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农杆菌介导的Btcry1Ⅰa基因转化花椰菜的研究被引量：4: 2011年; 利用苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)cry1Ⅰa基因构建了双T-DNA边界的植物表达载体pCS1Ⅰa-LR,以瑞士雪球花椰菜具柄子叶和下胚轴为外植体,通过农杆菌介导法将cry1Ⅰa基因导入花椰菜中,共获得30株转化植株,经PCR检测,其中18株为PCR阳性植株,PCR阳性率为60%;RT-PCR和Western杂交检测结果表明,cry1Ⅰa基因在转基因花椰菜中可以正常转录和正确表达。转基因植株用小菜蛾幼虫进行饲虫试验,结果表明,转cry1Ⅰa基因花椰菜对小菜蛾具有很强的毒杀作用,昆虫幼虫的校正死亡率高达100%。获得的转基因花椰菜可用于下一步的抗虫花椰菜的培育。; 张永侠郎志宏朱莉杨丽梅张杰苍晶黄大昉; 关键词：花椰菜农杆菌介导转化转基因植株

农杆菌介导的Bt基因crylAh转化结球甘蓝的研究: 以结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata)的下胚轴和具柄子叶为外植体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tume faciens)介导法将苏云金芽孢杆菌(Bacillus thu...; 崔磊杨丽梅方智远刘玉梅庄木张扬勇孙培田; 关键词：根癌农杆菌 BT基因结球甘蓝; 文献传递

农杆菌介导羽衣甘蓝转化体系的建立被引量：6: 2010年; 以羽衣甘蓝皱白1带柄子叶为外植体,通过农杆菌介导法,研究影响羽衣甘蓝转化的若干因素,建立稳定的遗传转化体系.结果表明,外植体通过2d的预培养,OD600值为0.3的菌液浓度,侵染时间5min,2d的共培养,延迟筛选3d有利于获得较高的转化效率.PCR检测表明,外源基因已整合到羽衣甘蓝基因组中.; 张文玲李凌刘凡; 关键词：根癌农杆菌羽衣甘蓝

苏云金芽孢杆菌cry9Aa基因的克隆、表达及活性分析被引量：6: 2010年; 为了解决目前广泛使用的cry1A类基因的抗性问题,获得对鳞翅目害虫高效杀虫基因,从菌株SC5D2和T03C001中鉴定并克隆到了2个新型cry9Aa基因,被Bt国际命名委员会分别正式命名为cry9Aa3和cry9Aa4,并进一步对其编码的蛋白进行活性测定。结果显示,2个基因对小菜蛾、玉米螟均具有较高的杀虫活性,其中对小菜蛾的LC50分别为1.83μg/mL和1.90μg/mL,对玉米螟的LC50分别为6.93μg/mL和1.06μg/mL。同时,两种Cry9Aa蛋白对Cry1Ac抗性小菜蛾都具有较高的杀虫活性,LC50分别为1.74μg/mL和1.39μg/mL,与敏感小菜蛾杀虫活性测定数据相当,表明Cry9Aa与Cry1Ac没有交互抗性。; 苏慧琴束长龙何康来张友军高继国宋福平; 关键词：苏云金芽孢杆菌克隆生物活性

观赏羽衣甘蓝高频再生体系的建立被引量：26: 2009年; 观赏羽衣甘蓝是一种赏食兼用的耐冻优良景观植物。为了通过基因工程手段赋予其抗虫性,并进一步提高其低温耐受性,获得新的抗性种质,本研究以优良育种品系为试材,详细探讨了影响离体培养不定芽再生的因素,建立了高效再生体系。以8份不同类型羽衣甘蓝基因型的带柄子叶、子叶、下胚轴为外植体,研究了不同基因型、不同外植体、不同的培养基激素浓度配比及添加AgNO3对不定芽诱导的影响。结果表明:无论基因型及使用的培养基,带柄子叶均为最佳外植体;不同的基因型、不同外植体其最佳的芽诱导培养基不同;筛选出两份材料,其带柄子叶分别在L6(MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L)及L3(MS+6-BA1.5mg/L)培养基中不定芽诱导率为100%,下胚轴诱导率最高也能达88.33%;培养基中添加4mg/L AgNO3不利于羽衣甘蓝的不定芽诱导;再生株生根以MS+NAA0.1mg/L效果好,生根率可达100%。; 赵秀枢李名扬张文玲刘凡; 关键词：羽衣甘蓝离体培养外植体不定芽

十字花科植物中主要硫代葡萄糖苷合成与调节基因的研究进展被引量：25: 2010年; 硫代葡萄糖苷(简称硫苷)是十字花科植物中的一类重要次生代谢产物,硫苷及其降解产物具有重要的生物活性。近年来随着对模式植物拟南芥基因组序列测定的完成和功能解析的进行,人们对硫苷的生物代谢途径有了较为深入的了解,硫苷合成的调控基因也成为研究热点,尤其是在硫苷合成不同阶段分别起着重要作用的MYB、MAM、CYP79/CYP83、AOP等基因家族。现就十字花科植物中硫苷的生物学功能、主要合成与调节基因等研究进展进行了综述,并对其在十字花科作物育种上的应用前景进行了展望。; 程坤杨丽梅方智远刘玉梅庄木张扬勇孙培田; 关键词：十字花科硫代葡萄糖苷合成基因调控基因

青花菜小孢子胚植株再生及倍性研究被引量：9: 2010年; 以庆农70和庆农80为试材对青花菜小孢子胚状体植株再生因素进行研究。结果表明:胚龄为30～35d且发育健壮的子叶形胚再生成苗率最高,超过75%,胚龄超过40d再生成苗率显著降低;琼脂浓度为1.2%时,小孢子胚再生成苗率最高,达60%～70%;大多小孢子胚不能直接成苗,二次分化频率较高;植株继代和复壮培养适宜培养基为MS+3%蔗糖+1.0%琼脂;小孢子再生植株一半左右为单倍体,二倍体率为30%～35%,存在少数四倍体和嵌合体。; 王春丽王涛涛张余洋李汉霞; 关键词：青花菜胚状体植株再生倍性鉴定

甘蓝硫代葡萄糖苷含量与其相关基因表达关系初探: 硫代葡萄糖苷(硫苷)作为十字花科植物特有的一种次生代谢产物,其本身及其降解产物具有重要的生物活性,如抗虫、防癌、硫素调节、风味形成等。本研究中以4份甘蓝(两份高硫苷含量、两份低硫苷含量)品系为材料,通过对其叶片进行昆虫取...; 程坤仪登霞杨丽梅方智远刘玉梅庄木张扬勇; 关键词：甘蓝硫代葡萄糖苷荧光定量PCR 基因表达; 文献传递

Bt cry1Ia8抗虫基因对结球甘蓝的转化及其表达被引量：13: 2009年; 以结球甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)的下胚轴和具柄子叶为外植体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白基因cry1Ia8导入结球甘蓝中,共获得38株卡那霉素抗性植株。PCR和Southern blot检测证实cry1Ia8基因已经成功导入并整合到甘蓝的基因组中;RT-PCR和Western blot检测表明,cry1Ia8基因在转录和翻译水平有一定的表达;转化植株叶片离体饲喂敏感小菜蛾(Plutella xylostella)和对Cry1Ac蛋白表现抗性的小菜蛾的试验表明,该基因不仅对敏感小菜蛾有很强的抗性,对抗性小菜蛾也具有较强的抗性。; 崔磊杨丽梅刘楠郎志宏刘玉梅庄木张扬勇张友军黄大昉方智远; 关键词：结球甘蓝小菜蛾 BT基因转基因抗虫性

农杆菌介导的Bt抗虫基因cry1Ia转化甘蓝的研究: 结球甘蓝是我国的一种重要蔬菜,在我国蔬菜周年生产中占有重要地位。但生产上甘蓝虫害发生相当严重,危害结球甘蓝的主要害虫有鳞翅目的菜粉蝶和小菜蛾等,由于抗虫材料缺乏,选育抗; 杨丽梅黄大昉方智远郎志宏张杰张友军庄木崔磊; 文献传递

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