广东省教育部产学研结合项目(2009B090200070)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 相关领域：生物学更多>>
- 人BMP4基因的克隆及其原核表达载体的构建
- 2012年
- 以成熟人胎盘组织为材料来源,克隆人BMP-4基因的全长cDNA,经过PCR扩增后与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-BMP4克隆质粒。酶切后回收小片段与表达载体pET-22b的多克隆酶切位点连接,构建原核表达载体pET22b-BMP4,酶切及测序鉴定重组子。重组质粒转化至感受态的Rosseta宿主菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达情况。结果显示,从胎盘组织中成功地克隆到人BMP4基因,与NCBI中公布的序列100%相符合,原核表达载体pET22b-BMP4转化至Rosseta构建表达菌体,经IPTG诱导后电泳分析可见重组蛋白表达的条带。
- 刘秋英陈伟毛国梁熊盛钱垂文利奕成王一飞
- 关键词：骨形成蛋白4基因克隆原核表达
