北京市科技新星计划(2003-B-15)
- 作品数：7 被引量：74H指数：6
- 相关作者：韩德民张罗王鸿王奎吉宋晓红更多>>
- 相关机构：首都医科大学北京市耳鼻咽喉科研究所更多>>
- 发文基金：北京市科技新星计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 麻黄素对体外培养的人鼻腔纤毛运动的影响被引量：8
- 2006年
- 目的观察不同浓度麻黄素对体外培养的人鼻腔纤毛运动的影响。方法采用组织块培养法,观察在加有羟乙基哌嗪乙磺酸[4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid,HEPES]的Hank平衡盐溶液(Hank balanced salt solution,HBSS)、2．5 g／L、5g/L、10g/L和20g/L的麻黄素作用下体外培养人鼻腔纤毛摆动频率(ciliary beat frequency CBF),并进行配对分析。结果①CBF在HBSS中10 min内无显著性变化;②在加入2．5 g／L、5 g／L、10 g／L和20 g／L的麻黄素后,1～2 min内CBF明显升高并达高峰,与加药前相比差异有统计学意义(P值均<0．05),后渐呈下降趋势,在10 min时2．5g/L和5g/L的麻黄素中CBF与加药前相比虽略低,但差异无统计学意义(P值均>0．05),而10 g／L和20 g／／L麻黄素中CBF与加药前相比明显降低,且差异有统计学意义(P值均<0．05);③2．5 g／L～20 g／／L的麻黄素作用1 min后CBF的增加量差异无统计学意义(F=0．697, P>0．05),10 min后随着浓度的增加而下降,10 g／L～20 g／L麻黄素CBF的下降值较2．5 g／L～5g/L的下降值差异有统计学意义(P<0．05)。结论麻黄素作为肾上腺素受体激动药物,2．5 g／L～20 g／L的麻黄素对体外培养的人鼻腔纤毛运动早期有一定的刺激作用,后期则表现为抑制作用,且随着药物浓度的增加,刺激作用逐渐缩短,抑制作用逐渐延长。5g/L麻黄素作用于鼻腔纤毛细胞刺激作用最大,而抑制作用较弱。
- 宋晓红张罗韩德民王鸿王奎吉
- 关键词：麻黄碱鼻黏膜上皮细胞纤毛
- 鼠尾胶原为底物的人鼻腔纤毛上皮细胞培养模式的建立被引量：11
- 2007年
- 目的建立以鼠尾胶原为贴附底物的人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式,为人鼻腔黏液纤毛运输系统的研究提供科学有效的方法。方法制备鼠尾胶原并铺片,以鼠尾胶原为贴附底物组织块培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞,培养7天时进行HE染色及扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和结构,应用高速摄像技术测量纤毛摆动频率。结果鼠尾胶原要平坦均匀,平均厚度约为1mm;HE染色可见上皮细胞呈单层向周围爬开;扫描电镜下见纤毛上皮细胞呈不规则多角形,纤毛周围可见微绒毛;透射电镜下可见纤毛上皮细胞间为紧密连接;同一细胞任意两点纤毛摆动频率是相同的;同一来源体外培养的钩突和下鼻甲的纤毛摆动频率是相同的。结论以鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立,为今后研究鼻内用药对纤毛清除功能的影响提供了良好的方法和途径。
- 宋晓红张罗韩德民范尔钟王鸿王奎吉李颖
- 关键词：鼻腔上皮细胞细胞培养技术鼠尾胶原
- 呼吸道纤毛上皮细胞培养技术研究被引量：3
- 2005年
- 纤毛在呼吸道机械防御机制中发挥着重要作用,纤毛细胞培养是纤毛研究领域的重要技术之一,本文对纤毛细胞培养技术的进展作一综述。
- 王奎吉张罗韩德民
- 关键词：纤毛呼吸道上皮细胞毛细胞防御机制
- 呼吸道纤毛运动状况的高速数字化显微成像被引量：18
- 2004年
- 目的 通过对呼吸道纤毛摆动的频率和形式进行精确测量,以建立客观评价呼吸道上皮纤毛传输功能的指标。方法 采用高速数字化显微成像技术,对体外培养的兔和鼠气管黏膜以及人鼻腔黏膜的纤毛摆动状况进行观察。结果 ①数字化图像中测量点灰度的变化反映纤毛运动的状况,通过分析图像灰度的变化过程,可评价纤毛运动周期中各个时段的特征变化;②图像采集系统的采样速率为240帧/s时,可清晰显示纤毛运动状况,而当采样速率下降为30帧/s时,则无法获得正确的纤毛摆动频率(ciliary beat frequency,CBF)数据;③30℃时,鼠呼吸道CBF基值(x±sx)为(15.6±0.7)Hz(n=5);兔呼吸道CBF基值为(13.2±0.9)Hz(n=7);人鼻腔CBF基值为(13.4±1.1)Hz(n=5),3者间差异无显著性(P>0.05)。当向培养液中加入ATP后,CBF将在数秒内快速升高。结论 高速数字化显微成像和精确的数据处理技术,能够准确反映呼吸道纤毛运动状况,为客观评价呼吸道黏液纤毛传输功能提供临床实用指标。
- 张罗韩德民王鸿周兵Michael J.Sanderson
- 关键词：呼吸道纤毛运动
- 鼻腔黏液纤毛传输系统的组成和纤毛运动状况评估被引量：13
- 2006年
- 张罗韩德民王琪
- 呼吸道纤毛上皮细胞的组织块法培养被引量：9
- 2006年
- 目的建立组织块法呼吸道纤毛上皮细胞原代培养模型,观察细胞生长分化情况,为深入研究黏液纤毛传输系统提供方法学基础。方法应用组织块法在鼠尾胶原上培养兔气管纤毛上皮细胞,对培养7天的标本行苏木素-伊红染色、黏蛋白5AC(mucin-5AC,MUC5AC)单克隆抗体免疫组织化学染色、扫描电镜及透射电镜观察、纤毛摆动频率测量。结果①细胞培养7天后可以见到大量的纤毛细胞和杯状细胞,纤毛形态正常,摆动活跃;②苏木素-伊红染色和黏蛋白MUC5AC单克隆抗体免疫组织化学染色可见分化良好的纤毛细胞和杯状细胞;③扫描电镜及透射电镜观察见纤毛细胞分化良好,纤毛形态正常;④(30±1)℃下测得纤毛摆动频率为(13.2±0.9)次/s。结论应用组织块法进行兔气管纤毛上皮细胞培养,可以得到分化良好的纤毛细胞和杯状细胞,纤毛摆动活跃,可应用此模型对黏液纤毛传输系统进行深入研究。
- 王奎吉张罗韩德民王鸿范尔钟宋晓红刘仲燕
- 关键词：纤毛上皮细胞细胞培养粘蛋白类
- 鼻腔黏液纤毛传输系统功能的评估被引量：34
- 2006年
- 黏液纤毛传输功能在呼吸道防卫系统中的作用举足轻重。对黏液纤毛传输系统功能的评估,根据评估对象的不同可分为三部分:对黏液纤毛传输系统功能的综合评估;对纤毛运动状况的评估;以及对黏液产量和理化性质的评估,临床评估的重点在前两部分。糖精试验简便易行,敏感和可靠,是目前综合评估黏液纤毛传输系统功能最常用的方法。对纤毛的评估可分为静态结构评估和动态功能评估两大类,前者主要采用扫描和透射电子显微镜观察,评估固定纤毛的超微结构,后者通过观察纤毛的运动速度和模式,评价其功能。上述鼻腔黏液纤毛传输系统功能评估的方法,构成了较为完整的评估体系,具备一定的临床实用价值。
- 张罗韩德民王琪
