国家高技术研究发展计划(2008AA10Z154)
- 作品数：8 被引量：34H指数：4
- 相关作者：马荣才曾钢姚磊叶艳英屈淑平更多>>
- 相关机构：北京市农林科学院农业生物技术研究中心江西农业大学福建农林大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- pinⅡ基因在转基因大白菜DH纯系和试配F_1代的遗传及表达被引量：1
- 2011年
- 马铃薯蛋白酶抑制剂基因-Ⅱ(pinⅡ)是一类控制丝氨酸蛋白酶抑制剂PI-Ⅱ合成的抗虫基因。为了比较pinⅡ基因在转基因大白菜纯系和杂种中的表达特性,为抗虫新品种选育提供理论指导,本实验以转基因大白菜双单倍体纯系(DH系)的5个自交系和与常规育种亲本材料试配的3个F1杂交组合为试材,利用标记性状(除草剂抗性)对试材进行转基因验证,通过小菜蛾饲喂实验对纯系及F1代的离体叶片进行小菜蛾抗性鉴定,同时利用RTq-PCR及蛋白酶抑制活性测定对抗虫性良好的纯系及F1杂种的目的mRNA转录量及目的蛋白合成量进行了测定。结果显示,F1杂种09-2-464对小菜蛾的抑虫效果比纯系T280-2-6强;F1杂种09-2-467对小菜蛾的抑虫效果比纯系T280-3-6强。T180-3-6的自交T2代与杂交F1代对小菜蛾的抑虫作用表现在不同的虫体发育阶段:T280-3-6②主要表现在高致死率和低化蛹率,T280-3-6④和杂种F1代主要表现在降低小菜蛾羽化率上,呈现出抗虫能力上的杂种优势。莲座期T280-3-6②pinⅡmRNA转录量和PI-Ⅱ蛋白表达量分别是F1代09-2-467的5倍和4倍。在植物的不同生长阶段纯系PI-Ⅱ蛋白量均高于F1代。T280-3-6②和F1代09-2-467、09-2-464有希望用于抗虫大白菜育种。
- 殷跃陆坤王桂香刘凡
- 关键词：转基因白菜杂种一代
- 简化一步多重RT-PCR法快速检测芜菁花叶病毒被引量：8
- 2012年
- 芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)是侵染十字花科作物和观赏性物种的主要病害之一。利用反转录酶M-MLV和普通Taq酶,使用一步法多重RT-PCR技术,建立了一种快速、简便、特异性强的检测TuMV的方法。该方法简便,不需先对总RNA提纯,只需室温下在提取液中对病样叶片直接碾磨,用粗提液或浓缩后的DNA-RNA混合物为模板进行检测。2套针对TuMV的特异性引物确保了检测的准确性。
- 曾钢叶艳英闫晓红马荣才唐乐尘姚磊
- 关键词：芜菁花叶病毒一步法多重RT-PCR病毒检测
- 芜菁花叶病毒萝卜与甘蓝分离物P3基因的克隆与序列分析被引量：4
- 2012年
- 芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)危害范围广,变异快,对其序列进行分析,能对病毒的演变与进化有深入的了解,为抗病育种打下基础。P3蛋白是TuMV高度容易变异的蛋白之一,包含一个对Brassica属和Raphanus属不同宿主侵染能力的决定因子,决定了宿主范围。笔者分别从北京感病的萝卜和甘蓝上分离得到4个TuMV分离物BJ-R01和BJ-B01、BJ-B02、BJB03。利用RT-PCR克隆了这4个分离物的P3基因,测定了它们的核苷酸序列,并进行了序列分析。结果表明,4个分离物的P3基因均为1 065个碱基,编码355个氨基酸。4个分离物P3基因的同源性较高,核苷酸序列同源性在92.6%～99.3%,氨基酸同源性在93.5%～99.7%。根据系统进化树分析,4个TuMV分离物均属于world-B组。经对宿主的致病性鉴定,4个TuMV分离物均为BR致病型。4个TuMV分离物对Brassica属植物均表现出强致病性,但对Raphanus属植物致病性显现出明显的差异。
- 叶艳英曾钢闫晓红马荣才吴才君姚磊
- 关键词：芜菁花叶病毒克隆
- 白菜类蔬菜转基因研究进展被引量：7
- 2010年
- 综述了白菜类蔬菜的抗虫、抗病、抗逆、抗除草剂、雄性不育、品质改良和筛选标记转基因育种研究现状,分析了转基因白菜研究中存在的问题,并指出未来一段时间对白菜类蔬菜转基因的研究重点仍会停留在建立高频再生体系和摸索其他有效方法上,转基因白菜类蔬菜的基因漂移和对其他非靶生物的影响以及对人类健康有无影响也会是热点研究问题。
- 高丽崔崇士屈淑平
- 关键词：白菜类蔬菜转基因
- HC-Pro基因片段介导的高抗TuMV被引量：2
- 2014年
- 芜菁花叶病毒(turnip mosaic viruses,TuMV)是侵染重要经济作物的主要病毒之一,寄主范围十分广泛,尤其是对十字花科作物的危害最为严重。为了获得对TuMV持久稳定的高度抗性,本研究以TuMV HC-Pro基因的453 bp保守序列为靶标,构建了植物表达RNAi载体pBBBTu-HC-Pro,并转化了TuMV的天然宿主拟南芥。对转基因拟南芥用北京地区流行的TuMV强致病株BJ-C4进行了抗病接种鉴定。鉴定的13个单拷贝转基因株系中有4个对TuMV的BJ-C4株表现出高度抗性,抗性比对照提高约80%以上,且抗性可以稳定遗传。经半定量和荧光定量PCR方法检测,在高抗转基因植株体内几乎检测不到病毒的累积,抗病效果明显。该载体在利用基因工程抗TuMV育种中具有广阔的应用前景。
- 叶艳英曾钢曹鸣庆马荣才吴才君姚磊
- 关键词：芜菁花叶病毒HC-PRO基因片段RNAI
- 外壳蛋白基因片段介导的高抗TuMV研究被引量：1
- 2013年
- 为了获得对芜菁花叶病毒(TuMV)高度稳定的抗性,选取TuMV的外壳蛋白(CP)基因近3'端保守区共377 bp的核苷酸序列,构建了抗TuMV的发卡结构RNAi载体,并转化了TuMV的天然宿主拟南芥。转基因植株用北京地区TuMV主要流行的强致病株系BJ-C4人工接种。鉴定的8个转基因株系中有3个株系表现出对TuMV的高度抗性。定量PCR结果显示,高抗转基因株系体内几乎检测不到病毒的积累。
- 曾钢叶艳英曹鸣庆马荣才唐乐尘姚磊
- 关键词：芜菁花叶病毒外壳蛋白基因
- 大白菜显性细胞核雄性不育基因SRAP-AFLP标记筛选
- 以938A和太NB杂交后代为试材,利用混合分组分析法(BSA),应用SRAP-AFLP标记技术筛选引物578对,找到与大白菜显性细胞核雄性不育(DGMS)基因连锁的标记4个,分别位于不育基因的两侧,其中连锁最紧密的标记为...
- 张慧武剑张淑江王晓武李菲李威孙日飞
- 关键词：大白菜分子标记
- 文献传递
- aiiA基因在植物软腐病研究中的应用进展被引量：5
- 2011年
- N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs)是一类广泛存在于许多革兰氏阴性细菌群体感应系统中的信号分子,又称作自体诱导物(Autoinducer,AI)。aiiA基因编码的AiiA蛋白能降解细菌产生的AHLs信号分子,干扰该信号分子参与细菌群体感应的调控过程,抑制多种植物病原菌致病基因的诱导表达,从而减轻或消除病原菌的致病性。本文介绍了aiiA基因、AiiA蛋白的研究情况,以及aiiA基因在抗软腐病工程菌和转基因植物研究上的应用现状,并提出了提高植物抗软腐病的研究方向。
- 韩丽伟屈淑平崔崇士
- 关键词：AIIA基因软腐病
- 结球白菜带柄子叶外植体不定芽离体再生能力的遗传分析被引量：6
- 2010年
- 解析控制植物不定芽离体再生能力的遗传因素,有助于从根本上提高离体培养困难材料的不定芽再生能力,是植物基因工程遗传改良的基础。本研究以结球白菜4个纯合亲本及其杂交后代的带柄子叶为外植体,建立了高频率离体不定芽再生技术。据此我们还对白菜不定芽再生能力进行遗传分析,并开展亲本与后代杂种的离体培养及反应研究,包括对培养基的激素需求,不定芽形成频率,不定芽形成数量,芽形态等系列特征。研究结果表明,杂种与亲本在培养基的激素浓度上有类似需求;杂交后代的不定芽再生率均至少高于一方亲本,在一些组合中可以高于双亲;在适宜的杂交组合及培养条件下,结球白菜带柄子叶外植体的不定芽再生率可以达100%,每一外植体上的不定芽数达3～7个。方差分析表明,结球白菜的不定芽离体再生能力存在基因的加性效应。
- 杨慧莹王鸣刚武丽娜张凤兰刘凡
- 关键词：结球白菜外植体不定芽再生
