广西壮族自治区自然科学基金(2010GXNSFA013219)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 相关作者：陈远能张涛黄会云陈思羽张保静更多>>
- 相关机构：广西中医药大学广西中医药大学附属瑞康医院江西中医药高等专科学校更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区卫生厅重点科研课题广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于CD14,IL-1β表达及SGC-7901细胞凋亡变化探讨清热化湿方防治胃癌的机制被引量：7
- 2013年
- 目的:观察清热化湿方对人胃腺癌细胞7901增殖、凋亡及CD14基因、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素1β(IL-1β)表达的影响。方法:采用血清药理学方法,对照组予胎牛血清,治疗组分别予不同体积分数(5%,10%,15%,20%,30%)清热化湿方含药血清干预体外培养的胃腺癌细胞SGC-7901,应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡率、细胞周期,免疫组化、Real-time PCR技术检测CD14,TNF-α,IL-1β蛋白及mRNA表达情况。结果:与对照组比较,治疗组SGC-7901细胞存活率明显下降(P<0.05);与对照组比较,治疗组S期细胞减少、G0/G1期细胞增多,且与药物质量浓度有剂量依赖性(P<0.05)。治疗组可明显下调CD14,TNF-α,IL-1β蛋白及mRNA表达并促进细胞凋亡(P<0.05),以中剂量更为明显。结论:清热化湿方可能通过调控CD14,TNF-α,IL-1β表达,介导SGC-7901细胞S期,诱导细胞凋亡,发挥防治胃癌的效应。
- 张保静陈远能张涛
- 关键词：清热化湿方CD14肿瘤坏死因子Α白细胞介素1Β
- CD14启动子区多态性介导幽门螺杆菌参与胃癌中上皮-间质转化路径的机制研究被引量：2
- 2014年
- 胃癌起源于胃壁最表层的黏膜上皮细胞,是世界上最常见的恶性肿瘤之一,严重危害着人类的健康。胃癌的发病机制极其复杂,与环境、遗传以及致病菌感染等因素密切相关,其中幽门螺杆菌（Hp）引发的胃癌备受关注。Hp为微需氧革兰染色阴性菌,被认为是胃癌及胃黏膜相关淋巴癌的第一类致癌原。机体内免疫因子的表达能够影响Hp感染后的炎性反应过程及其严重程度,最终决定细菌感染的结局。
- 平倩张涛陈玉林春李刘鹏陈远能
- 关键词：幽门螺杆菌上皮-间质转化启动子区多态性胃癌CD14介导
- RNAi沉默CD14基因对人胃癌细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2015年
- 目的以胃癌SGC-7901细胞为研究对象,在细胞水平观察沉默CD14基因对胃癌细胞增殖、凋亡、周期及下游靶因子TNF-α、IL-8的影响,探讨CD14基因在胃癌中的发病地位。方法重组CD14shRNA慢病毒为载体转染胃癌SGC-7901细胞。实验分3组,正常组、慢病毒阴性对照组(NCshRNA)、CD14沉默组(CD14shRNA)。采用荧光显微镜观察转染效率,确定最佳转染时间;Western blotting检测CD14蛋白的沉默效率;MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,Real-time PCR技术检测TNF-α、IL-8表达。结果成功转染慢病毒CD14shRNA的SGC-7901人胃腺癌细胞可表达绿色荧光蛋白,测得在病毒MOI=10时,转染72 h后,慢病毒的转染效率最佳。转染后24 h,正常组细胞增殖率为218.18%,阴性对照组为216.27%,CD14shRNA组为211.63%,各组间相比,差异无统计学意义(P>0.05);转染后48 h、72 h,正常组细胞增殖率为427.49%、479.22%,阴性对照组为417.84%、473.37%,CD14shRNA组为345.54%、362.64%,经比较,CD14沉默后细胞增殖率下降(P<0.05)。CD14shRNA组细胞早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡率均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。CD14shRNA组细胞G1期42.57%、S期38.65%、G2期13.22%,正常组细胞G1期35.91%、S期52.60%、G2期11.49%,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示,在转染胃癌细胞后,CD14shRNA慢病毒载体组细胞CD14蛋白表达相对于正常组及阴性对照组明显减少(P<0.05);Real-time PCR结果显示,CD14shRNA转染胃癌细胞后,TNF-α、IL-8 mRNA表达较正常组、阴性对照组明显下降。结论 CD14基因沉默后,胃癌细胞增殖能力减弱,细胞周期阻滞在S期,细胞合成减少,凋亡率增加,TNF-α、IL-8表达下降,这说明CD14基因在胃癌细胞增殖、发展过程中占据重要地位。
- 方培植陈远能黄会云陈思羽郑东林张涛
- 关键词：CD14胃癌SGC-7901细胞IL-8
- 稳定沉默CD14胃癌SGC-7901细胞系变化及清热化湿类方药干预研究被引量：6
- 2015年
- 目的构建稳定沉默CD14胃癌SGC-7901细胞系,从细胞增殖、周期、凋亡等变化,观察清热化湿类方药防治胃癌协同作用的研究。方法将胃癌SGC-7901细胞分为正常组、对照组、治疗组,除正常组外,对照组CD14shRNA转染后,予正常大鼠血清处理24h,治疗组CD14shRNA转染后,予不同剂量清热化湿方含药血清处理24h,应用MTT/CCK-8法检测细胞增殖及抑制率,流式细胞仪检测细胞周期,Annexin V法检测细胞凋亡。结果各组加药前,细胞增殖比较,无显著性差异,具有可比性;加药第1天,治疗组有抑制细胞增殖效应,与正常组比较,有统计学意义(P<0.05);对照组无抑制细胞增殖效应,无统计学意义(P>0.05)。加药第2天、第3天,清热化湿类方药仍有抑制SGC-7901细胞增殖的效应,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。治疗组细胞G1期50.09%,S期38.17%,G2期11.73%;对照组细胞G1期30.14%,S期50.68%,G2期13.18%,经比较,治疗组细胞S期较对照组下降(P<0.05)。治疗组早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡率明显增高,与对照组比较,有统计学意义(P<0.05)。结论清热化湿类方药协同抑制胃癌细胞增殖,减少癌细胞合成,促进胃癌细胞凋亡的正效用。
- 张涛黄会云陈思羽曹火留罗淑娟王小平陈远能
- 关键词：胃癌SGC-7901细胞
