病毒拯救、疫苗研制、分子病原学诊断等方面的内容,对反向遗传技术在PRRS研究中的应用作一综述。
- 谷元兴王猛刘永生张杰
- 关键词：反向遗传技术病毒拯救RNA病毒猪繁殖与呼吸综合征
