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大鼠胰腺癌微环境诱导未成熟树突状细胞功能的变化被引量：2: 2009年; 目的观察胰腺癌微环境对树突状细胞（DC）成熟的影响及功能变化并探讨胰腺肿瘤细胞免疫逃逸的机制。方法培养树突状细胞，加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rmGM-CSV）40μg／L、白细胞介素（IL）-440μg／L，培养到第6天时得到大量的未成熟树突状细胞（imDC），加入大鼠胰腺癌细胞（AR42J cell）培养上清液诱导，流式细胞术检测DC的表面分子CD86、CD80的表达（n=6），观察能否延缓或阻断imDC的成熟及其在脂多糖（LPS）刺激后这种作用能否被逆转。并观察AR42J细胞培养上清诱导的DC对同种异体混合淋巴细胞增殖。结果加入胰腺癌癌细胞上清液培养的DC，与正常成熟的DC比较，CD80^＋CD86^＋阳性率由（70．88±3．60）％降至（7．15±0．71）％，LPS刺激后DC细胞的表面分子CD80^＋CD86^＋表达仍然较低（7．43±1．05）％，表明胰腺癌细胞培养上清液对DC的成熟有阻断作用。AR42J细胞上清诱导培养的imDC组刺激同种异体混合淋巴细胞增殖的强度显著低于正常培养的imDC组刺激同种异体混合淋巴细胞增殖的强度。结论体外大鼠胰腺癌细胞培养上清液可以诱导DC处于不成熟状态，且这种不成熟状态不容易被逆转。; 徐钧李卫斌李元栋; 关键词：胰腺癌树突状细胞免疫逃逸

不同浓度γ干扰素诱导大鼠脾脏来源树突状细胞表达吲哚胺2，3-双加氧酶的变化及对T淋巴细胞增殖的影响被引量：2: 2011年; 目的观察不同浓度γ干扰素（IFN-γ）作用下大鼠脾脏来源的树突状细胞（Dc）中吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）mRNA和蛋白表达的变化及IDO对同种异体T淋巴细胞增殖的影响。方法应用细胞因子体外诱导培养大鼠脾脏来源DC，应用流式细胞仪测定大鼠DC特异性分子OX62和表面分子CD80、CD86的表达。分别用不同浓度（0、100、300、500U／m1）的IFN-γ诱导作用DC后，实时聚合酶链反应（Real-timePCR）测定DC中IDOmRNA的相对表达水平，Westernblot检测DC中IDO蛋白在Dc中的表达水平。同种异体混合淋巴细胞反应（MLR）检测不同浓度IFN-γ诱导后的DC对同种异体T淋巴细胞增殖的影响。结果体外诱导培养的DC光学娩微镜下观察，具有典型的树枝状突起。OX62表达率达到80％以上，CD80、CD86的阳性表达也在80％左右；DC的IDOmRNA（2-ΔΔCt值分别为：1．010±0．094、1．340±0．114、1．700±0．087、2．080±0．150）和蛋白的相对表达量（分别为-0．861±0．612、1．155±0．059、1．308±0．068、1．755±0．118）随着IFN．7作用浓度的增大逐渐增大，分别为：不同浓度组间差异有统计学意义（P〈0．05）；各组IFN-γ作用后DC与对照组比较，T淋巴细胞的增殖率显著降低（P〈0．05）；且随着IFN-γ作用浓度的增大T淋巴细胞的增殖率逐渐降低，A值分别为：0．458±0．041、0．423±0．030、0．349±0．019、0．312±0．036，各组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用改良的培养黏附法体外获得纯度较高的大鼠脾脏来源的DC；IFN-γ可以诱导大鼠脾脏来源DC表面活性IDO的表达增加，减弱脾脏DC对同种T细胞增殖的刺激能力．; 徐钧孔祥顺李元栋; 关键词：吲哚胺2,3-双加氧酶 Γ干扰素 T淋巴细胞

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山西省自然科学基金(2009011052-2)

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