国家自然科学基金(30770902)
- 作品数：8 被引量：39H指数：3
- 相关作者：刘秀华王晓礽韩文玲李婷王松更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院北京大学山东大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肌纤生成调节因子-1促肌节F-actin组装引起新生乳大鼠心肌细胞肥大
- 2015年
- 目的探索肌纤生成调节因子-1(myofibrillogenesis regulator-1,MR-1)通过调节肌原纤维生成引起心肌肥大的机制。方法干预MR-1在体外培养的新生乳大鼠心肌细胞中的表达,检测心肌细胞表面积、心房利钠因子和脑钠肽水平及蛋白合成速率3种心肌肥大指标的变化,以鬼笔环肽-异硫氰酸荧光素标志并观察肌节F-actin组装,以半定量反转录-聚合酶链反应、免疫印迹和细胞免疫荧光术检测重要肌节分子myomesin-1、肌球蛋白调节轻链-2(myosin light chain-2,MLC-2)含量及亚细胞定位。结果 MR-1过表达引起心肌细胞肥大、肌节F-actin组装明显促进、MLC-2与myomesin-1表达上调(P<0.05)以及myomesin-1的细胞核-细胞质转位;MR-1沉默后小泛素样调节因子-1过表达引起的转位和肌节F-actin组装明显抑制。结论 MR-1通过促进myomesin-1和MLC-2调节肌原纤维生成引起心肌细胞肥大。
- 王晓礽刘秀华王松栾康
- 关键词：心肌细胞肥大F-ACTIN
- 人肌原纤维生成调节因子-1的研究进展被引量：1
- 2009年
- 人肌原纤维生成调节因子-1(myofibrillogenesis regulator 1,MR-1)是一个新近报道的人类功能基因,定位于2q35,mRNA全长755bp,编码一段142个氨基酸组成的蛋白质,在心肌、骨骼肌、肾和肝中高表达。该基因与稍迟报道的发作性非运动源性运动障碍(paroxysmal nonkinesigenic dyskinesia,PNKD)基因三条转录剪接异构体中最短的PNKD-3在定位和序列上几乎完全一致。较长的剪接异构体MR-1L(PNKD-1)只在中枢神经系统中特异性表达,位于该亚型1号外显子上的碱基突变是导致PNKD的直接原因;MR-1S(PNKD-3)则被发现参与了心肌肥大的发生,其机制可能与调节肌肉收缩相关装置有关。
- 王晓礽刘秀华
- 关键词：心肌肥大
- 人肌纤生成调节因子1真核表达载体的构建及其在乳鼠心肌细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建人肌纤生成调节因子1全长的真核表达质粒,并观察其在HEK293T细胞系及Sprague-Daw-ley乳鼠心肌细胞中的表达。方法从NCBI GenBank数据库中克隆得到人肌纤生成调节因子1基因(AF417001)全长序列,与真核表达载体质粒pcDNA3.1/Myc-His(-)B连接并转化大肠杆菌XL1-Blue,筛选阳性克隆,T7引物测序,转染细胞后以逆转录聚合酶链反应、Western Blotting方法检测人肌纤生成调节因子1的表达。结果pcDNA3.1/Myc-His(-)B-hMR-1质粒经测序证实目的基因序列正确,无碱基突变。该质粒转染到HEK293T细胞系和乳鼠心肌细胞后人肌纤生成调节因子1的转录水平及表达水平明显增高。结论成功构建了人肌纤生成调节因子1全长的真核表达载体并确定了简便有效的乳鼠心肌细胞瞬时转染方法。
- 王晓礽刘秀华李婷韩文玲
- 关键词：质粒构建乳鼠心肌细胞
- Calcineurin is involved in cardioprotection induced by ischemic postconditioning through attenuating endoplasmic reticulum stress被引量：23
- 2011年
- 背景 Ischemic postconditioning ( I-postC )是一最新发现了并且能够保护心肌层免受 ischemia/reperfusion ( I/R )的伤害的更顺从的 cardioprotective 策略 injury.Endoplasmic 蜂窝胃(嗯)是为秘书蛋白质合成和钙 storage.Myocardial I/R 原因的一个主要地点嗯应力和新兴的研究建议 cardioprotection 被连接了到调整嗯现在的学习的 stress.The 目的是决定是否 I-postC 的 cardioprotection
- CHEN Yi-hong WU Xu-dong YAO Shu-tong SUN Seng LIU Xiu-hua
- 关键词：钙调神经磷酸酶CASPASE肌酸激酶同工酶
- 肌纤生成调节因子-1促进myomesin-1 SUMO化引起的肌节装配
- 2010年
- 王晓礽刘秀华王松栾康徐菲菲
- 关键词：心肌肥大UBIQUITIN克隆基因
- 内质网应激与心肌肥大被引量：12
- 2009年
- 肌浆网是调控心肌细胞钙稳态、蛋白质合成和细胞凋亡的重要亚细胞器。内质网应激是指内质网理化环境改变和过负荷等因素导致未折叠/误折叠蛋白在内质网聚集和钙稳态失衡等内质网功能紊乱状态。适度的内质网应激有利于心肌细胞代偿,持续而严重的内质网应激则触发内质网应激相关细胞凋亡,造成肥大心肌由代偿转向衰竭,是影响心肌肥大发生、发展的重要因素。本文综述了内质网应激反应在心肌肥大发生、发展中的作用。
- 刘秀华
- 关键词：内质网应激心肌肥大
- 人肌纤生成调节因子-1抗体的制备、鉴定及其在乳鼠心肌细胞中的应用被引量：3
- 2010年
- 目的:制备抗人肌纤生成调节因子-1(hMR-1)的多肽抗体,并对其纯度、特异性、效价及适用性进行检测和鉴定。方法:TMHMM、DNAstar等软件分析hMR-1蛋白序列,选取2段优势抗原序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,混合后免疫家兔。抗血清经过免疫亲和层析法纯化得到多克隆抗体。用ELISA法检测效价,Western blotting和细胞免疫荧光(immunocytofluorescent,ICF)法鉴定其特异性和适用范围,并观察其在乳鼠心肌细胞中的应用情况。结果:(1)抗体效价达1∶105,Western blotting检测到与预测分子量17kD相符的条带,ICF图像背景低,阳性结构清晰。(2)乳大鼠心肌细胞实验发现荧光信号浓集于核周,过表达hMR-1后荧光强度明显高于空载对照和正常对照。结论:制备的抗hMR-1多肽抗体效价及特异性可用于Western blotting及ICF实验,可识别人源性和大鼠源性抗原表位,该工作将为进一步深入研究新基因hMR-1的功能奠定基础。
- 王晓礽刘秀华宋泉声李婷韩文玲
- 关键词：抗体乳鼠心肌细胞
- 肌纤生成调节因子-1促进myomesin-1 SUMO化引起的肌节装配
- ＜正＞新克隆基因人肌纤生成调节因子1（myofibrillogenesis regulator 1,MR-1）参与心肌肥大但具体调节机制不明,我们在乳大鼠心肌细胞过表达及沉默MR-1（转染pcDNA3.1-hMR-1质粒...
- 王晓礽刘秀华王松栾康徐菲菲
- 文献传递
- 腹主动脉狭窄致大鼠心肌肥大后心肌组织蛋白质组变化的研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨腹主动脉狭窄诱导大鼠心肌肥大后心肌组织蛋白质表达谱的变化。方法健康雄性Wistar大鼠12只,随机分为模型组和对照组(均n=6)。模型组行腹主动脉缩窄术,对照组仅分离腹主动脉不行缩窄术。术后4周结束实验并提取左心室组织蛋白质,双向电泳分离心肌组织蛋白质,分析差异显示的蛋白质并选取9个差异显著的蛋白点进行胶内酶切和质谱分析。结果双向电泳可分离(454±13)个蛋白质,点匹配率为(78.7±1.4)%,心肌组织13种蛋白质出现明显差异表达,与对照组比较,模型组4种蛋白质表达上调,9种蛋白质表达下调。质谱分析鉴定出7个蛋白质为:与能量代谢相关的丙酮酸脱氢酶E1和β-烯醇酶、与细胞收缩功能相关的α-肌球蛋白重链和心脏α-肌动蛋白前体、与甲状腺激素代谢相关的甲状腺素结合蛋白等5种蛋白质在模型组表达下调,肌球蛋白轻链和与细胞内源性保护相关的热休克蛋白B6等2种蛋白质在模型组表达上调。结论腹主动脉缩窄致大鼠心肌肥大后,心肌组织蛋白质组变化显著,这些变化涉及与心肌细胞能量代谢、细胞骨架以及心肌收缩等有关的几组蛋白质,提示上述蛋白质组改变可能参与了心肌肥大过程。
- 张振英刘秀华孙胜荣飞郭晓笋胡维诚
- 关键词：心肌肥大蛋白质组双向电泳质谱
